完整版)ABI7500仪器验证方案

1、编号：ABI 7500 验证方案方案制定：日期：方案审核：日期：方案批准：日期：上海 * 生物技术有限责任公司1、简介ABI7500实时荧光定量PCF仪，是美国应用生物系统公司推出的基于微孔 板的高通量实时定量PCR系统，其反应速度及准确性、操作实用性和使用灵活 性均有较好的提高，能满足科研工作者对于定量 PCR系统高通量方面的要求， 是特异性靶基因检测与定量的一体化平台。它主要有一台 ABI 7500 Block kit 96和PC计算机及显示器组成。2、验证内容ABI7500实时荧光定量PCF仪的验证，主要从以下几个方面进行：PC计算机 运行环境的确认、ABI7500运行软件及分析软件的确

2、认、 ABI7500 PCR扩增及荧 光检测系统的确认。3、验证目的通过用HBV荧光PCF检测试剂盒来确认 ABI7500实时荧光定量PCF仪的扩增 和检测体系精密度、线性、准确度等，验证仪器能否正常准确运行，给出可靠 的分析结果，以及 96 孔孔间差异是否在允许范围内。4、验证内容4.1 PC 计算机运行环境确认4.1.1 运行环境确认内容检查配套计算机能否正常开机运行，是否有中病毒等现象，能否为ABI7500运行软件和分析软件提供安装平台和运行平台。4.1.1.2 结果记录4.2 ABI7500 运行软件及分析软件的确认4.2.1 软件确认内容双击电脑桌面上的ABI7500运行软件及分析软

3、件的图标，看应用软件能否 打开，能否正常使用。4.2.2 结果记录4.3 ABI7500 PCR 扩增及荧光检测系统的确认431灵敏度和线性431.1 方法利用HBV荧光PCF检测试剂盒，配制 20支HBV-PCR Mix并分别加入 HBV 企业灵敏度质控品（3.0E2,3.0E3,3.0E4 ，3.0E5, 3.0E6，3.0E7）、阴性对 照、空白对照，均做复管，按照说明书的操作步骤进行。4.3.1.2 合格标准（1）空白对照和阴性对照无起跳（2） 经标化的企业灵敏度质线性相关系数R 0.98，复管重复性良好。4.3.1.3 数据记录4.3.2孔间差异4.3.2.1 方法利用HBV荧光PC

4、R检测试剂盒，配制96支HBV-PCR Mix 88支分别加入相 同的模板HBV standard（3.0E4），另有3支加入不同浓度的 HBV standard 3.0E7 （管号 91 ）、HBV standard 3.0E6 （管号 90）、HBV standard 3.0E5（管号89），剩余5支分别为临界对照（管号92）、阳性对照（管号93）、 阴性对照（管号94,管号96）、空白对照（管号95），同时进行实时扩增检 测。4.3.2.2 合格标准（1）空白、阳性对照无起跳（2）每孔相对偏差值不大于8%4.3.2.3 数据记录4.3.2.4 数据分析孔间差计算方法：C Tix 100%(C T1 +Ct2 +Ct3 +Gn)/n5 异常情况处理在验证的过程中，应严格按照验证方案操作，若出现个别项目不合格，应查 明原因后重新进行验证。如果属于仪器设备原因，则由验证小组和质量部负责 人协同处理或联系厂家进行维修，并填写相应记录。6 验证最终结果分析和评定评定人： 评定时间：7再验证周期7.1 在一般情况下每一年验证一次。7.2 如更更换仪器零部件或重大维