血浆治疗若干问题的探讨课件

1、2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,1,血浆治疗若干问题的探讨,上海市血液中心 钱开诚,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,2,输血医学,输血是医学发展史上的重要里程碑 输血是最早获得成功的组织移植 输血是现代医学的重要支持手段 输血是未来医学的重要载体,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,3,临床输血相关法规,中华人民共和国献血法（1998） 第十三条：医疗机构对临床用血必须进行核查。；第十六条：医疗机构临床用血应当制定用血计划，遵循合理科学原则。国家鼓励临床用血新技术的研究和推广 医疗机构临床用血管理办法（1999） 第五条：医疗机构应当设立临床输血管理委员会，负责

2、临床用血的规范管理和技术指导。；第六条：二级以上医院设立输血科（血库），负责计划、储血、制度执行情况检查、参与临床诊断、治疗与科研 临床输血技术规范（2000） 总则；输血申请；受血者血样采集与送检；交叉配血；血液入库、核对、储存； 发血；输血；附件19,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,4,合理科学输血,现代输血理念 各类血液成分的适应症、指征和输注量 相关病例的输血治疗 输血不良反应的预防、诊断、处理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,5,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念 血浆生理概要及其临床治疗适应症 血浆置换疗法 被动免疫血浆治疗 血浆输注不良反应的预防、诊断、

3、处理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,6,现代输血理念,成分输血 科学、合理用血,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,7,成份输血定义,将全血分离，制备成各种高浓度、高纯度的血液成份制品。根据病情需要有针对性地输注不同的血液成份，称为成份输血。,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,8,成份输血的优越性,高效 安全 易于保存 节约血液资源,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,9,临床合理用血原则,“不可替代时选择”原则 满足生理需要原则 风险规避原则,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,10,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念 血浆生理概要及其临床治

4、疗适应症 血浆置换疗法 被动免疫血浆治疗 血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,11,血浆生理概要,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,12,血 液,血 浆,血 细 胞,红细胞 白细胞 血小板:,水：9092,血浆蛋白,溶质： 810,小分子物质,营养物质 激素 代谢产物,有机物,无机盐（电解质）,白蛋白 球蛋白 纤维蛋白原,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,13,血浆的构成,体重的 4% （ 40 45 ml / kg 体重） 组成 水 90 % 溶质 10 % 蛋白质 7 % 无机盐 0.9 % 其它有机物,2021/3/26,血

5、浆治疗若干问题的探讨,14,血浆蛋白的主要功能： 1.形成血浆的胶体渗透压 2.运输功能 3.参与凝血和抗凝血功能 4.防御功能 5.营养、缓冲功能,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,15,血浆蛋白 白蛋白,白蛋白 MW 67000 血浆中含量最多的蛋白 4048g/L 血浆总白蛋白 约 120 g 占人体总白蛋白的 40 % 功能 维持血浆胶体渗透压 运输 脂肪酸 胆红质等 肝脏合成 正常成人肝脏每日约合成12g白蛋白，相当300ml血浆所含的白蛋白 半寿期 约 20 天,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,16,免疫球蛋白和补体,免疫球蛋白 免疫球蛋白是一组主要由脾、淋巴

6、结和其他淋巴组织内的桨细胞所产生具有抗体活性的蛋白质 组成 IgG 、IgM、IgA、IgE、IgD 生物学效应：与抗原特异性结合；激活补体；与细胞表面Fc受体结合；参与免疫调节 补体 存在于血液和组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质 组成由30余种可溶性蛋白、膜结合性蛋白和补体受体组成的多分子系统(complement system)。根据补体系统各成分的生物学功能，可将其分为补体固有成分、补体调控成分和补体受体（CR） 生物学效应有：增强吞噬细胞的趋化性；增加血管的通透性；参与细胞溶解；参与免疫调节等,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,17,凝血、抗凝血和纤维蛋白溶解系统,血

7、液凝固：血液由流动的液体状态变成不流动的凝胶状血块的过程 抗凝血：阻碍血液凝固的机制 纤维蛋白溶解：纤维蛋白或纤维蛋白原被水解的过程,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,18,凝血因子 血液及其它组织中直接参与凝血的物质称为凝血因子。根据发现的先后顺序，以罗马数字编号,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,19,血液凝固的机理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,20,凝血过程 (瀑布学说) 凝血过程大体上分为三个基本步骤： 凝血酶原激活物形成 凝血酶原 凝血酶 纤维蛋白原 纤维蛋白,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,21,抗凝血机制 体液抗凝系统中的主要抗凝物

8、质： 抗凝血酶 (AT ) 肝素 蛋白质 C (PC) 体外的主要抗凝物质： 降低血钙浓度而妨碍血液凝固，如： 草酸盐 柠檬酸盐,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,22,纤维蛋白溶解机制 概念: 纤维蛋白或纤维蛋白原被纤维蛋白溶解酶 （简称纤溶酶）水解的过程，简称纤溶。 意义:使血液经常保持液态,血流通畅,防血栓形成。 纤溶的基本过程包括： 纤溶酶原的激活 纤维蛋白的降解，,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,23,血浆无机物,阳离子 Na+ 主要 140 mM K+ 4 mM Ca+ 1 mM Mg+ 2 mM 阴离子 Cl 主要 103 mM HCO3- 28 mM,20

9、21/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,24,血浆碳水化合物,种类 葡萄糖 70 105 mg % 其它单糖 果糖 半乳糖 甘露糖 多糖 量少 糖蛋白,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,25,血浆脂质,含量 5 mg / ml 主要形式 脂蛋白,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,26,血浆制品,常规血浆制品 新鲜冰冻血浆 (FFP) 冰冻血浆(FP) 冷沉淀,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,27,常规血浆输注适应症,获得性多凝血因子缺乏 先天性凝血因子缺乏？ 血浆置换 被动免疫治疗 注：1、血浆不是维持血液胶渗透压、扩充血容量的最佳途径 2、纠正低蛋白血症的首选

10、制剂是白蛋白,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,28,血浆不宜单纯用于扩充血容量,扩容效果不理想 血浆增量效力仅76% ，血液动力学改善效果 并不理想(Ahnefeld 1965) 具有输血相关风险 输血相关传染性风险：HCV,HBV,HIV 免疫抑制 输血相关急性肺损伤,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,29,临床常用的胶体溶液,羟乙基淀粉 白蛋白 明胶制剂 右旋糖酐,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,30,不同液体容量效力的比较,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,31,若干临床输血特例讨论,急性大量出血 择期手术 恶性肿瘤 播散性血管内凝血 .,20

11、21/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,32,大量失血的输血抢救（大量输血）,概念 24小时内输入血液全身血量 1 小时内输入血液1/2全身血量 适应症 大血管创伤性断裂 外科手术及手术意外 产科意外,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,33,大量失血的治疗的程序,首要目标：维持循环容量 第二目标：保持血氧携带能力 第三目标：恢复凝血和内环境稳定 美国麻醉学会（ASA）1997,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,34,大量输血,紧急大量输血的配血 5分钟？ 15分钟？ 3045分钟？ WHO临床用血：紧急情况下输注“O、Rh-” 临床输血规范： Rh（D）阴性和其他稀有血型患

12、者， 应采用自身输血、同型输血或配合型输血 UMSTC:5649例创伤,8%输RBC,其中11%(50例)未经交叉配型直接输入“O”型RBC(Hess JR et al,Transfusion,2006,46(5),2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,35,大 量 输 血,大量输血的血液选择 全血？ 组织间液缺失 柠檬酸中毒 大量、多人份异体血浆溶血可能、急性肺损伤 PT-GVHD 红细胞悬液 必要时输注血小板、FFP、冷沉淀,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,36,维持凝血所需的凝血因子水平,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,37,急性失血对血小板的影响（可耐受2

13、30%失血）,血小板计数 150 100 50,失血量/血容量50% 100 150 200 230%,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,38,各凝血因子可耐受的失血量,血小板 230% 血容量 纤维蛋白元 140% 凝血酶原 201% V 因子 229% VIII因子 236%,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,39,失血后容量替代治疗步骤,Target controlled replacement,Volume loss (%),Colloids + crystalloids,100,+ 红细胞,+新鲜冰冻血浆,+ 血小板,0,晶+胶,2021/3/26,血浆治疗若干问

14、题的探讨,40,血浆输注剂量,补充凝血因子1520ml/Kg.BW,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,41,冷沉淀输注,冷沉淀的定义 冷沉淀的组份及含量 冷沉淀输注适应症 冷沉淀输注剂量,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,42,冷沉淀的定义,把从400ml全血中获得的FFP置于04条件下融化，收集得到的冷不融部分称为冷沉淀。,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,43,冷沉淀主要组份及含量,因子VIII促凝活性(F VIII：C) 80IU 瑞斯托霉素因子(VWF)60IU 纤维蛋白原 (F1) 200300mg 纤维蛋白稳定因子 (FXIII)80IU 纤维结合蛋白

15、(Fn)60mg,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,44,冷沉淀输注的适应症,先天性凝血因子缺乏 甲型血友病 血管性假血友病(VW病) 获得性凝血因子缺乏 DIC 严重肝病 尿毒症 等.? 纤维结合蛋白水平降低 恶性肿瘤 重症感染DIC 严重创伤、烧伤 大手术 等,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,45,冷沉淀输注剂量,血友病及其它凝血因子缺乏患者 FVIII 20IU/Kg.BW（0.25袋/Kg.BW) 纤维蛋白原 4080mg/Kg.BW（0.20.4袋/Kg.BW) Fn水平低下患者 大剂量法：15mg/Kg . BW（0.25袋/Kg.BW) 维持法：6-7mg/

16、Kg . BW,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,46,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念 血浆生理概要及其临床治疗适应症 血浆置换疗法 被动免疫血浆治疗 血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,47,血浆置换术,适应症 自身免疫性疾病 (重症肌无力、肺肾综合征、SLE、 急进性肾炎等) 药物、毒物、毒素中毒 (洋地黄、有机磷等、内毒素) 急性肝、肾功能衰竭,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,48,血浆置换术,机理: 移除血浆中的致病因子 (抗体、毒素、滞留代谢产物等) 导入缺乏的血浆成分 凝血因子 体液免疫因子等,2021/3/2

17、6,血浆治疗若干问题的探讨,49,血浆置换术,方法： 人工单采术 机械单采术,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,50,血浆置换术,血浆置换量： 置换全身血浆清除率60% 置换全身血浆2倍清除率85% 全身血浆(ml)=体重(kg)70(1-Hct) 常规： 13L/次、间隔12日一次 35次为一疗程,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,51,血浆置换术,置换液： 新鲜冰冻血浆 晶体溶液 白蛋白溶液 血浆蛋白混合液,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,52,血浆置换术,不良反应及其对策： 柠檬酸盐反应 适当补充钙离子 凝血障碍FFP、凝血因子 病毒感染病毒灭活血浆 栓塞

18、脉管炎等严谨操作,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,53,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念 血浆生理概要及其临床治疗适应症 血浆置换疗法 被动免疫血浆治疗 血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,54,被动免疫血清（浆）治疗,1890年，德国病理学家Won Behring发现感染病菌的人恢复后血清中会产生一种抗菌成份，给病人注射恢复期病人的血清可以治疗同一种感染性疾病，由此开创了用“康复期血清（浆）”实施被动免疫治疗的先河。,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,55,被动免疫治疗,是指给机体输入含有特异性抗体的免疫 血清、血浆或免疫

19、球蛋白，使机体被动获得特异性免疫力，达到紧急预防或治疗某些感染性疾病的目的治疗方式,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,56,主动免疫与人工被动免疫,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,57,SARS康复期血浆治疗,姜素椿，传染病专家。 曾任中国人民解放军302医院传染科主任、副院长、专家组成员。在中枢神经系统、消化系统、呼吸系统及出血热等传染病的诊治方面具有很高的造诣及丰富的经验。 2003年，姜素椿在抢救一位SARS患者时不幸感染SARS，他在自己身上大胆试验，注射了SARS康复者的血清，使病情发生奇迹般的变化，再配合其他药物治疗后，仅23天就康复出院，开创了全国首例用血清

20、来治愈SARS的临床实验，为科学治疗SARS留下了宝贵的临床医学资料和经验。在抗击SARS斗争中，姜素椿被中国人民解放军四总部评为“全军非典型肺炎防治先进个人”，被中组部评为“全国防治非典工作优秀共产党员”,被中国科协授予“防治非典先进科技工作者”称号。 商务印书馆大家专栏,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,58,香港SARS康复期血浆治疗,曾在工作中感染“非典”并已痊愈的中大内科及药物治疗学系副教授郑彦铭，至今已捐出毫升血清救助患者。月初，郑彦铭在威尔斯医院工作时受到感染，他自愿成为中大血清治疗法的试验者。月底，郑彦铭康复出院后很快返回工作岗位，积极参与研究血清疗法。 新华网,20

21、21/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,59,香港中文大学SARS康复期血浆治疗,康复期血浆组 类固醇激素组 患者数 20 20 痊愈 20 17 死亡 0 3 死亡率 0% 15% 人民网 陈少波,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,60,康复期血浆治愈H5N1型禽流感一例,患者概况：男性，31岁，既往史无特殊；于2006年6月7日因高热4天（体温39.9），伴寒战，咳嗽，咳痰收治入院。胸部X线摄片示左肺下部有大片模糊影。经RT-PCR检测和气管抽吸物病毒分析确定为A型（H5N1）禽流感病毒。 入院第5天予奥司他韦150 mg bid治疗2天，患者右肺实变影增重而左肺仅有轻度好转。第

22、一次病毒定量测定为患者开始奥司他韦治疗后26小时，H5N1病毒呈高水平复制（1.31105拷贝/ml）状态，次日，在奥司他韦治疗中，病毒复制水平仍呈上升趋势（ 1.68105拷贝/ml）。 钟南山等N Engl J Med 2007, 357: 1450,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,61,康复期血浆治愈H5N1型禽流感一例,入院第八天行H5N1型禽流感康复期血浆治疗：捐献者为2006年2月罹患H5N1型禽流感经治疗后康复的患者。共捐献600 ml康复期血浆，血浆H5N1 病毒中和抗体滴度1:80。 600ml康复期血浆分3次输注，200mi/次；第一次输注与第二次输注间隔8hr

23、，第二次输注与第三次输注间隔24hr；第一次输入康复期血浆后8hr，患者的病毒复制水平从1.68105拷贝/ml降至1.42104拷贝/ml，第一次输注康复期血浆后32hr（距第二次输注24hr）、病毒检测阴性。患者最终得以康复。 H5N1 病毒中和抗体测定：输注康复期血浆前H5N1 病毒中和抗体阴性，输注血浆后抗体水平逐步增高，至第一次康复期血浆输注5天后，抗体滴度维持在1:401:80之间。 钟南山等N Engl J Med 2007, 357: 1450,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,62,康复期血浆治疗甲型H1N1流感的预期,甲型H1N1流感诊疗方案（2009年第三版）

24、2009.10.12颁布 对于重症和危重病例，也可以考虑使用甲型H1N1流感近期康复者恢复期血浆或疫苗接种者免疫血浆进行治疗。对发病1周内的重症和危重病例，在保证医疗安全的前提下，宜早期使用。 推荐用法：一般成人100-200ml，儿童50ml（或者根据血浆特异性抗体滴度调整用量），静脉输入。必要时可重复使用。使用过程中，注意过敏反应。,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,63,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念 血浆生理概要及其临床治疗适应症 血浆置换疗法 被动免疫血浆治疗 血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,64,近代输血医学的关注焦点

25、,不断提高输血的疗效 成分输血 科学合理用血 血液成分的体外诱导、修饰 不断降低输血风险 技术层面 发展经血传播病原体及免疫血液学检测技术 发展血液病原体灭活、白细胞滤除、-射线照射等血液处理技术 管理层面 实施无偿献血，根除利益驱动性供血 实施体系化质量管理，最大限度杜绝失误事件的发生,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,65,输血风险,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,66,输血相关病毒感染风险,病毒标记物检测技术的局限性 窗口期 WP 试剂敏感性 检测病毒种类的局限性 检测：HBV HCV HIV 未检测 ：HTLV CMV EBV B19 新病毒不断被发现 SARS?

26、 WNV,仅2003 年，美国CDC 报告WNV感染97862例,导致264人死亡;其中61例可能与输血有关, 21例被确认为输血感染，(其中6人死亡) 。,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,67,受 血 者 感 染 百 分 比 %,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,68,病毒性输血传染病发生机率,美国 HIV 1：676,000 HCV 1 : 103000 HTLV 1: 641,000 HBV 1: 63,000 输血相关病毒感染机率 1 : 34,000 (其中1/1000死亡) Schreiber,GB,et al, NEJM,334:1685,1998,2021

27、/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,69,美国生活风险(年死亡机率),主动生活风险 吸烟 1:200 驾驶汽车 1:10,000 摩托车比赛 1:50 赛马 1:740 怀孕 1:4,350,被动生活风险 交通意外 1:20,000 地震 1:588,000 流行感冒 1:5000 PTCA 1:200 术后感染 1:1,200 输血感染 1:34,000,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,70,输血传播病毒性疾病,全球目前受感染人数: 约 5.8 亿 HBV 3.71 亿1.2亿(32%) HCV 1.77 亿3800万(21%) HIV 3300 万100万(3%) 因不安全输血

28、引起: HBV 8001600 万 HCV 230470万 HIV 150300万,健康报2002.5.31 , CDC 2003 WHO / GDBS 1998-99 Safe blood starts with me WHO/BCT/01.03,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,71,Four Protecting Walls,donor criteria,testing,Inactivation removal,Modified from: N Dhingra, 17-18 June 2003,Rational Use,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,72,病毒性输

29、血风险的控制对策,现行对策： 推行无偿献血 严格筛查血液 提倡科学用血 消除残留风险的根本对策： 血液制品病毒灭活 开发血液代用品,血浆治疗若干问题的探讨,73,严格筛查血液-NAT 检测的优势,直接检测病毒的核酸 缩短病毒检测的“窗口期” 敏感性高,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,74,HIV markers during early infection,HIV RNA (plasma),HIV Antibody,11,HIV p24 Ag,16,22,5 Days 6 Days,Theoretical Infectivity Day 0HIV RNADay 11 HIV p24

30、 AgDay 16 HIV AntibodyDay 22,COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 2002,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,75,HBV markers during early infection,InfectionDay 0 HBV DNADay 32 HBsAgDay 59; disappears Day 120,HBV DNA (PCR),Anti-HBc,Infection,120,HBsAg,ALT,59,COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 2002,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,76,H

31、CV markers during early infection,HCV RNA,Anti-HCV,12,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,InfectionDay 0 HCV RNADay 12 HCV AntibodyDay 70,COURTESY: Dr. G Schreiber, ISBT 2002,血浆治疗若干问题的探讨,77,NAT 缩短病毒检测窗口期,HIV: 22 to 11 days HBV: 59 to 32 days HCV: 70 to 12 days,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,78,Residual risk, al

32、l donors (US),Dodd RY, Notari EP 4th, Stramer SL.Transfusion. 2002 Aug;42(8):975,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,79,如何杜绝已检测病毒的残留感染风险？ 如何杜绝CMV EBV B19 WNV等未检测病毒经 输血传播的风险？ 如何防范未知病毒经输血传播的风险？ 血液成分病毒灭活,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,80,病毒性输血风险的控制对策,现行对策： 推行无偿献血 严格筛选血液 提倡科学用血 消除残留风险的根本对策： 血液制品病毒灭活 开发血液代用品,2021/3/26,血浆治疗若干问题

33、的探讨,81,血液成分病毒灭活方法,血浆病毒灭活 湿热法（巴士德法） 有机溶剂/洗涤剂(Solvents/Detergents） 亚甲兰光化学法（MB-P） S-59光化学法 核黄素光化学法 红细胞病毒灭活 血卟啉、酞菁化合物、部化菁 酚噻嗪类化合物（MB、DMMB） + 可见光照射 FRALE S303+PH调节 PEN110 血小板病毒灭活 硫堇+可见光照射（Thionine-I） 8-甲氧补骨脂+UVA（8-MOP-UVA） S-59+UVA 核黄素,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,82,血液病毒灭活方法评价原则,能有效灭活病毒 指示病毒：HIV、DHBV、Sindbis、V

34、SV、脊髓灰质炎病毒 方法：细胞病变法、动物感染、PCR 对血液成分活性及功能无明显不良影响 血浆：凝血因子、血浆蛋白回收率、蛋白质免疫原性. 红细胞：溶血、K+逸出、ATP、2,3-DPG、形态积分、体内回收率 血小板：HSR、形态积分、聚集率、CCI. 对人体安全 急性毒性、慢性毒性、基因毒性 适用于单袋血液成分处理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,83,近年关注的血液病毒灭活方法,亚甲兰光化学法（MB-P） S-59光化学法 核黄素光化学法 FRALE S303+PH调节 PEN110,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,84,亚甲兰光化学病毒灭活,机理 破坏病毒核酸

35、 破坏病毒包膜,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,85,MB-P病毒灭活机理,LIGHT,MB,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,86,亚甲兰的安全性,亚甲兰是国家药典收录的静脉输注药物 1000ml血浆含380mg亚甲兰，仅是临床常用成人输注量的1/600 适应症 MB常用剂量 给药途径 高铁血红蛋白症 50250mg/50kg 静脉 甲状腺染色 50250mg/50kg 静脉 血浆病毒灭活 0.38mg/1000ml 静脉,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,87,MB-P血浆病毒灭活的效果,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,88,MB-P对HCV-R

36、NA NS-5的作用,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,89,标本病毒灭活前后血浆HCV-RNA浓度,病毒灭活动力学曲线,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,90,2.RNA病毒-HCV的FQ-PCR,PCR Amp/Cycle Chart,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,91,MB-P对DHBV-DNA病毒的灭活效果,方法: 受试样品接种雏鸭，观察感染情况 对照样品:含不同滴度DHBV的人血浆 实验样品:经亚甲蓝光化学处理的含不同滴度DHBV的人血浆 结果: 未经MB-P处理的含不同滴度DHBV的人血浆均感染雏鸭 经MB-P处理，可使血浆中DHBV的TcID50

37、下降106- 107.,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,92,MB-P对CMV的灭活效果,未灭活CMV感染人胚肺细胞 灭活CMV未感染人胚肺细胞,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,93,MB-P对血浆凝血因子的影响,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,94,MB-P处理对血浆蛋白免疫原性的影响,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,95,MB-P 血浆临床输注（1000,000单位）,无不良输注反应 治疗效果良好,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,96,MB-P血浆病毒灭活技术提要,亚甲蓝添加精度 10.1mol/L 光照剂量范围30,00038,

38、000lx MB滤除材料疏水性材质和碳纤维吸附材质（保证血浆有效成分回收率） MB滤除率 85% 灭菌方法 高压蒸汽灭菌（无毒） 病毒灭活有效性验证,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,97,DNA or RNAof pathogen,Amotosalen (S-59),Docking,Permanent Crosslinking,UVA Illumination,S-59光化学病原体灭活机理,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,98,S-59光化学病原体灭活技术,特点 适用于血小板和血浆病毒灭活、不适用于红细胞病毒灭活 尚能同时灭活多种细菌及T淋巴细胞,2021/3/26,血

39、浆治疗若干问题的探讨,99,S-59光化学病原体灭活技术的进展,建立了S-59+UVA血小板和血浆病毒灭活方法 实验室及动物模型验证了病毒灭活的有效性 证实对血小板和血浆的体外质量指标及动物体内回收率无明显不良影响 期临床试验结果表明经S-59光化学处理的血小板和血浆具有良好的疗效和安全性,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,100,核黄素光化学病毒灭活,机理 多环平面结构的芳香族化合物,易穿透细胞膜和病毒包膜，插入病毒的核酸 在接受了UVA或可见光提供的能量后,发生电子转移,使鸟嘌呤碱基氧化并形成共价加成化合物，阻止核酸的转录、复制 进一步的反应可使核酸骨架链断裂,使病毒、细菌、 T

40、淋巴细胞等病原体失活,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,101,核黄素光化学病毒灭活机理示意图,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,102,核黄素光化学病毒灭活,特点 能灭活脂质包膜病毒和非脂质包膜病毒及多种细菌 无残留生物毒性 期望适用于血小板、血浆及红细胞病毒灭活,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,103,核黄素光化学病毒灭活进展概要,实验提示该方法病毒灭活效果良好，对血小板和红细胞的功能、活力、形态及血浆有效组分无明显不良影响 能有效灭活T淋巴细胞，预期可用于预防PT-GVHDDVHD 核黄素光化学血浆及血小板病原体灭活已获准在欧洲使用 （2008、10 CE Mark ） 核黄素光化学红细胞原体灭活的研究尚处于实验室阶段,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,104,血液病原体灭活研究的发展取向,病毒灭活 病原体灭活 以病毒灭活为焦点、兼顾细菌、寄生虫、T细胞等病原体的 灭活 血液成分病原体灭活 全血病原体灭活 能有效灭活病原体；对红细胞、血小板、血浆均无 明显损伤 有望最终克服输血感染性疾病病,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,105,2021/3/26,血浆治疗若干问题的探讨,106,2021/3/26,血浆