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文档简介
1、第二节基因工程的原理和技术【学习目标】1. 简述基因工程的原理2. 描述基因工程基本步骤的几个步骤3. 举例说出筛选含有目的基因的受体细胞的原理【教学重点】基因工程的基本操作步骤【教学难点】从基因文库中获取目的基因;筛选含有目的基因的受体细胞【学习过程】1. 总结基因工程的五个步骤。2. 阅读课文,归纳总结目的基因的获取方法和过程。3. 阅读课文,总结形成重组 DNA 分子的过程。4. 阅读课文,总结将目的基因导入受体细胞。5. 阅读课文,总结筛选含有目的基因的受体细胞。6. 阅读课文,总结目的基因的表达的鉴定方法。【知识梳理】1. 目的基因的获取2. 形成重组 DNA 分子(基因工程的核心)
2、3. 将目的基因导入受体细胞4. 筛选含有目的基因的受体细胞5. 目的基因的表达【典题解悟】1. 下列有关基因工程技术的正确叙述是()A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C. 选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D. 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达答案: C解析:基因操作的工具有限制酶、连接酶,一种限制酶只能识别特定的核 苷酸序列。运载体是基因的运输工具,目的基因进入受体细胞后,受体细胞表 现出特定的性状,才说明目的基因完成了表达,基因工程的结果是让目的基因 完成表达,生产出目的基因的产物,选择受体细胞
3、的重要条件就是能够快速繁 殖。2基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的,在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是()A. 人工合成基因B.目的基因与运载体结合C将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测和表达答案: C解析:人工合成基因时,不管是化学方法合成还是反转录法合成,都要涉 及到双链的互补;目的基因与运载体结合过程中,黏性末端的黏合就是通过互 补的碱基配对完成的;目的基因的检测和表达过程中基因表达的转录和翻译阶 段肯定有互补现象发生。而 C选项中的目的基因导入受体细胞,是将重组 DNA 分子从细胞外转移到细胞内的过程,不涉及到碱基互补配对。【当堂测试】1.利用细菌大量生产
4、人的胰岛素,下列叙述错误的是()A. 用适当的酶对运载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合B. 用适当的化学物质处理受体细菌表面,将重组DNA导入受体细菌C. 通常通过检测目的基因产物来检测重组 DNA是否已导入受体细菌D. 重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录,并合成人的胰岛素2. 有关基因工程的叙述正确的是()A. 限制性内切酶只在获得目的基因时才用B. 重组质粒的形成在细胞内完成C. 质粒都可作运载体D. 蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料3获取目的基因的方法有多种,下列不属于目的基因获取方法的是()A.从基因组文库中获取B.利用反转录法获取C从含目的基因生物细胞中获取D.利用PCF
5、技术获取4. 在基因工程中,把选出的目的基因(共 1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个)放入DNA扩增仪中扩增4代,那么,在扩增仪中应放 入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是()A.540 个 B.8100 个 C.17280个 D.7560 个5下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造 工程菌”的示意图,所用的运载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基 因,质粒导入细菌B后,其上的基因能得到表达。请回答下列问题:(注:质 粒中的a点既是四环素抗性基因的存在位置,又是与目的基因的结合点;斜线 部分为抗氨苄青霉素基因)第 5 题图 13/ 4(1) 人工合成目的
6、基因的途径一般有哪两条?(2) 如何将目的基因和质粒结合成重组质粒?(3) 目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高,导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有极少数导入的是重组质粒。可通过以下步骤鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒;将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就是导入了质粒A和重组质粒的细菌,反之则说明没导入。使用这种方法鉴别的原因 是什么?参考答案:1.C2.D3.C4.B5. ( 1)将从细胞中提取分离出的目的基因作为模板,转录成 mRNA单链DNA双链DNA;据蛋白质中氨基酸序列mRNA中碱基序列DNA碱基序列目的基因。(2) 用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有粘性末端的切口;用同种限制酶切割目的基因,产生相同的粘性末端;将切下的目的
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