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文档简介
1、1.生物产品的分离包括 不溶物的去除,产物分离,纯化和精制。 2.发酵液常用的固液分离方法有 离心 和 过滤 等。3.离心设备从形式上可分为 管式,套筒式,碟片式 等型式。4.膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为 微滤膜,超滤膜,纳滤膜 和 反渗透膜;5.多糖基离子交换剂包括 葡聚糖离子交换剂 和 离子交换纤维素 两大类。6.工业上常用的超滤装置有 板式,管式,螺旋卷式 和 中空纤维式7.影响吸附的主要因素有 吸附剂的性质,吸附质的性质,温度,溶液pH值,盐浓度 ,吸附物浓度 和 吸附剂用量8.离子交换树脂由 载体,活性基团 和 可交换离子 组成。9.电泳用凝胶制备时,过硫酸
2、铵的作用是 引发剂;甲叉双丙烯酰胺的作用是 交联剂;TEMED的作用是 增速剂;10.影响盐析的因素有 溶质种类,溶质浓度,pH值 和 温度;11.在结晶操作中,工业上常用的起晶方法有 自然起晶法,刺激起晶法 和 晶种起晶法;12.简单地说,离子交换过程实际上只有 外部扩散,内部扩散 和 化学交换反应 三个步骤;13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时,通常遵循Langmuir吸附方程,其形式为Qq0C/(k+C)14.反相高效液相色谱的固定相是 非极性 的,而流动相是 极性 的;常用的固定相有 C18 和 C8;常用的流动相有 甲醇 和 乙睛;15.超临界流体的特点是与气体有相似的 粘度(扩
3、散系数) ,与液体有相似的 密度; 16.离子交换树脂的合成方法有 共聚(加聚) 和 均聚(缩聚)两大类; 17.常用的化学细胞破碎方法有 渗透压冲击,增溶法,脂溶法,酶消化法 和 碱处理法;18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其等 电点(pI)的不同;19.离子交换分离操作中,常用的洗脱方法有 pH梯度 和 离子强度(盐)梯度;20.晶体质量主要指 晶体大小,晶体性状 和 晶体纯度 三个方面;4. 亲和吸附原理包括 吸附介质的制备,吸附 和 洗脱 三步。11.根据分离机理的不同,色谱法可分为 吸附色谱,分配色谱,离子交换色谱 和 凝胶色谱。12.盐析实验中用于关联溶质溶解度与盐浓度
4、的Cohn方程为 lgSKsI;当 保持体系温度、pH值不变,仅改变溶液离子强度进行的盐析操作 称为Ks盐析法;当 保持离子强度不变,改变温度、pH值进行的盐析操作 称为盐析法。13.过饱和溶液的形成方式有:热饱和溶液冷却,蒸发溶剂,真空蒸发冷却,化学反应结晶 和 盐析。14. 蛋白质分离常用的色谱法有 金属螯合色谱 ,共价色谱 , 离子交换色谱 和 疏水作用色谱。17. SDS PAGE电泳制胶时,加入十二烷基磺酸钠(SDS)的目的是消除各种待分离蛋白的 电荷 和 分子形状 差异,而将 分子量 作为分离的依据。19.高效液相色谱分离方法中,液-液色谱是以 液体 作为流动相;以 固定在固相载体
5、表面的液体 作为固定相。20. 常用的蛋白质沉析方法有 盐析,等电点沉析 和 有机溶剂沉析。1.在细胞分离中,细胞的密度S越大,细胞培养液的密度L越小,则细胞沉降速率越大。2.表示离心机分离能力大小的重要指标是C。A.离心沉降速度B.转数C.分离因数D.离心力3.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力,其中滤饼占主导作用。4.简答:对微生物悬浮液的分离(过滤分离),为什么要缓慢增加操作压力?5.判断并改错:在恒压过滤中,过滤速率会保持恒定。()改:不断下降。6.简答:提高过滤效率的手段有哪些?7.判断并改错:生长速率高的细胞比生长速率低的细胞更难破碎。()改:更易破碎。8.简答:采用哪种
6、方法破碎酵母能达到较高的破碎率?9.简答:蛋白质复性收率低的主要原因是什么?10.简答:常用的包含体分离和蛋白质复性的工艺路线之一。11.B可以提高总回收率。A.增加操作步骤B.减少操作步骤C.缩短操作时间D.降低每一步的收率12.重力沉降过程中,固体颗粒不受C的作用。A.重力B.摩擦力C.静电力D.浮力13.过滤的透过推动力是D。A.渗透压B.电位差C.自由扩散D.压力差14.在错流过滤中,流动的剪切作用可以B。A.减轻浓度极化,但增加凝胶层的厚度B.减轻浓度极化,但降低凝胶层的厚度C.加重浓度极化,但增加凝胶层的厚度D.加重浓度极化,但降低凝胶层的厚度15.目前认为包含体的形成是部分折叠的
7、中间态之间A相互作用的结果。A.疏水性B.亲水性C.氢键D.静电16.判断并改错:原料目标产物的浓度越高,所需的能耗越高,回收成本越大。()改:原料目标产物的浓度越低。17.菌体和动植物细胞的重力沉降操作,采用D手段,可以提高沉降速度。A.调整pHB.加热C.降温D.加盐或絮状剂18.撞击破碎适用于D的回收。A.蛋白质B.核酸C.细胞壁D.细胞器19.重力沉降过程中,固体颗粒受到重力,浮力,摩擦阻力的作用,当固体匀速下降时,三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。20.为了提高最终产品的回收率:一是提高每一级的回收率,二是减少操作步骤。21.评价一个分离过程效率的三个主要标准是:浓缩程度分离纯化程度
8、回收率。22.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。23.差速区带离心的密度梯度中最大密度B待分离的目标产物的密度。A.大于B.小于C.等于D.大于或等于24.简答:管式和碟片式离心机各自的优缺点。25.单从细胞直径的角度,细胞越小,所需的压力或剪切力越大,细胞越难破碎。 1.防止蛋白质沉淀的屏障有 蛋白质周围的水化层 和 双电层 。 2.判断:当蛋白质周围双电层的点位足够大时,静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力,使蛋白质溶液处于稳定状态而难以沉淀。() 3.降低蛋白质周围的 水化层 和 双电层 厚度,可以破坏蛋白质溶液的稳定性,实现蛋白质沉淀。 3 4.常用的蛋白质沉淀方法有: 盐析
9、 沉淀, 等电点 沉淀, 有机溶剂 沉淀。 5.判断并改错:蛋白质水溶液中离子强度在生理离子强度(0.150.2molkg-1)之外,蛋白质的溶解度降低而发生沉淀的现象称为盐析。()改:离子强度处于高离子强度时。 6.在Cohn方程中,logS=-KsI中,盐析常数Ks反映 C 对蛋白质溶解度的影响。 A.操作温度 B.pH值 C.盐的种类 D.离子强度 7.在Cohn方程中,logS=-KsI中,常数反映 B 对蛋白质溶解度的影响。 A.无机盐的种类 B.pH值和温度 C.pH值和盐的种类 D.温度和离子强度 8.Cohn方程中,Ks越 大 ,值越 小 ,盐析效果越好。 9.蛋白质溶液的pH
10、接近其等电点时,蛋白质的溶解度 B 。 A.最大 B.最小 C.恒定 D.零 10.蛋白质溶液的pH在其等电点时,蛋白质的静电荷数 为0 。 11.判断并改错: 在高离子强度时,升温会使蛋白质的溶解度下降,有利于盐析沉淀,因此常采用较高的操作温度。()改:只在离子强度较高时才出现。 12.判断并改错: 利用在其等电点的溶液中蛋白质的溶解度最低的原理进行分离,称为等电点沉淀,而不必考虑溶液的离子浓度的大小。()改:在低离子强度条件下。 13.等电点沉淀的操作条件是 低离子强度 和 pH=pI 。 14.判断并改错: 无论是亲水性强,还是疏水性强的蛋白质均可采用等电点沉淀。()改:适用于疏水性强的蛋白质(酪蛋白)。 15.有机溶剂沉淀时,蛋白质的相对分子质量越 大 ,则有机溶剂用量越 少 ;在溶液等电点附近,则溶剂用量越 少 。 16.变性活化能 A 的蛋白质可利用热沉淀法分离。 A.相差较大 B.相差较小 C.相同 D.相反 17.在相同的离子强度下,不同种类的盐对蛋白质盐析的效果不同,一般离子半径 A 效果好。 4 A.小且带电荷较
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