草地贪夜蛾抗药性监测技术规程 送审稿

1、ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB地方标准DB XX/ XXXXXXXXX草地贪夜蛾抗药性监测技术规程Technical code of practice for insecticide resistance monitoring of fall armyworm 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（本稿完成日期：2020年4月20日）XXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施发布DBXX/ XXXXXXXXX目次前言III1范围12术语与定义13试剂与材料14仪器设备25试验步骤26数据统计与分析37抗药性水平的计算与评估3前言本标准按照G

2、B/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由江西省农业农村厅提出并归口。本标准起草单位：江西省植保植检局、南昌大学、上高县植保植检站、万安县植保植检站、泰和县植保植检站。 本标准主要起草人：邹志文、王希、舒宽义、黄向阳、史建苗、肖瑜红、况虹敏、肖慧。5草地贪夜蛾抗药性监测技术规程1 范围本标准规定了草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda (J.E.Smith)）抗药性监测的基本方法。本标准适用于草地贪夜蛾对杀虫剂抗药性监测。2 术语与定义下列术语和定义适用于本标准。2.1 抗药性 insecticide resistance由于杀虫剂的使用，在昆虫或螨类等种群中发展并可以遗

3、传给后代的对杀死正常种群药剂剂量的忍受能力。2.2 F1代 F1 generation从田间采集害虫的卵或幼虫，室内饲养，繁殖后得到的第一代幼虫。2.3 敏感性基线 susceptibility baseline通过生物测定方法得到的害虫敏感品系（或种群）对杀虫剂的剂量反应曲线。2.4 浸叶法 leaf-dipping method将浸过药液的叶碟置于含有琼脂或保湿滤纸上，接入靶标昆虫进行的生物测定方法。3 试剂与材料试剂为分析纯试剂。3.1 生物试材试虫：草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda (J.E.Smith)）；供试植物：未被药剂污染的玉米。3.2 试验药剂杀虫剂原药

4、或母药。4 仪器设备电子天平（感量0.1 mg），培养皿，移液管或移液器（200L、1000L、5000L），打孔器（直径为1 cm），烧杯（25 mL，50 mL，100 mL），量筒（10 mL，25 mL，50 mL，100 mL），养虫笼，剪刀，镊子，滤纸，恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱。5 试验步骤5.1 试材准备5.1.1 试虫5.1.1.1 试虫采集在监测田按抽样方法采集靶标昆虫幼虫或卵，幼虫不少于200头，卵块不少于30块。5.1.1.2 试虫饲养采集的幼虫或卵块在室内饲养到成虫分批产卵，取F1代3龄初期幼虫供试。5.1.2 供试植物使用新鲜、洁净、无农药污染的玉米叶片。5

5、.2 药剂配制待测杀虫剂原药用丙酮或其它有机溶剂溶解，配制成高浓度存贮液，杀虫剂制剂直接用蒸馏水配制成高浓度母液，然后用含0.05%的Triton X-100蒸馏水稀释到所需要的6-8个系列浓度梯度，以0.05%的Triton X-100蒸馏水作为对照，每质量浓度配制药液量不少于10mL。5.3 处理方法浸叶法，用含0.05%Triton X-100的蒸馏水稀释母液成系列梯度浓度（通过预实验确定药剂的浓度系列范围，最低浓度时死亡率小于20%，最大浓度时死亡率大于80%），每质量浓度药液量不少于200mL。将清洗干净的玉米叶片浸于不同浓度的溶液中10s，取出后在室内晾干至表面无游离水。用0.05

6、%Triton X-100水溶液浸渍的叶片作为对照。将晾干的叶片放入培养皿或试管中，用滤纸或琼脂保湿，接入3龄幼虫，单头饲养，每个处理10头幼虫，重复3次。5.4 结果检查根据杀虫剂的速效性分别于接虫后48h96h后检查。氯虫苯甲酰胺等双酰胺类、阿维菌素等微生物制剂，于药后72h96h检查，速效性好的药剂于药后48h调查。6 数据统计与分析6.1 计算方法根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按公式（1）和（2）计算，计算结果均保留到小数点后两位： P1 （%）=K100 （1）N式中：P1 死亡率，单位为百分率（%）；K 表示每处理浓度总死亡虫数，单位为头；N 表示每处理浓度总虫数，单位为头

7、。P2 （%）=Pt Po100 （2）100 - Po式中：P2 校正死亡率，单位为百分率（%）；Pt 处理死亡率，单位为百分率（%）；P0 空白对照死亡率，单位为百分率（%）。若对照死亡率20，试验需重做。6.2 回归方程和致死中浓度（LC50）计算方法采用SAS、Probit等软件的机率值分析法，求出每种供试药剂的毒力回归方程式LC50值及其95置信限、斜率（b值）及其标准误。7 抗药性水平的计算与评估7.1 草地贪夜蛾对部分杀虫剂的敏感性基线见附录A。7.2 抗性倍数的计算根据敏感品系的LC50值和测试种群的LC50值，按公式（3）计算测试种群的抗性倍数，计算结果均保留两位有效数字：R

8、R =T（3） S式中：RR 测试种群的抗性倍数；T 测试种群的LC50值；S 敏感品系的LC50值。7.3 抗性水平的评估根据抗性倍数的计算结果，按照下表中抗性水平的分级标准，对测试种群的抗性水平作出评估。表1 抗性水平的分级标准抗药性水平分级抗性倍数（倍）低水平抗性5.0 RR 10.0中等水平抗性10.0 100.0附录A(资料性附录)草地贪夜蛾对部分杀虫剂敏感毒力基线药剂LC50 (mg /L)（95%置信限）斜率 标准误甲维盐0.0183 (0.0143-0.0235)1.800.00阿维菌素1.72 (1.130-2.600)1.390.17甘蓝夜蛾核型多角体病毒（PIB/ml）355.20(62.325-2024.313)0.4538315.38氯虫苯甲酰胺0.3428 (0.270-0.43