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文档简介

1、实验八 肠道杆菌,实验目的： 观察大肠杆菌，伤寒杆菌在SS琼脂平板和在EMB琼脂平板生长状态。 观察大肠杆菌，伤寒杆菌在双糖含铁斜面的菌落特点。 五糖发酵试验。 吲哚试验,一、肠道鉴别培养基 1、SS琼脂培养基： 这种培养基除含有基本的营养物质外， 还含有乳糖和中性红指示剂(遇酸变红，遇碱变黄)。 是否能够分解乳糖是鉴别肠道致病菌和非致病菌的重要依据之一。通常非致病菌能分解乳糖产酸产气，而致病菌则不能分解乳糖,观察大肠杆菌和伤寒杆菌在SS琼脂培养基上的生长现象： 大肠杆菌分解乳糖产酸产气，使指示剂变红，故菌落为粉红色。 伤寒杆菌不分解乳糖，则不变色，为橙黄色菌落,2、EMB(伊红-美蓝)琼脂平

2、板培养基： 在无糖琼脂内加入乳糖，加热溶化，冷至50。加入经高压灭菌的伊红及美蓝溶液，摇匀后倾注平板。 现象：因大肠杆菌能分解乳糖，使指示剂变色，呈现紫黑色有金属光泽的菌落。而伤寒杆菌则不变色,3、双糖含铁培养基： 分上、下两层： 上层为固体斜面培养基：除基本成分外，另加有乳糖、酚红指示剂(遇碱变红，遇酸变黄)和硫酸亚铁。(PH值7.6) 下层为半固体培养基，含葡萄糖和酚红指示剂,分别接种大肠和伤寒杆菌在双糖含铁培养基上，观察现象： 大肠杆菌：试管由红变黄，有气泡，有动力。 伤寒杆菌：上层仍为红色，下层由红变黄，有黑色沉淀，有动力,硫化氢试验： 有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸等)，产生硫化氢气体，可与培养基中的硫酸亚铁生成黑色沉淀，为硫化氢试验阳性,二、吲哚试验(靛基质试验) 原理：有些细菌能分解培养基中的色氨酸生成吲哚(无色)，向其中加入吲哚指示剂(对二甲基氨基苯甲醛)，可与吲哚结合生成玫瑰吲哚而呈红色，为吲哚试验阳性。 蛋白胨水培养基：蛋白胨、蒸馏水、氯化钠，调PH值7.2即可。 大肠杆菌的吲哚试验阳性,三、五糖发酵管试验 成分：蛋白胨、水、氯化钠、酚红指示剂和各种糖类 五糖：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖 现

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