微生物应用技术常见的细菌

1、第一部分第一部分 致病菌致病菌 一、葡萄球菌 五、沙门氏菌 六、厌氧芽孢杆菌 四、大肠杆菌 二、链球菌 三、炭疽杆菌 八、猪丹毒杆菌 七、巴氏杆菌 第一节第一节 葡萄球菌葡萄球菌 葡萄球菌是常见的化脓性球菌之一， 80%以上的化脓性疾病是由本菌引起的。 一、生物学特性 1.形态与染色 （1）典型的为圆形，成堆排列如同葡萄状。 （2）无芽胞、无鞭毛、一般不形成荚膜。 （3）革兰氏阳性菌G+。 （4）在脓汁或液体培养基中成双球或短链。 2.培养特性 （1）对营养要求不高 在普通琼脂平板上形成圆形、隆起、 湿润、边缘整齐、表面光滑、有光泽不透 明的菌落。 致病菌最适温度37，最适Ph7.4。 （2）

2、不同的菌株产生不同的脂溶性色素 金黄色、白色、柠檬色 （3）出现溶血环 在血琼脂平板上培养，形成溶血环，也有不发生溶血。 3.抵抗力 无芽胞菌中，葡萄球菌的抵抗力较强。 对碱性染料较敏感。 u1%3%龙胆紫（紫药水）治疗葡萄球菌引起的化脓症，效果良好。 u阳离子的表面活性剂也可杀死本菌。（新洁尔灭） 4.抗原构造及分类 构造多达30余种。蛋白质抗原和多肽类抗原较重要。 蛋白质抗原主要是A蛋白，位于细胞壁表面，广泛应用于免疫诊断。 多糖类抗原多用于分类定型。 二、致病性 1、致病物质 葡萄球菌的毒力因子主要是毒素和酶 （1）血浆凝固酶： 作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。 凝固酶有游离凝固酶

3、和结合凝固酶。 凝固酶耐热，100，30min或高压灭菌后仍具有活性，但易被蛋白分解酶破坏 （2）溶血素 人源菌株多产生毒素，而动物分离菌株产生溶血素。 （3）肠毒素： 是一种可溶性蛋白质，耐热抗酸,100， 30min不被破坏，也不受胰蛋白酶的影响。 误食污染肠毒素的食物后，引起急性胃肠 炎症状。 2、所致疾病 引起的疾病为畜禽的化脓性疾病。 案例 近日偶见一病例，40日龄左右肉鸡出现大腿关节肿胀，剖检发现关节腔内有大量脓性渗出物。 分离划线染色，以及进行药敏试验。初步诊断为鸡葡萄球菌病。 药敏试验丁胺卡那霉素敏感， 阿奇霉素中度敏感， 庆大霉素、林可霉素、哌拉西林、吡哌酸、恩诺沙星有耐药性

4、 三、微生物学诊断 1、镜检 （1）形态的观察 取病料涂片，革兰氏染色后镜检，呈现 革兰氏阳性葡萄状排列。 2、分离培养与鉴定 将病料接种于普通琼脂平板和血琼脂平 板上，35培养18-24h后观察菌落。 （1）普通琼脂平板上： 中等大小、圆形、表面光滑、边缘整齐，不透明的菌落，并产生脂溶素。 （2）血琼脂平板 出现类似普通琼脂平板上的菌落。 金黄色葡萄球菌菌落周围有明显的溶血 环。 3.凝固酶试验 是鉴定金黄色葡萄球菌致病性的重要指 标。 四、防治 皮肤创伤及时处理；合理使用抗生素药 物。 第二节第二节 链球菌链球菌 链球菌是化脓性球菌的另一类常见的细 菌，呈链状排列，故名为链球菌。 广泛分布

5、于自然界、人及动物粪便、健 康人畜的鼻咽部。 一、生物学特性 1.形态与染色 （1）球形或卵圆形，链状排列，链长短不一。 （2）固体培养基链长4-8个菌，液体培养基链长20-30个菌。 （3）多数幼龄培养物中可见到荚膜。 （4）无芽孢和鞭毛，革兰氏阳性。 2.培养特性 营养要求较高。在普通培养基中生长不 良，需在普通培养中加入血液、血清等才能 生长。 u温度37，pH7.4-7.6。 u血琼脂平板上形成灰白、光滑、圆形突起小菌落。 u出现溶血现象。 3.分类 根据链球菌在血琼脂平板上的溶血现象分为三类： （1）甲型（） 溶血性链球菌： 菌落周围有1- 2mm宽的草绿色不 完全溶血环。 致病力较

6、弱。 （2）乙型（） 溶血性链球菌： 菌落周围形 成一个2-4mm的 透明的溶血环。 致病力强。 （3）丙型（） 链球菌： 不产生溶血 素。对人类无 致病作用。 4.按抗原构造分类 根据细胞壁中的多糖抗原C抗原的 不同，将乙型溶血性链球菌分为A-H K-U 19个血清群 5.抵抗力 不强。常用消毒药10 分钟内可以杀死 本菌。5%石碳酸、2%甲醛、0.05%洗必泰、 0.01%度米芬、0.1%高锰酸钾液在5min内可将 其杀死。 青霉素是首选药物，其他有氯霉素、四 素、磺胺类。 二、致病性 1.致病因子： 毒素、酶和外毒素。 2.不同的血清群的链球菌所引起的动物疾病不同。 （1）急性：出血性败

7、血症和脑炎； （2）慢性：关节炎、心内膜炎及组织化脓性炎。 三、微生物学检查 可采取脓汁、咽拭、血液等标本送检。 1.镜检 取脓汁涂片，革兰氏染色，镜检。若呈 革兰氏阳性，链状排列的球菌，可初步诊断。 2.分离培养 将病料接种于血液琼脂平板上，培养 后观察菌落，观察菌落周围的溶血情况。 必要做生化及血清学试验。 四、防治 1、创伤及时处理； 2、疫苗注射； 3、感染家畜及早使用药物治疗。 猪链球菌病 一种人畜共患的急性、热性传染病，由C、D、E 及L群链球菌引起的猪的多种疾病的总称。表现为 急性出血性败血症、心内膜炎、脑膜炎、关节炎、 哺乳仔猪下痢和孕猪流产等。 猪链球菌感染不仅可致猪败血症肺

8、炎、脑膜 炎、关节炎及心内膜炎,而且可感染特定人群发 病,并可致死亡，危害严重。 炭疽芽孢杆菌惯称炭疽杆菌，是引起人 类、各种家畜和野生动物炭疽的病原，在兽 医学和医学上均占有相当重要的地位。 第三节 炭疽杆菌 炭疽杆菌能从损伤的皮肤侵入，在局部 形成水泡，水泡越来越多，形成一个不断扩 大的水中区域，最后周围组织变硬，结成黑 似炭块的痂，所以称为炭疽。 一、生物学特性 1.形态与染色 菌体粗大，两端平切，连接 清 晰，竹节状。 无鞭毛，不运动。在人和动物 体 内能形成荚膜。人工培养或外界环 境（2530）中形成芽孢， 芽 孢椭圆形，位于菌体中央。 革兰氏阳性杆菌。 2.培养特性 （1）培养条件

9、 此菌为需氧菌，营养要求不高，普通培 养基中能生长良好。最适温度为37，最适 pH值为7.27.4。 （2）琼脂平板培养 菌落灰白，边缘不整齐，呈卷发样。菌 落有黏性，用接种针钩取可拉成丝，称为 “拉丝”现象。 血液平板轻微溶血。 （3）肉汤培养 上部液体清亮透明，管底有白色絮状沉淀； （4）明胶培养 沿穿刺线生长如“倒松树”状。能液化明胶。 炭疽杆菌受低浓度青霉素作用，菌体可 肿大形成圆珠，称为“串珠反应”。这是炭 疽杆菌特有的反应。 3.抵抗力 (1)繁殖体 抵抗力不强，易被一般消毒剂杀灭。 (2)芽孢 抵抗力非常强，在干燥室温环境中可存 活数十年,皮毛中存活数年。 对碘特别敏感。高压蒸汽

10、消毒、干热均可 杀灭芽孢； 4.抗原构造 （1）菌体抗原：与毒力无关，耐热，与特异性 抗体发生环状沉淀，可用于鉴定和诊断 （Ascoli氏反应）。 （2）荚膜抗原：半抗原，与毒力有关，可抵抗 吞噬。 （3）保护性抗原：炭疽毒素的组成部分，有免 疫原性。 （4）芽胞抗原：具有免疫原性。 二、致病性 主要感染草食动物，牛、绵羊、鹿最 易感，马、猪次之，禽类一般不感染。 1.皮肤炭疽 最常见，由体表破损进入体内。 2.肠炭疽 由食入病兽肉制品所致，以全身中毒症状为主，发病2-3日内死亡。 u毒力主要与荚膜和毒素有关。 （1）荚膜：侵入体内后形成。 （2）毒素： 包括水肿毒素和致死毒素两种。 三、微生

11、物学诊断 1.镜检： 采集皮肤炭疽的脓液、渗出物，肠炭 疽的粪便以及病人的的血液等送检，兽尸 禁止解剖，可割取耳朵或舌尖一片送检。 将标本直接涂片，碱性美兰或瑞氏染 色镜检，观察形态及荚膜特征，可以初步 诊断。 2.分离培养： 取病料进行血平板分离培养，37孵 育1215小时，钩取可疑菌落，进行青霉素 串珠试验。 3.动物试验： 接种小鼠可引起败血症性死亡，剖检可 见皮下胶样水肿，脾脏肿大，内脏和血液中 含有大量炭疽杆菌。 4.Ascoli反应 炭疽环状沉淀反应。 用已知炭疽沉淀血清与待测炭疽沉淀抗 原进行反应，如在接触面产生白色沉淀环， 即可诊断。 四、防治 预防接种：常用无毒炭疽芽孢苗和I

12、I号 炭疽芽孢苗。 治疗：血清学疗法和抗生素及磺胺类药物。 尸体应焚烧或深埋2m以上。 第四节 大肠杆菌 大肠杆菌是动物肠道的正常菌群，在消化道后段大量繁殖而定居终生伴随，并经粪便 不断散播于周围环境。 能合成维生素B和维生素K，产生大肠杆菌素，抑制致病性大肠杆菌的生长。 致病性大肠杆菌在一定条件下能引起动物大肠杆菌病的发生。 一、生物学特性 1.形态与染色 革兰氏阴性菌，无芽胞的直杆菌，中 等大小，两端钝圆，散在或成对；多数 有 周鞭毛，有菌毛，少数菌株兼具有性菌 毛。 无可见荚膜，但常有微荚膜。 2.培养特性 对营养要求不高，最适温度37，最适ph值为7.27.4。 普通琼脂：中等大小，光

13、滑，半透明、 灰白色菌落； 麦康凯琼脂：红色的菌落； 伊红美蓝琼脂：紫黑色带金属光泽菌落； 血液琼脂：有的菌株形成溶血环。 3.抵抗力 对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55 经60min或60经15min仍有细菌存活。 对抗生素敏感，但易耐药，临床上应做 药敏试验，选择合适药物。 4.抗原结构 大肠杆菌抗原主要有菌体抗原(O)、荚膜 抗原(K)、鞭毛抗原(H)三种。已确定的O抗 原有173种，K抗原有80种，H抗原有56种。 可用O:K:H排列表示其血清型。 表示O8K25H9。 二、致病性 1.产肠毒素大肠杆菌 致病因素：2种 （1）黏附素性菌毛： 能黏附与宿主的小肠上皮细胞，避免肠 蠕动和肠

14、液的清除作用。 （2）肠毒素： 菌体生长时产生并分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。 l 引起幼畜腹泻最常见的致病菌。 2. 产 类 志 贺 毒 素 大 肠 杆 菌 引 起 婴 幼 儿 腹 泻、 人 出 血 性 肠 炎。 动 物， 引 起 仔 猪 黄、 白 痢 水 肿 病。 和 三、微生物学诊断 1.镜检： 取病料涂片染色镜检。 如发现有革兰染色阴性，散在或成对、中等大小、两端钝圆的直杆菌，可 初步诊断。 2.分离培养： 将病料接种于培养基，培养24h,观察菌体特征。 （普通琼脂、麦康凯、伊红美蓝琼脂上） 四、防治 1.疫苗免疫（多血清型）； 2.加强管理； 3.对病畜使用敏感抗菌药物和抗血清治疗。

15、 第五节、第五节、 沙门氏菌沙门氏菌 沙门氏菌是肠杆菌科沙门氏属的细菌， 是寄生于人类及各种动物肠道内的菌，绝 大多数沙门氏菌对人和动物有致病性。 一、生物学特性 1.形态与染色 本菌呈直杆状，除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛不运动外，其余各菌具有周生鞭毛， 能运动。无荚膜和芽孢 革兰氏阴性菌。 鸡白痢沙门氏菌鸡白痢沙门氏菌 马流产沙门氏菌马流产沙门氏菌 2.培养特性 本菌在普通培养基中生长缓慢，需加 入血清、血液等能良好生长。 在固体培养基上培养2d后，可见到光滑、 湿润、有光泽、圆形、隆起、边缘整齐的针 尖大小的菌落。 在血液琼脂平板上一般不溶血。 3.生化特性 多数沙门氏菌不发酵乳糖和蔗糖

16、，能 发酵葡萄糖、麦芽糖、和甘露醇，产酸产气。 4.抵抗力 本菌对外界抵抗力较强。 对消毒剂的抵抗力不强。 二、致病性： 沙门菌的毒力因子有多种：内毒素、 肠毒素等。 本菌通过动物的消化道和呼吸道传播； 也可通过自然交配或人工授精传播；还可通 过子宫内感染或带菌禽蛋垂直传播。 与畜禽有关的沙门氏菌有： 1、猪霍乱沙门氏菌 仔猪副伤寒 2、鸡白痢沙门氏菌 雏鸡白痢 3、鼠伤寒沙门菌 畜禽的副伤寒 三、微生物学诊断 1、采取病料 采取粪便、肠内容物、阴道分泌物、肝 脏等。 2、分离培养 将病料接种于下列培养基： （1）麦康凯培养基 长出无色菌落（不发酵乳糖）。 （2）SS琼脂 菌落呈灰色，中心带黑

17、色。 （3） 菌落呈黑色。 第六节第六节 厌氧芽胞杆菌厌氧芽胞杆菌 厌氧芽胞杆菌只有一个属，称梭状芽胞杆 菌属，简称梭菌属，革兰氏染色阳性，都能产 生芽胞，芽胞直径大，多比菌体宽，使菌体 膨 大成梭形，故得名。 大多数须在严格厌氧条件下才能生长， 少 数可在微氧环境中繁殖。 （一）破伤风梭菌 （二）肉毒梭菌 （三）魏氏梭菌 是引起破伤风的病原菌，大量存在于 人和动物肠道中，由粪便污染土壤，经伤 口感染引起疾病。 （一）破伤风梭菌 一、生物学特性 1.形态与染色： 菌体长直，多单在，周鞭毛，无荚膜。 芽孢位于菌体顶端，芽胞大于菌体。 繁殖体为G+，芽孢体G-。 2.培养特性 专性厌氧菌，对营养要

18、求不高，最适 生长温度为37，pH7.07.5。 （1）普通琼脂： 培养2448h后，可形成直径1mm 以上不规则的菌落，中心紧密，周边 疏松，似羽毛状菌落。 （2）血液琼脂:有明显溶血环。 （3）肉肝培养基：浑浊微变黑，产生气 体和发臭。 破伤风杆菌在厌氧血平板上的羽毛状菌落 破伤风杆菌咋肝肉培养 基上生长（浑浊、变 黑），右图未接种 3.抵抗力 繁殖体，100 5分钟杀死；芽胞体 在土壤中存活数十年 对青霉素和磺胺类药物敏感。 二、致病性 产生强烈的外毒素，即痉挛毒素或称 神经毒素。 补充： 破伤风梭菌在一般伤口中不能生长，伤口的厌 氧环境是破伤风梭菌感染的重要条件。窄而深的 伤 口(如剌

19、伤)，或大面积创伤、烧伤、坏死组织多， 局部组织缺血或同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合 感 染，均易造成厌氧环境， 多见于战伤。平时除创伤感染外，分娩时断脐 不洁，手术器械灭菌不严，均可引起发病。新生 儿 破伤风（俗称脐风）尤为常见。 全身强直 两耳竖立 牙关紧闭 四肢强直 脐带感染 角弓反张 三、诊断 1.根据临床症状和有无创伤。 一般不需要作微生物检验。 2.动物试验 四、防治 破伤风一旦发病，治疗困难，应以预 防为主。 1.每年定期接种精制破伤风类毒素。 2.防治外伤感染，发生外伤，注意伤口消毒。 3.紧急预防 除用类毒素加强免疫外，可再注射破伤风抗毒素。即在一臂注射抗毒素，另一臂注射类毒素

20、，612周 后再注射一针类毒素。实践证明，同时注射抗毒素和类毒素，预防效果好，且互不干扰。 4.特异治疗 早期使用破伤风抗毒素，疗效较好。 5.抗生素疗法 大剂量的青毒素能有效地抑制破伤风 梭菌在局部病灶中繁殖，故亦可用于治疗。 （二）肉毒梭菌（二）肉毒梭菌 肉毒梭菌是一种腐生性细菌，不能 在活的机体内繁殖，广泛分布于土壤和动 物粪便中。 肉毒梭菌是引起食物中毒的病原菌， 在自然界繁殖产生毒素，人畜误食被毒素 污染的食物后，发生中毒。 一、生物学特性 1.形态与染色 G+大杆菌，单独或成双排列，有时可见短链状。有 周身鞭毛，无荚膜。芽胞椭圆形，大于菌体，位于次 极端，使菌体似网球拍状。 2.培

21、养特性 严格厌氧。最适温度为3037。 对营养要求不高，普通琼脂培养基上 形成直径35mm不规则的菌落；血液琼脂 平板上有溶血。能消化肉渣，使之变 黑，有腐败恶臭。 肉毒梭菌纯培养镜下形态 肉毒梭菌在厌氧血琼脂平 板上的菌落特征 3.抵抗力 繁殖体抵抗力中等； 芽孢抵抗力极强。 二、致病性 产生外毒素，是一种神经毒素。是已 知毒素中最强的一种，它比氰化钾毒力还 大一万倍。 u人服0.1ug即可毙命；纯化的肉毒毒素1mg能杀死2亿只小鼠。 肉毒中毒的发生，主要由于豆类、肉类、腊肠及罐头食品等被肉毒梭菌或芽胞污染，在厌氧条件下繁殖产 生外毒素，被人食入所引起。 症状： 表现头晕、无力、视力模糊不清

22、、复视、 吞咽及呼吸困难，严重者可因呼吸衰竭或心 力衰竭而死亡。 因毒素不直接刺激肠粘膜，故无明显的 消化道症状。 三、诊断 1.毒素检查 病料稀释液注入小鼠腹腔，12天后 观察发病情况，如流涎、眼睑下垂、四肢 麻痹、呼吸困难，最后死亡等症状。 2.分离培养 病料煮1小时，接种于血液平板或疱肉 培养基中，培养2448小时，挑选可疑菌落，涂片检查细菌形态。 （三）魏氏梭菌（三）魏氏梭菌 又叫产气荚膜梭菌，危害绵羊和兔，引起 羔羊痢疾、羊肠毒血症和兔魏氏梭菌性下痢 1.形态与培养 大杆菌 偏端芽胞 呈椭圆形 培养： 无糖培养基-形成芽胞 血液琼脂平板-双层溶血环 牛乳培养基-暴烈发酵 2.致病性与

23、抵抗力 毒素：致死毒素 坏死毒素 溶血毒素 引起局部组织分解、坏死、产气、水肿及全身中毒 毒素种类 型毒素：有坏死、溶血和致死作用 型毒素：有坏死和致死作用 抵抗力与一般病原菌相似 3.检查 镜检 G+ 粗大钝圆杆菌不易见芽胞和荚膜 厌氧培养 血液琼脂平板 牛乳培养基等 动物试验 4.防治 三联灭活苗或五联灭活苗 多价抗毒素血清+抗生素 和磺胺类药物 第七节 多杀性巴氏杆菌 引起畜禽出血性败血症和传染性肺炎。 本菌分布世界各地，正常存在于多种健康动物的口腔和咽部黏膜。 引起内源性传染。 一、生物学特性 1.形态与染色 卵圆形，两端钝圆的球杆菌或短杆 菌，无芽孢和鞭毛，新分离的强毒株有 荚膜;

24、革兰氏阴性菌（ G-）。 巴氏 杆菌 2.培养特性 需氧或兼性厌氧。营养要求较严格。 （1）普通培养基：生长不好。 （2）麦康凯和含胆盐的培养基:不生长。 （3）血琼脂 生长良好，菌落特征为白色、湿润、 边缘整齐、光滑、闪光小菌落。 不具有溶血性。 3.抵抗力 不强，无菌蒸馏水和生理盐水中很 快死亡。一般消毒剂在几分钟或十几分钟 内可杀死本菌。 4.血清型 按照荚膜抗原（K抗原）分为ABDE四个 型 按照菌体抗原（O抗原）分为12个血清 型 表示方法：如一引起出血性败血症菌株 的血清型为B：6 二、致病性 猪：猪肺疫 禽：禽霍乱（鸭易感） 牛和水牛：出血性败血症 绵羊、兔：肺疫 三、微生物诊断

25、 1.镜检： 触片或涂片，用美兰染色，镜检， 2.分离培养： 用麦康凯琼脂和血琼脂平板同时进行分离培养。 u麦康凯琼脂不生长； u血琼脂：24后形成灰白、圆形、湿润、露珠状、不溶血的小菌落。 3.动物试验 皮下注射或肌注小鼠、家兔或鸽 子，动物多在24-48h内死亡，剖检、镜检、 分离培养，确诊。 四、防治 疫苗控制的有效方法，猪肺疫氢氧 化铝甲醛苗、猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗；禽霍乱弱毒苗。 治疗使用抗生素，磺胺类药物。 八、猪丹毒杆菌八、猪丹毒杆菌 1.形态 G+纤细小杆菌，菌体正直或微弯，无芽胞，无荚膜，无鞭毛 病料中-单、双或成丛； 白细胞中-成丛 老龄培养物或心内膜疣状物中成丛 2.培养 含血液或血清培