艾滋病初筛检测实验操作规程

1、艾滋病初筛检测实验操作规程1. 目的保证艾滋病病毒抗体ELISA实验的准确性。2. 适用范围艾滋病病毒抗体ELISA实验。3. 具体要求31样品采集样品采集安试剂盒要求采集。采血时注意安全，用一次 性注射器谨慎操作，防止发生刺伤和造成外界污染。血样 如即时用可存于普通冰箱，如要长期保存，分离血清置于-20及以下。同时做好记录。3.2样品运送样品转送，除特殊需要外，必须是血清或血浆，置于带 有盖帽的试管内，或将塑料试管用酒精灯封死，防止样品 流出。试管上标明姓名、时间、编号，将试管放入专门带 盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试管周 围上下垫有软性物质，以免碰碎，容器外标有HIV检测专

2、 用字样和生物危害标志。路途较远或气候炎热时，容器应 置于4以下运送。这样同时附送检单。3. 3样品登记和处理3. 3.1收到样品后，及时填写标本登记记录表，送样人、收 样人签字，如已进行过初检，登记初检结果和实验方法及 所用试剂情况。3. 3.2对从其他实验室送来的样品，检查并注明送检单与标 本记录的符合、样品管破损、溢漏等情况。如有溢漏应立 即将尚存的血样移出，并对管壁和盛器消毒。检查并记录 样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸 等情况。3. 3. 3对实验室自采的样品，最好将血液先放置1-2个小时, 再用3000离心15分钟，吸岀上清液备用，如在几天内检 测可放在2-8冰箱

3、中，如要贮存，置于-20冰箱。3. 4实验准备3. 4. 1将试剂从冰箱中取出，按试剂盒要求时间恢复室温。3.4.2检查并记录冰箱、温箱温度。3.4.3按照试剂盒要求准备实验原始记录表，标明空白、阴 性对照、阳性对照、外部质控血清以及检测样本的位置： 登记日期和实验起止时间，记录环境条件及试剂盒厂家、 批号、效期：整个实验过程中每一步操作都要在原始记录 表上详细登记。3. 4. 4按照试剂盒的要求配置洗液及其他所需要的试剂。3.5加样和稀释根据样品数量将合适数量的酶标板条固 定在板架上，为了不损坏洗扳机，每道上的酶标板条必须 保持完整不足部分可用废弃的微孔添充,检查加样器加 样刻度是否与I检验

4、地带网丨试剂盒要求的加样量相符，按 照原始记录表表明的位置加入各种质控品和检测样品，注 意：空白只加标本稀释液。加样量和稀释度严格按照试剂 盒说明书规定的操作，一般先加样品稀释液后再加入样 品。加样要准确，小心不要使吸头碰着酶标板空上是包被 抗原。为保证加样的准确，最好使用多孔道加样器，使用 时注意防止吸头间的交叉污染。3.6温育贴好封板膜，按照试剂盒要求的温度和时间进行 温育，最好选择湿育方法。3.7洗板 开启洗板机前，先检查洗板机废液瓶是否己排空, 开启后先用蒸锚水冲洗管道，再换上洗液瓶。按照试剂盒 的要求，选择、修改洗扳方式、洗涤次数和浸泡时间，根 据所用酶标板的条数确定洗板道数，根据酶

5、标板的位置调 节洗头的位置，然后开始洗板，洗板结束后用蒸憾水冲洗 管道。3. 8加酶结合物对于二步法ELISA实验需加酶结合物，按试 剂盒要求完成。3.9加底物洗好板后应立即加底物，需加自配的底物应现配 现用。3. 10终止反应 在规定的时间内用试剂盒中的或根据要求自行配置的终止液终止反应。3.11酶标仪读物 按照试剂盒的要求选择滤光片，确定空白 孔位置，选择合适的打印报告格式，读数并打印结果。3. 12所用仪器在使用后及时填写使用记录。3. 13结果判断计算3. 13. 1根据试剂盒说明书要求的阴阳对照0D值范围判断实 验的准确性，阴阳性对照0D值在范围之内，试验方可成 立，超出范围，试验失败，整个实验重做。3. 13. 2在指控图上标出外部指控血清的S/CO值，判断实验 结果是否被接受。3.13.3以上两个条件俊被接受后，根据试剂盒要求计算 cutoff值。小于cutoff值的标本为阴性，大于或等于 cutoff值得标本为阳性，在cutoff 10%的标本为灰色带 反应。阳性及灰色反应区标本，用原有的试剂盒另一种试 剂重复试验。3. 14结果登记和报告将试验结果登记在级路标和标本试 剂表上，将0D值打印结果贴在原始记录表上，检查原始 记录表是否填写完整，操作者，复核者签字。阴性结果出 具HIV抗体筛查报考，阴性结果填写HIV抗体筛查阳性送 检单。3. 1