(最新整理)生物反应工程计算题解析

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2、0世纪40年代抗菌素工业诞生，对无菌操作、通风溶氧技术十分拍切,吸引了大量化学工程人员参与技术攻关，于是有微生物学、生物化学、化学工程形成了一门交叉学科生物化学工程（生化工程），当初的生化工程研究的核心，通风搅拌无菌操作。1942年monod研究连续发酵，研究的目的就是提高发酵速率，6070年代，单细胞蛋白生产，污水处理的重视,对菌体生长速率、底物的反应速率等的研究越来越重视，于是人们就把微生物反应动力学的研究与生物反应器结合起来形成了生化工程的一个重要分支-生物反应工程. 这门课（生物反应工程)是一门以生物反应动力学为基础，研究生物反应器的设计、放大和生物反应过程的优化操作和控制的学科。生物

3、反应工程课程有好多名称，在上世纪80年代初，江南大学（原无锡轻工业学院)王鸿祺教授给研究生开设了生化反应动力学与生化反应器，天津科技大学贾士儒教授给研究生开设了生物反应工程与生物反应器，后来改为生物反应工程原理.90年代上海出版了高校教材生物化工原理，北京化工大学戚以政、王叔雄编著了生化反应动力学与反应器（1995年第二版），以后有编写了生物反应工程。本学学院最早给研究生开这门课名称是生物反应工程与生物反应器,2010年改为生物反应工程。1。2生物反应工程的主要内容 1）生物反应动力学 研究生物反应过程速率及其影响因素,是理论基础。微观动力学（本征动力学,是研究分应的固有速率，与温度、浓度、p

4、h、催化剂等有关,与传递无关.另一种反应是宏观动力学，也称反应器动力学.与反应器的传质、传热及物料流动类型有关。实验室研究可以看作微观动力学，从工程角度要研究的是宏观动力学。 2）生物反应器设计、优化与放大（设计包括结构型式、操作方式及尺寸的确定)，实际生物反应器设计是将生化反应动力学特征和生化反应器特征结合的设计。 生物反应器的优化分优化设计、优化操作。第二章均相酶反应动力学内容要点:了解酶反应特点,掌握m-m方程和各种抑制动力学特征及其应用。均相酶反应，系指酶与反应物处于同一相（液相）的美催化反应。在生产中均相酶反映较多。如淀粉的液化和糖化。2.1酶反应的基本特征2。1。1共性2。1。2特

5、性2.2单底物酶反应动力2.2。1mm方程建立酶反应机理：底物s与酶e结合形成中间复合物es，然后复合物分解成产物，并释放出e.反应式：e游离酶；s底物;es-酶底物结合的中间复合物;p产物；反应速率方程：rs底物消耗速率，mol/lsrp产物生成速率,mol/lsv反应体系体积，l；ns-底物物质量，mol；np-产物物质量,mol；t-时间，s；根据反应定律：对反应机理有四点假设：（1)反应过程酶浓度恒定，即（2）与底物浓度cs相比,酶浓度很小，可忽略生产中间复合物所消耗的底物。（3）产物浓度很低，产物抑制作用忽略不计，也不需考虑p+ees的可逆反应。（4）生产产物的速率低于酶与底物的结合

6、速率，生成产物的速率决定整个反应速率,而生成复合物的可逆反应达到平衡状态。根据假设: 因 （rs，max=k+1ceo）当中间复合物生产速率与其分解成酶和产物的速率相差不大时，以上公式不适用，michaelismenten的平衡假设不成立。1925年，briggs和haldane提出了“拟稳态假设”，认为反应体系底物与酶浓度相比浓度高的多，中间复合物分解成产物和游离酶后，酶立即与底物结合，从而使反应体系中复合物浓度维持不变，即中间复合物不再随时间变化。 根据反应机理和以上假设： 又因: 因底物浓度比酶浓度高的多，产物的反应速率就等于底物的反应速率.推出底物浓度与底物反应速率的关系式即米式方程：

7、式中:km米氏常数，mol/l;-底物农度，mol/l；km与ks的关系：从上式看出，酶与底物结合成中间复合物这步反应速度很快，而复合物分解成产物这步反应很慢，米氏常数就等于解离常数（km=ks）。显然用“拟稳态平衡假设推导出米氏常数更为科学，使米氏方程机理的推导更完美。最大反应反应速率 rs，max和米氏常数km是米氏方程的重要参数.rs，max大小与酶总量有关，与酶和底物反应特性有关;km大小主要决定底物与酶的结合程度有关。结合力越大，km越小，反之越大。米氏方程的意义，在于掌握反应速率与底物的关系。2。2。2米氏方程动力学特征当cskm时,此反应与底物浓度无关，属0级反应。积分得：该式表

8、明，反应时间长短取决于底物的初始浓度和终了浓度以及最大反应速率，对大反应速率又取决酶的总浓度。当cskm时,反应速率与底物浓度成正比关系，属一级反应。积分得：当底物浓度即不也不米氏常数时，就符合米氏方程，当km=cs时,，此时，ces=ce。对米氏方程积分得出积分式：以上三个积分式,cso为反应前的底物初始浓度，cs是反应t时间后的终了浓度.利用积分式求反应时间，并知道哪些因素影响了反应时间。用xs表示底物转化率：以上三个积分式可写成与转化率有关的积分表达式：即：2。2。3米氏方程参数的求取有四种方法求取.（1） lineweaver-burk（简称l-b法） 将米氏方程两边取倒数：以为纵坐标

9、，以为横坐标作图，直线斜率为，截距为。（2） haneswoolf法简称（h-w法) 将米氏方程取倒数，然后两边乘cs,得下式：以为纵坐标，以为横坐标作图,直线斜率为,截距为。（3） eadiehofstee法（简称eh法）将m-m方程重排：以上三种方法，反应速率都要通过浓度和反应时间求出，实质是利用微分法求出来的，故称微分法。微分法反应速率不是直接求出的，当地物浓度很低反应速率很慢时,误差较大.（4） 积分法将mm方程的积分式,经整理得到：以为纵坐标，以为横坐标作图，斜率为，截距为。积分法特点，通过反应时间和底物浓度可直接求出动力学参数，产物的增加对反应速率没有影响，否则不符合米氏方程条件。

10、2。3 底物抑制动力学 有的反应，底物浓度增加反应速率反而下降，这种由于底物浓度增大引起反应速率下降的作用称为底物抑制作用，反应机理如下: 根据稳态法，推导出的动力学方程：ksi-底物印制的解离常数，mol/l;2.4有抑制的酶反应动力学某种物质存在而使酶反应速率减慢，这种物质呈抑制剂。根据抑制机理可分为竞争性抑制，非竞争性抑制，反竞争性抑制。竞争性抑制动力学，抑制剂与酶活性中心结合，影响了酶与底物的结合，从而影响了酶反应。抑制机理表达式:底物反应速率:根据稳态假设： （ ） 竞争性抑制动力学,其抑制剂影响了米氏常数，影响大小决定于抑制剂浓度ci和解离常数。竞争性抑制动力学参数的求取：和m-m

11、方程动力参数求取相同，两边取倒数，得到如下方程：第三章微生物细胞反应动力学第一节微生物细胞反应基本概念第二节微生物细胞反应计量学微生物细胞反应衡算目的： 是对反应物转化成细胞或产物进行转化程度的数量化研究，是为了更好的控制反应.微生物细胞反应元素衡算方程（1）无产物的反应式：第三节微生物生长动力学一、 细胞生长动力学方程分批培养：（！)细胞生长速率： （2）比速率： 是以单位质量细胞为基准表示各组分的变化速率。 细胞生长比速率 ：假定是常数,积分得：二、 monod方程 （g/l。h)细胞生长比速率(h-1)c s 限制性底物质量浓度，（g/l）。ks饱和常数，（g/l）.max-最大生长比速

12、率monod方程式是monod在1943年通过大量实验做出的经验方程，cs是限制性底物浓度,ks是饱和常数,即得出，生长比速率与限制性底物浓度的关系。三、 微生物细胞间歇培养将方程以为纵坐标，以时间t为横坐标,作的曲线图如下：减速期t细胞生长曲线减速期减速期对数期加速期延滞期通过曲线进一步理解monod方程及生长比速率的涵义.实际就是曲线上的斜率。1）延滞期= 02）加速期0max3)对数期= max，营养底物充足，对生长不受限制.在对数生长期间，是恒值是一个常数。4)减速期在减速期，随着时间延长，营养底物越来越匮乏，生长比速越来越小（曲线上斜率越小）。正符合monod方程：四、 连续培养（单

13、级）操作连续稳定时，细胞生长量=排出量令： d-稀释率，（h-1).稀释率是人为控制的，因此在连续发酵过程生长比速率可以人为控制。连续发酵的必要条件 dmax当dmax，发酵就发生“冲出”现象。 * * 连续发酵,在dmax的前提下，随着d的变化而变化，当d增大时，意味着进料速度增大,反应器内底物浓度增高，所以值随之增大；当d降低时，意味着进料速度减小，反应器内底物浓度随之降低，有许许多多的实验得出了monod方程，即限制性底物浓度c s与生长比速率的关系，因此连续发酵会自动趋向稳态，即=d，讨论：（1）底物浓度(cs）与稀释率的关系:（2）菌体相对基质得率系数yx/s（3）菌体浓度与稀释率的

14、关系（4）微生物细胞生产强度(px）与稀释率的关系菌体浓度（cx）、底物浓度（cs）、生产强度（px）与稀释率(d）的关系作图如下： 从上图看出：1）在一定的稀释率下，微生物细胞生产强度（生长速率）（dcx）,随着稀释率（d)增大而增大，当达到一定的稀释率后,其细胞生产强度随着稀释率增大而降低.2）稀释率在一定范围内变化,细胞浓度（cx）和底物浓度（cs）变化很小。当增大到一定程度，其变化迅速增加。3）稀释率增大到一定程度时，微生物细胞冲出，罐内菌体浓度为零，底物浓度等于初始浓度，此时的稀释率称临界稀释率（dc）.4）对细胞生产强度而言，有一个最佳稀释率（d0pt），即细胞生产强度最高。5）稀

15、释率越小,底物浓度越低，细胞产率越高(转化率高）。 单罐连续发酵(培养)，当转化率要求不高时，可以使用.如果既要转化率高，又要细胞生产强度高,单罐连续发酵就满足不了这个条件. 如何设计才能使转化率和生产强度都高，用多级串联连续就能解决这个问题，一般用两个罐就可满足生产要求,第一个罐用作提高生产强度(控制最佳稀释率），第二个罐用作提高转化率。四、最佳稀率（dopt）最佳稀释率是细胞生产强度 （生长速率）最大时的稀释率。生产强度对d求导,等于零，即求得稀释率最大值dopt最佳稀释率对应的最佳细胞浓度（cxopt）及最大生产强度（px）opt五、 两级串联连续培养连续稳定时，cx0=0对第一个罐细胞

16、平衡：对第二个罐细胞平衡:两罐串联与单罐连续发酵时间的对比 假定用两个罐(等体积）串联连续发酵，第一个罐的菌体浓度为第二个罐的0。85倍。即：cx1=0.85cx2 两罐与单罐排出的底物浓度相等，即: cs2=cs单罐发酵时间用表示:两罐发酵时间用m表示： 六、 带细胞循环的单级培养 带细胞循环的单级培养是在单级连续培养的基础上进行的,将流出反应器的物料进行细胞浓缩，将浓缩液循环。通过浓缩液循环,提高反应器内细胞浓度,从而提高反应速率。以下是带细胞循环的单级细胞培养流程：图中，rf为循环液量，r为循环比。cx2cxcx1对发酵罐培养系统菌体平衡:细胞浓缩分离系统菌体平衡:由以上两平衡式得出：、

17、带细胞循环连续发酵讨论:循环与不循环相比：（1)在转化率和发酵罐体积不变时,可提高生产能力.(2）在生产能力和发酵罐体积不变时，可提高转化率（cs降低）(3）在生产能力和转化率一定时，可减小设备体积.（4)如果细胞不浓缩， d =,对cstr无意义。（5)生产能力的提高在于提高了发酵罐中的细胞浓度。七、带循环的cpfr带循环的cpfr(带循环平推流式反应器），对酶反应因循环物料使得进入反应器的底物浓度降低,因此可以解决因底物浓度抑制的反应而提高反应速率；对微生物细胞反应则提供了连续接种的作用. 回流比 物料衡算：进口物料 进口浓度:第四节底物消耗与产物生成动力学一、 底物消耗动力学1、 底物只

18、形成细胞的消耗动力学底物消耗速率通过细胞得率系数与细胞生长的关系： 底物消耗比速率：qs，max 最大消耗比速率，(h-1）。2、 包括维持细胞生命的底物消耗动力学底物消耗速率： 底物消耗比速率：总得率与理论得率关系式可写成：斜率m3、 包括产物生成的底物消耗动力学 底物消耗速率： 底物消耗比速率：二、 产物生成动力学根据产物生成速率与细胞生成速率的相关性分为三类：1、 相关模型 指产物生成与细胞生长相关的.产物生成速率可写成：产物生成比速率:2、 部分相关模型指产物生成与细胞生长部分相关。产物生成速率：产物生成比速率:3、 非相关模型指产物生成与生长无关。其特点，细胞生长时无产物生产,当细胞停止生长后才生成产物.产物速率表达式： 第五节 动力学参数求取monod方程两个重要参数max和ks的求取：将方程写成：利用微分法求取:第六节灭菌动力学第四章反应器设计与分析第一节生物反应器类型 生物反应器是指利用生物催化剂进行生物反应的设备，1、 按催化剂不同分：细胞生物反应器;酶反应器；2、 按物料进出不同分：间歇操作反应器；连续操作反应器；半连续操作反应器；3、 根据催化剂分布分:块状反应器；膜反应器。4、 连续操作反应器根据流动模型分：全混流式