乳酸菌的筛选及应用课堂

1、乳酸菌的分离筛选,窦平,2012,年,4,月,16,日,Page,2,乳酸菌的分类,乳酸菌的筛选,乳酸菌的应用,Page,3,第一部分、乳酸菌的分类,运动性,通常不运动，有的能,够运动,具有周生鞭毛,营养类型,化能异氧型,需氧情况,微好氧性,1,乳杆菌属,Lactobacillus,形态,细胞呈长或细长杆状、弯曲形短杆状,一,般成链状排列,Page,4,形态,细胞呈球形或卵圆形，成对或成链排列,运动性,一般不远动,营养类型,化能异养型,需氧情况,兼性厌氧型,2,链球菌属,Streptococcus,Page,5,形态,细胞球形或豆状，成,对或成链排列,运行性,不运动,营养类型,化能异养型,需氧

2、情况,兼性厌氧型,3,明串珠菌属,Leuconostoc,Page,6,形态,细胞呈多样形态,Y,字形,V,字形、弯曲状、勺形，典,形形态为分叉杆菌,运行性,不运动,营养类型,化能异养型,需氧情况,专性厌氧,4,双歧杆菌属,Bifidobacterium,Page,7,形态,细胞球形，成对或四联状,排列,运行性,不运动,营养类型,化能异养型,需氧情况,兼性厌氧,5,片球菌属,Pediococcus,Page,8,第二部分、乳酸菌的筛选,乳酸菌绝大多数都是厌氧菌或兼性厌氧的化能营养菌,生长繁殖于厌氧或微好氧、矿物质和有机营养物丰富的,环境中。具体如下,1,与动物相关分布：乳汁、消化道、粪便等,2

3、,与植物相关分布：花蜜、树液、植物残骸、果实,损伤部位等,3,发酵食品：泡菜、酱油、发酵肉制品等,4,乳酸饮料：酸奶等,一、乳酸菌的分布,Page,9,一）溶钙圈法,利用一些产酸类细菌在含,CaCO,3,的培养基上产生,CaCO,3,溶解圈，从而筛选出这些产酸类细菌，可用,于乳酸菌的筛选,其中培养基中加入,CaCO,3,的作用是,鉴别能产生酸的细菌,中和产生的酸，以维持培养基的,PH,二、筛选方法,Page,10,1,乳酸菌筛选培养基,MRS,培养基,配方,1L,蛋白胨,10.0g,牛肉膏,10.0g,酵母提取物,5.0g,K,2,HPO,4,2.0g,柠檬酸三铵,2.0g,乙酸钠,5.0g,

4、葡萄糖,20.0g,吐温,80 1.0mL,MgSO,4,7H,2,O 0.5g,MnSO,4,4H,2,O,0.25g,配制,1,调,PH,至,6.2,6.4,2,称取,20g CaCO,3,加入到,100mL,蒸馏水中，制成,CaCO,3,乳浊液,3,将,MRS,培养基和,CaCO,3,乳浊液分开灭菌,4,倒平板前，待培养基融化冷却后，平板上加入一定量,的,CaCO,3,乳浊液，晾干了以后再接种,Page,11,样品预处理,梯度稀释至,10,6,选择合适,的稀释度涂布,37,培养,48h,挑选产生溶,钙圈的菌落反复在,MRS,培养基上划线,挑起,单菌落染色，经镜检确认为纯种,挑选革兰,氏阳

5、性单菌落,试管穿刺,4,冰箱保存,2,筛选过程,Page,12,二）溴甲酚绿指示剂法,1,培养基,MRS,培养基（含溴甲酚绿酒精溶液,2,筛选过程,同上，不同之处是稀释涂布后长出菌,落，挑取使溴甲酚绿变色的菌落,Page,13,三）几种乳酸菌筛选举例,样品来源：市售酸奶,培养基,M17,改良培养基,培养温度,42,需氧情况,兼性厌氧,筛选方法,常规的稀释涂布,和划线分离,1,嗜热链球菌,Page,14,2,保加利亚乳杆菌,样品来源：市售酸奶,培养基：牛肉浸膏,1.5,酵母浸膏,0.5,葡萄糖,3.0,柠檬酸三铵,0.2,七水硫酸镁,0.02,琼,脂,1.5,pH 5.1,培养温度,42,需氧情

6、况：兼性厌氧,筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离法,Page,15,样品来源：婴儿新鲜粪便,培养基,MRS,培养基,NPNL,培养基,TYP,培养基,PTYG,培养基,培养温度,37,需氧情况,严格厌氧,筛选方法,常规的稀释涂布和划线分离法,3,双歧杆菌,Page,16,第三部分、乳酸菌的应用,1,乳酸菌在食品、饮料中的应用,1,酸奶；,2,乳酸饮料；,3,酿造调味品中,的应用；,4,功能性食品的开发；,5,防腐、保,鲜；,6,肉制品加工；,7,腌渍物等,Page,17,2,乳酸菌在医药中的应用,1,乳酸菌素；,2,氨基丁酸,GABA,Page,18,3,开发可降解的聚乳酸塑料,Page,19

7、,1,聚乳酸,PLA,简介,聚乳酸是以微生物发酵产物乳酸为单体用化学合,成方法聚合而成的一种高分子材料，它无毒、无刺,激性,聚乳酸制品废弃后在土壤或水中,30,天内会在微,生物、水、酸和碱的作用下彻底分解成,CO,2,和,H,2,O,不会对环境产生污染，因而是一种完全可生物降解,的材料,Page,20,目前聚乳酸的生产和制备主要有,2,聚乳酸的生产过程,直接聚合法,间接法,聚合法,Page,21,3,聚乳酸的应用,医用领域：如生产一次性输液用具、免拆型手术缝,合线、骨科用固定件及手术器件、医用支架、生物,导管等,包装材料：目前，各种包装材料是聚乳酸最大、最,有潜力的应用市场。适合于加工一次性饭盒以及其,他食品、饮料等外包装材料等,纤维：聚乳酸纤维是由聚乳酸经常规纺丝工艺制得,的生物合成纤维，可制成复丝、单丝、短纤维、针,织物、非织造布等，还可用作建筑材料、农业用材,等,Page,22,PLA,作为一个新型的医用、生物可降解塑料在,我国有广阔的市场发展前景。生物降解塑料大多数,是天然高分子与常用塑料复合体系，或基于天然高,分子,主要是淀粉、纤维素,的改