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文档简介

1、实验十八 两种抗菌药物的体外联合药敏试验,兽医学院实验教学中心,兽医药理学实验,实验目的,联合应用抗菌药物,目的在于获得协同作用,提高疗效,减少用药剂量,减轻毒性反应,防止或延缓耐药菌株的产生。体外测定抗菌药物对细菌的联合抗菌作用,可为临床选用最有效的抗菌药物组合进行治疗提供实验依据,兽医药理学实验,病因不明又危及生命的严重感染; 单一抗菌药不能有效控制的混合感染及严重感染,如败血症、腹膜炎、创伤感染等; 较长期治疗、细菌易产生耐药性的慢性感染;一般抗菌药不易透入病灶的感染,如细菌性脑炎; 毒性较大,联合用药减少剂量后可降低毒副反应的抗菌药,联合用药的指征,抗菌药物联用,常用的测试法有棋盘法及

2、杀菌曲线法,兽医药理学实验,抗菌药物分类,药物联用时,必须根据抗菌药的作用特性和机理进行选择,避免盲目组合,兽医药理学实验,药效学相互作用,类与 类合用可能呈现协同作用。如青霉素和链霉素合用,前者破坏细菌细胞壁的完整性,有利于后者进入菌体内发挥作用。 类与 类合用可能呈现拮抗作用。如青霉素和氯霉素或四环素类合用出现拮抗,在四环素的作用下细菌蛋白合成迅速抑制,细菌停止生长繁殖,使青霉素的作用减弱。 类与 类可能有累加作用。 类与 类可能有累加或协同作用,兽医药理学实验,实验材料,菌种】 大肠杆菌ATCC25922,由中国兽医药品监察所提供。 【药品】 氨苄西林、阿米卡星 【培养基】 MH肉汤培养

3、基 【器材】 96孔板,移液枪(200l、1ml及对应枪头),37恒温培养箱,超净工作台,兽医药理学实验,方法步骤,兽医药理学实验,16倍MIC 8倍 4倍 2倍 MIC 倍 倍,1 2 3 4 5 6 7,7个管加入2mL菌液,第1管加入2mL 32倍MIC值浓度的氨苄西林或阿米卡星,弃去,兽医药理学实验,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10,B药加入排,P1管至A排的18孔,2管至B排1-8孔以此类推,A药P1管,药加入列, 管入 列, 管至 列,以此类推,A,P1,P1,2,2,A药P2管,H G F E D C B A,A药P7管,B药P1管100l,B药P7管,A药8倍MIC浓度

4、 B药8倍MIC浓度,H排1-7孔分别加菌液100L,第八列A-G孔分别加菌液100L,P9列阴性对照,空白肉汤200l P10列阳性对照,菌液200 l,A药:阿米卡星 B药:氨苄西林,兽医药理学实验,联合药敏试验的结果判断,协同作用:两种抗菌药物合用时所得效果比两药作用相加的好; 累加作用:总的作用相当于两药作用相加的总和; 无关作用:总的作用不超过联合中作用较强者; 拮抗作用:两药合用时其作用相互抵消,兽医药理学实验,在实验室中以部分抑菌浓度(Fractional inhibitory concentration index 简称FIC指数)的计算作为联合药敏试验的判断依据,兽医药理学实验,结果判定,FIC指数=1/4+4/16=0.5(协同,兽医药理学实验,注意事项,建立无菌观念,

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