证券投资者信心调查专报(2009年第12期)

1、第2节基因诊断与基因治疗课程目标导航1.说出基因诊断的基本含义和基本原理。2.描述基因诊断在恶性肿瘤早期诊断中的突出作用。3.简述基因芯片的基本含义及在生物医学方面的应用。4.说出基因治疗的基本含义、基本步骤、优点及其前景。知识点1基因诊断知识梳理1.基因诊断技术的原理指用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测样本上的遗传信息，从而达到检测疾病的目的。2.基因诊断的过程构建基因探针获得待测组织单链DNA对待测单链DNA分子进行PCR技术扩增，将扩增获得的DNA热处理得到大量的DNA单链将DNA转移到一种特制的尼龙膜上将探针与尼龙膜上的DN

2、A分子进行杂交，如果尼龙膜上含有突变基因，就会形成特定颜色的杂交斑。3.基因诊断的特点既客观又灵敏。思考：用基因诊断技术可检测哪些疾病？提示：通过直接探查基因进行诊断，不受细胞类型和发病年龄的限制，可用于部分遗传病的诊断。例如，癌细胞的病变过程，主要是由于基因调节控制失灵，通过基因诊断，将发生紊乱的基因加以修复，有希望根治癌症。活学活用应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的，这里的基因探针是指()A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成珠蛋白的DNAD.合成苯丙羟化酶的DNA片段解析本题考查对基因诊断概念的理解。依据基因诊

3、断的定义可知B项正确。答案B归纳总结1.DNA探针的制备方法根据翻译产物蛋白质的氨基酸顺序查出相应的核苷酸顺序(约30个氨基酸对应的90个左右的核苷酸顺序)，再从中选出两个片段，用化学方法合成这两个片段并做同位素标记，即成探针。也可用所需的mRNA逆转录成DNA，标记后作为探针。2.基因诊断的过程获得目的基因构建基因探针从被测生物中取样对单链DNA分子进行PCR扩增将DNA转到特定的尼龙膜上将DNA探针与样品进行杂交观察杂交斑。3.基因诊断的优点传统诊断方法是通过表现型来推测基因型，而基因诊断是从基因着手来推断表现型，即通过直接探查基因进行诊断，不受细胞类型和发病年龄的限制，可用于部分遗传病的

4、诊断。例如，癌细胞的病变过程，主要是由于基因调节控制失灵，通过基因诊断，就可针对具体情况进行适当的治疗。4.基因诊断的应用 (1)对感染性疾病的诊断利用已知病原体的基因做DNA探针，当有病原体侵入人体后，就可以快速、准确地确定病因。基因诊断可用于病毒性(如乙肝病毒)感染、细菌性(如结核杆菌)感染、寄生虫侵染、真菌性感染等病原体的检测。(2)癌症的早期检测通过研究，人们已阐明部分基因与癌症之间的关系。目前临床上可以用基因检测方法诊断白血病、肺癌、神经胶质瘤等疾病。例如可以用从白血病患者细胞中分离出来的癌基因做成DNA探针检测白血病。 (3)对有遗传风险的胎儿作产前诊断通过基因诊断，不仅可以检测胎

5、儿性别，还可以检测与染色体有关的遗传病，对于高发性遗传病(如地中海贫血症、镰刀型细胞贫血症、凝血因子缺乏症等)的基因诊断已在临床上应用，为优生优育作出了巨大贡献。(4)在法医学上的应用通过对人基因结构的深入研究发现，有些具有个体特征的遗传标记可用于个体识别、亲子鉴别、DNA指纹分析等司法鉴定，还可以应用于动植物检疫与转基因动物中阳性基因的检测。知识点2神奇的基因芯片知识梳理1.基因芯片是将大量特定序列的DNA片段(探针)有序地固定在尼龙膜、玻片或硅片上，从而能大量、快速、平行地对DNA分子的碱基序列进行测定和定量分析。基因芯片实际上是一种高密度的DNA阵列。2.基因芯片的应用举例(1)发现疾病

6、的相关基因。(2)用于传染病的检测。(3)基因芯片技术与医学行为的改变。基因芯片不仅能做到快速、准确地诊断疾病，还可指导医生针对不同患者的基因活动特点，使用不同的治疗方法，进行个体化的治疗。基因芯片技术还有助于发现不同个体对疾病易感性的差异。思考：如果将来把每个人的基因做成基因芯片，你设想一下会有什么作用？提示：基因身份证、诊断疾病、侦察罪犯等。活学活用基因诊断所利用的原理是()A.基因突变 B.基因重组C.DNA分子杂交 D.染色体变异解析基因诊断的原理是DNA分子杂交即碱基互补配对。答案C知识点3初露曙光的基因治疗知识梳理1.基因治疗的概念就是把特定的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，从而达

7、到治疗疾病的目的。2.基因治疗SCID的过程(1)SCID患病机理：患者体内有两个分别来自父母双方的有缺陷的腺苷酸脱氨酶基因(ada)，造成体内缺乏腺苷酸脱氨酶，导致免疫系统不能完成正常功能，只能在无菌条件下生活。(2)治疗SCID过程：将人的正常ada基因与某种病毒核酸重组从SCID患者体内分离T淋巴细胞该病毒感染T淋巴细胞，同时将ada基因导入T淋巴细胞培养T淋巴细胞将携带正常ada基因的T淋巴细胞再注入患者体内获得免疫力。3.基因治疗恶性肿瘤(1)杀死肿瘤细胞：将抑制癌细胞增生的基因转入到癌细胞内，不仅可阻断癌细胞繁殖，还可诱导它自杀死亡，或者将一段可抑制癌基因转录的DNA序列导入癌细胞

8、，使癌基因不能表达，导致癌细胞不能增殖。(2)提高人体免疫力：将提高人体免疫力的基因导入免疫系统，提高人体防御功能，进而杀死癌细胞。4.基因治疗的一般步骤选择治疗基因将治疗基因与运输载体结合，将治疗基因转入患者体内治疗基因在细胞内正常表达。思考 ：要想根治遗传性疾病，最好的治疗措施是什么？提示：遗传病是由遗传物质发生变异而引起的，所以治疗的最佳措施是基因治疗。活学活用在人类的遗传病中，有一种重症联合免疫缺陷病(简称SCID)，这种患者缺乏正常的人体免疫功能，只要稍被细菌或病毒感染，就会发病死亡。经研究证实，SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶(简称ada)的基因发生了突变。目前，人

9、们已经找到了治疗该疾病的方案。如图：(1)(多选)载体必须具备的条件是()A.能在宿主细胞中复制并保存B.具有多个限制性核酸内切酶切割位点，以便与外源基因连接C.具有标记基因，便于进行筛选D.是环状形态的DNA分子(2)在图示过程中，所用到的基因操作工具分别是_。(3)研究人员将ada注入淋巴细胞，而不是其他细胞，其原因是_。(4)图中的治疗方法是_(“体内”或“体外”)基因治疗法，这是基因工程生物技术的应用。请列举除了在医学领域，该生物技术在其他领域的一些成就。_(举两例)。解析(1)载体是把目的基因导入受体细胞并使其复制、表达的工具，因此基因工程载体需具备以下条件：能在宿主细胞中复制并保存

10、以便于目的基因的复制与保存，具有多个限制性核酸内切酶切割位点，以便与目的基因连接，具有标记基因，便于进行筛选。(2)构建基因表达载体时，需用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶连接，通过基因表达载体将目的基因导入受体细胞。(3)腺苷酸脱氨酶基因在淋巴细胞内可进行基因表达，因此应将腺苷酸脱氨酶基因导入人体淋巴细胞才能产生腺苷酸脱氨酶。(4)由题意知，腺苷酸脱氨酶基因在体外完成了转移，筛选出含有腺苷酸脱氨酶基因的受体细胞后导入患者体内，该过程属于体外基因治疗。转基因技术还可应用在转基因动物、转基因植物、转基因微生物等方面。答案(1)ABC(2)限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载

11、体(3)腺苷酸脱氨酶是人体免疫系统发挥正常功能所必需的，而淋巴细胞才能产生抗体等免疫物质(4)体外如抗虫转基因植物、抗逆转基因植物等归纳总结基因治疗的机理(1)基因置换：正常基因取代致病基因。(2)基因修正：纠正致病基因的突变碱基序列。(3)基因修饰：目的基因表达产物补偿致病基因的功能。(4)基因抑制.外源基因干扰、抑制有害基因的表达。(5)基因封闭：封闭特定基因的表达。基因置换是用目的基因将病变基因彻底置换，使致病基因获得永久性更正，且原位替换是最理想的治疗方法，但限于技术手段，操作难，不易推广；基因修正是纠正病变的碱基序列，而保留正常序列，同样面临技术手段的问题，不易普及；基因修饰则是通过

12、将正常基因导入病变细胞或其他细胞来表达性状，以补偿致病基因功能，现已成为较成熟的手段；基因抑制是导入干扰、抑制有害基因表达的外源基因，是癌症治疗的良好选择；基因封闭是利用反义技术封闭某些基因，通过封闭基因的转录和翻译而使致病基因不能表达，但也未能从根本上修正基因。随堂练习巩固1.下列疾病可进行基因诊断的是()SARS疑似患者坏血病艾滋病肿瘤血友病苯丙酮尿症甲状腺肿大组织水肿A. B.C. D.解析坏血病是由缺乏维生素C所引起的疾病，不是血细胞基因结构改变引起的，所以不能通过基因检测诊断。甲状腺肿大、组织水肿分别是由缺碘、血浆渗透压降低造成的，不是基因结构改变引起的，不能通过基因检测诊断。其余都

13、可以通过DNA探针进行检测。答案B2.(2015山东临沂联考)下列关于基因治疗的说法，正确的是()A.基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复B.基因治疗是指利用遗传工程的原理和方法，通过引入目的基因来矫正人体内出现的异常基因，以达到治疗疾病的目的C.只要引入外源健康基因，就能治愈疾病D.基因治疗已解决了绝大多数的遗传病，今后的发展会相当慢解析基因治疗从狭义角度讲，可以理解为具有正常功能的基因置换或增补患者体内的缺陷基因，使其在“体内”表达，最终达到治疗疾病的目的。现在由于技术手段的落后和认知水平的限制，引入健康外源基因不一定能治愈疾病。现在基因治疗还受方方面面的限制，不能完成各种疾病治疗，仅在小

14、范围内取得了一定成效。答案B3.某基因芯片上载有碱基序列ATCGGC的探针，则可检测下列哪些碱基序列()TAGCCGATCGGCUAGCCGTUGCCGA. B.C. D.解析基因芯片的检测原理是DNA分子杂交，即碱基互补配对。既可检测DNA，也可检测RNA。答案B课时作业达标一、选择题1.下列与基因诊断有关的一组物质是()A.蛋白质、核酸 B.放射性同位素、蛋白质C.荧光分子、核酸 D.放射性同位素、糖类解析因为基因诊断是用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针，所以题中只有C项正确。答案C2.对肿瘤的论述错误的是()A.与肿瘤相关的基因包括原癌基因、抑癌基因等B.肿瘤的

15、形成是遗传因素与环境因素相互作用的结果C.肿瘤的发生只是基因表达与调控水平出现了变化D.基因芯片技术对肿瘤能进行早期诊断解析肿瘤的形成是遗传因素与环境因素相互作用的结果。肿瘤的发生、发展都伴随肿瘤相关基因和肿瘤细胞基因表达的改变。某些肿瘤的发生，既有基因结构的改变，也有基因表达与调控水平上的变化。答案C3.下列关于基因诊断的叙述，不正确的是()A.基因诊断具有更准确、快速、灵敏、简便等特征B.基因诊断应用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子做探针C.基因诊断的技术原理是DNA分子杂交技术D.科技发展、技术进步使基因诊断已能完成对所有疾病的诊断和检测解析本题考查基因诊断的定义、原理、特点及成

16、果。基因诊断不适用于所有疾病，如外伤。答案D4.下列不属于基因芯片技术应用的是()A.发现疾病的相关基因B.用于传染病的检测C.基因芯片技术应用引起医学行为的改变D.用于检测心理疾病解析基因芯片的检测原理是DNA分子杂交，检测的是样本上的遗传信息即DNA序列。A、B、C三项都是检测DNA序列。D项不是基因芯片检测的对象。 答案D5.(2015宁夏贺兰山联考)肿瘤是21世纪人类最主要的杀手，它是一种由环境因素与遗传因素相互作用的复杂性疾病，下列有关癌细胞的叙述，不正确的是()A.癌变的内在因素是致癌因子激活原癌基因B.减少癌细胞的营养供应可以抑制癌细胞的增殖C.所有癌细胞中的DNA含量都相同D.

17、用化学药剂抑制肿瘤细胞的DNA复制，可使其停留在间期解析在癌组织中，在同一时刻很多细胞处于有丝分裂的不同阶段，所以DNA含量不一定相同。比如前期的细胞比末期的细胞DNA含量高。答案C6.下列关于基因治疗的叙述中错误的是()A.通过导入目的基因来实现对缺陷基因的抑制、替换或修补B.基因治疗也可用于基因的改造，提高人类“优秀”基因的频率C.基因治疗最终要通过对目的基因的调控表达实现D.基因治疗过程中需要载体的参与解析基因治疗还有许多技术问题，不能进行基因改造，故选B。答案B7.对恶性肿瘤进行基因诊断的过程为()将DNA转到一种特制的尼龙膜上构建基因探针从人体的尿液或血清等体液中获得少量的脱落细胞，

18、提取DNA，经热处理成单链DNA将探针与尼龙膜上的DNA分子结合对单链DNA进行PCR扩增将扩增获得的DNA热处理得到大量的DNA单链A. B.C. D.答案B8.基因治疗的步骤为()治疗基因的表达选择治疗基因将治疗基因转入患者体内选择运输治疗基因的载体A. B.C. D.答案D9.基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，将同源DNA片段导入受体细胞，使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。基因敲除既可以使用突变基因或其他基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。下列有关基因敲除说法，正确的是()A.基因敲除实际上是删除某个基因，从而达到使该基因“沉

19、默”的目的B.利用基因敲除技术，不能修复细胞中的病变基因C.基因敲除可定向改变生物体的某一基因D.从理论上分析，利用基因敲除技术可治疗先天性愚型解析在基因治疗中，基因敲除具有广泛的应用前景。基因敲除就是定点修饰改造染色体上某一基因的一种技术，不是简单地删除某个基因。可以通过修复病变基因达到治疗疾病的目的。先天性愚型是生殖细胞在减数分裂过程中，由某些因素的影响发生染色体不分离所致，用基因敲除无法治愈。答案C10.鸡的输卵管细胞能合成卵清蛋白，红细胞能合成珠蛋白，胰岛细胞能合成胰岛素。用编码上述蛋白质的基因分别做探针，对三种细胞中提取的所有DNA进行杂交实验；用同样的三种基因片段做探针，对上述三种

20、细胞中提取的所有RNA进行杂交实验，实验结果如下表。下列是关于该实验的叙述，正确的是()基因探针提取物卵清蛋白基因珠蛋白基因胰岛素基因DNA输卵管细胞红细胞胰岛细胞RNA输卵管细胞红细胞胰岛细胞注：“”表示杂交过程中有杂合双链，“”表示杂交过程中没有杂合双链。A.胰岛细胞中只有胰岛素基因B.上述三种细胞的分化是由细胞在发育过程中某些基因被丢失所致C.在红细胞成熟过程中有选择性地表达了珠蛋白基因D.在输卵管细胞中无珠蛋白基因和胰岛素基因解析鸡的输卵管细胞、红细胞和胰岛细胞都是来自一个细胞受精卵有丝分裂产生的，所以每个细胞的DNA是相同的，三种基因探针与三种细胞内的DNA都能进行碱基互补配对。但是

21、三种细胞基因选择性表达过程中转录产生的信使RNA是不同的，所以鸡的输卵管细胞能合成卵清蛋白，红细胞能合成珠蛋白，胰岛细胞能合成胰岛素。 答案C11.下列对基因治疗安全性的问题叙述，不正确的是()A.基因治疗中最常用的载体是病毒，它们能自我复制B.在基因治疗中，科学家抑制逆转录病毒的某种活动防止它们引起疾病，使之能被安全地使用C.使用病毒载体运载基因，它们可能更多地改变目标细胞D.目的基因插入载体DNA的位置可能出现错误，导致癌症和其他损伤的产生解析基因治疗中最常用的载体为病毒，大多数基因治疗临床实验用小鼠逆转录病毒运送目的基因，其他病毒载体还包括腺病毒、痘病毒和疱疹病毒等。它们能进入细胞DNA

22、。在基因治疗中使用的病毒载体是有遗传缺陷的，它们不能自我复制。用逆转录病毒作载体，可能会导致其他疾病，要抑制逆转录病毒的某种活动，防止它们引起疾病，使之被安全使用。答案A反思领悟：基因治疗的一般步骤：选择治疗基因将治疗基因与运输载体结合治疗基因在细胞内正常表达。运输载体常用的是有基因缺陷的病毒，该病毒一般不会引起受体细胞病变。二、非选择题12.基因诊断过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。请设计一个实验，用DNA探针测定DNA上的核苷酸序列。【实验原理】利用DNA分子杂交技术，使已知DNA分子链与未知DNA分子链杂交，根据碱基互补配对原则确定未知DNA的碱基序列。【实验步骤】(1)用_

23、切取要测定的目的基因。(2)用PCR技术使_扩增。(3)用不同的DNA探针与_杂交，记录杂交区段的DNA碱基序列，最后分析出_的碱基序列。(4)预测分析。若DNA探针上DNA碱基序列为ATTAGGCA，则检测出的目的基因序列为_。答案(1)限制性内切酶(2)目的基因(3)目的基因目的基因(4)13.逆转录病毒的遗传物质RNA能逆转录生成DNA，并进一步整合到宿主细胞的某条染色体上。用逆转录病毒作为运载体可用于基因治疗和培育转基因动物等。(1)病毒在无生命培养基上不能生长，必须依靠活细胞提供的_等物质和结构基础才能繁殖。逆转录病毒较T2噬菌体更容易变异，从分子水平看，是由于_。(2)将带有目的基

24、因的受体细胞转入患者体内，患者症状会有明显缓解，这表明_。解析病毒没有独立代谢的能力，缺少酶合成系统和供能系统，需要宿主细胞提供代谢原料和环境。T2噬菌体的遗传物质双链DNA由于氢键等原因使之较单链RNA稳定，变异频率较低。基因治疗时患者症状得到明显的缓解，说明目的基因已大量表达。答案(1)酶、ATP、代谢原料、核糖体单链RNA不如双链DNA稳定(2)目的基因已大量表达14.SCID患者缺乏正常的人体免疫功能，只要稍被细菌或病毒感染，就会发病死亡。经研究证实，SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶的基因(ada)发生了突变。(1)请你利用所学知识，设计一个治疗SCID病的方案。第一步，先将人体正常ada基因克隆后用来替换反转录病毒的原有基因，构建成重组载体。第二步_。第三步_。第四步_。(2)还有哪些遗传病可用基因治疗方案治疗？_。(3)现有的基因治疗实验存在的危害是什么？_。答案(1)第二步，从SCID病人体内分离出免疫系统有缺陷的T淋巴细胞第三步，将这些T淋巴细胞与携带了正常ada基因的反转录病毒混合在一起，让病毒感染T淋巴细胞，使正常ada基因拷贝插入