公共卫生微生物采样检测方法总结

1、【公共卫生微生物采样.检测方法总结】 水中微生物检测方法一、空气中微生物的检测方法-细菌总数1.两种方法撞击法自然沉降法采样：梅花布点，高度：；离墙：1m。二、茶具微生物检验方法细菌总数1、生理盐水的制法：将氯化钠溶解于蒸馏水中，分装到试管内，每管10mL，121高压灭菌20min。2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈，用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。3、检验程序：检样各1mL加入两块灭菌平皿37，48h培养菌落计数报告4、单位：cfu/cm2。大肠菌群1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液2、检测方法：发酵法3、检样4、

2、革兰氏染色过程：初染：1min，水洗；碘染：1min，水洗；脱色：30s，水洗；复染：1min，水洗，待干，镜检。5、结果报告：凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告检出大肠菌群。三、毛巾、床上卧具微生物检测方法细菌总数1.采样毛巾、枕巾：对折后两面的中央各25cm2；床单、被单：在上下两部中央25cm2来回涂抹；2、检测程序同茶具细菌总数检测3.计算单位：cfu/25cm2。大肠菌群1.涂抹法：四、理发用具微生物检验方法大肠菌群1、采样推子：在推子前部上下部分均匀各涂抹三次；理发刀、剪和修脚工具：在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样；两个刀或者两个剪为一份样品。2、

3、检样5mL倒入双料乳糖胆盐发酵管，37，24h培养；3、分离培养：接种伊红美蓝平板，做革兰氏染色镜检；4、证实试验：接种乳糖发酵管37，24h培养，观察产气情况。5、结果报告：乳糖管最终产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，可报告为大肠菌群阳性。金黄色葡萄球菌1、培养基：%的氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤培养基2、步骤：做大肠菌群剩余的5mL倒入培养基中，37，24h培养；接种血平板，37，24h培养；观察形状：圆形、金黄色、凸起、表面光滑、周围有溶血圈；挑菌落做镜检：革兰氏阳性，葡萄状排列；甘露醇发酵试验：接种到甘露醇发酵培养基中，37，24h培养，观察是否产酸；血浆凝固酶试验玻片法：在干净的

4、玻片两边，一端滴一滴生理盐水，一端滴一滴血浆，接种环挑菌落分别与它们混合。5min后均无凝固现象的为阴性；若血浆中出现颗粒状凝块而生理盐水中没有，则为阳性。五、拖鞋微生物检验方法霉菌与酵母菌1.培养基：霉菌培养基、孟加拉红培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基2.取样：有棉拭子在每只拖鞋鞋面与脚趾接触处的5cm5cm面积上均匀涂抹3次，一双拖鞋为一份样品；3.将盛有棉拭子的试管在手心用力振荡100次，使霉菌孢子分开；4.培养：在霉菌培养箱中2528，培养观察一周。5.单位是cfu/50cm2。六、浴盆、脸盆微生物检测细菌总数无菌生理盐水：分装125mL/瓶供浴盆采样；50mL供脸盆采样。 采样部位：在

5、盆内侧二分之一到三分之一高度；布点：浴盆梅花布点；脸盆相对两侧壁布点；方法：涂抹法单位：cfu/25cm2。大肠菌群七、游泳池水微生物检测、细菌总数1.采样瓶：无酸、无碱、无毒的玻璃容器。2.灭菌前要加入足量的10%的硫代硫酸钠溶液，一般125mL水样加。3.采样4.操作步骤大肠菌群1.培养基：三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液2.步骤推测性试验2个装有50mL三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的大试管内各加入100mL的水样；在10支装有5mL三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的试管里加入10mL水样。摇匀，培养。平板分离接种伊红美蓝，培养、观察；典型菌落形态：黑紫色或红紫色，具有金属光泽。复发酵试验进行革兰氏染色，同时

6、接种乳糖发酵管，培养，观察。查表：1000mL水样中大肠菌群的MPN值。八、生活饮用水微生物检验方法采样1.采样容器应采用洁净、无色、无毒的聚乙烯塑料和硬质玻璃。样品瓶必须专瓶专用，切不可用实验室盛装过浓溶液的瓶作采样瓶。通常我们使用500ml的高压灭菌的细口瓶采样。2.容器及瓶塞、瓶盖应能经受灭菌的温度。3.检验中所用的一切用品必须是完全灭菌的。在灭菌前应彻底洗涤干净，121高压蒸汽灭菌20min，或160干烤2h。4.冷藏，4h内检测。如有游离余氯应在采样瓶消毒前每125ml加硫代硫酸钠溶液。细菌总数总大肠菌群1.乳糖发酵试验10mL水样加入10mL双料乳糖发酵管中；1mL水样加入10mL

7、单料乳糖发酵管中； 水样加到10mL单料乳糖发酵管中；每一稀释度接种5管。37培养24小时，观察产酸产气现象2.分离培养3.证实实验4.结果报考：查表。耐热大肠菌群1.培养基：EC培养基2.操作步骤：同大肠菌群多管发酵法。3.培养温度：培养24h。大肠埃希氏菌1.培养基：EC-MUG培养基2.培养温度：培养24h。3.观察：在暗处用366nm的紫外灯照射，是否有蓝色荧光产生；4.计算阳性管数，查表得出最可能数，结果以MPN/100mL报告。九、公共场所集中空调系统冷凝水、冷却水中嗜肺军团菌采样1.采样容器：可选择玻璃瓶或聚乙烯瓶，广口瓶，用前灭菌。2.采样量：每个采样点依无菌操作取水样约500

8、ml。3.中和：经氯或臭氧等消毒的样品，采样容器灭菌前加硫代硫酸钠溶液中和。4.样品运输与贮存：样品最好2天内送达实验室，不必冷冻，但要避光和防止受热，室温下贮存不得超过15天。热处理：取1ml洗脱样品置50水浴加热30min。酸处理：取5ml洗脱样品，调pH至，轻轻摇匀，放置5min。接种平板静置于浓度为%的CO2培养箱中，3537，观察到有培养物生成时，反转平板，孵育10d，注意保湿。观察军团菌生长缓慢，易被其它菌掩盖，需每天在体式镜上观察。军团菌的菌落颜色多样，通常呈白色、灰色、蓝色或紫色，也能显深褐色、灰绿色、深红色；菌落整齐，表面光滑，呈典型毛玻璃状，在紫外灯下，部分有荧光。送风中细菌总数以无菌操作，使用六级筛孔空气撞击式采样器，以空气流量为/min，在采样点采集515min。将采集细菌后的营养琼脂平皿置3537培养48 h，计数菌落数。送风中真菌总数采样方法同上将采集真菌后的沙氏琼脂培养基平皿置28培养57 d，逐日观察并于第7 d 记录结果。若真菌数量过多可于第5d 计数结果，并记录培养时间，换算成cfu/m3。送风中-溶血性链球菌