中药药理学实验

实验1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现的影响（6学时）【目的】观察生附子和制附子致小白鼠的死亡数量，评价炮制对附子毒性的作用。【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。【药品】生附子水煎醇沉液（上清液）0.5g/ml、制附子水煎醇沉液（上清液）0.5g/ml。【动物】小鼠，雌雄各半，体重18 22 g。【方法】小鼠20只，雌雄各半，随机分为2组。按0.2ml/10g腹腔注射给药，第1组给予生附子水煎醇沉液，第2组给予制附子水煎醇沉液。观察并记录30min内各组小鼠死亡情况。【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数，比较两者毒性的大小。【注意事项】生附子和制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上。【思考题】根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异的原因。实验2 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响（炭末法）（4学时）目的了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄与芒硝配伍的药理意义。原理 利用黑色炭末作为指示剂，观察炭末在肠道的推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速，有泻下作用，故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制之后，致泻成份分解，作用减弱，而芒硝在肠内不易被吸收，使肠内渗透压升高，大量水分保留在肠腔，机械性刺激肠壁而致泻。故生大黄与芒硝配伍有“增水行舟，润燥软坚”之功效，致泻作用增强。器材 手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平，烧杯，搪瓷盘或蛙板。药品 炭末生理盐水混悬液0.1g/m（炭末为活性炭），生大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/m1)， 制大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/ml，生大黄水煎液加芒硝（生大黄1g/ml+芒硝0.5g/ml+炭末0.1g/m1)，苦味酸。动物 小白鼠。方法 取禁食2024h成年、体重相近的12只小白鼠，随机分为4组，每组3只，用苦味酸标记。分别用上述4种炭末液0.3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末在肠内推进距离”。取各组3只小自鼠平均值，用公式汁算炭末推进百分率，并注意观察各组小肠容积是否增大。 炭末在肠内推进距离（cm）炭末推进率= 100% 小肠全长（cm）结果按结果记录分析并填表。生大黄、制大黄及大黄加芒硝对小白鼠肠蠕动的影响组别动物数（只）剂量（g/kg）小肠总长度（cm）炭末推进距离（cm）炭末推进l率（%）肠容积变化生理盐水生大黄制大黄生大黄加芒硝注意（1）开始给药至处死动物的时间必须准确，以免时间不同造成实验误差。（2）实验动物体重越接近越好，平均体重最好用2325g小鼠，肠管比较粗大，易于操作。（3）肠容积变化可以上下端接扎，称取重量，以定量化。附 （1）生大黄制剂的制备：取生大黄100g，砸成小块后，以水浸没。冷浸24h后过滤，40水浴浓缩至1g/ml。（2）制大黄制剂的制备：取制大黄l00g，加水煎沸1.5h以上，过滤，药液水浴浓缩至1g/ml。 思考题 （1）大黄致泻的主要成分及作用机理是什么？（2）大黄加芒硝为何致泻作用增强？有哪些主要方剂有大黄与芒硝配伍使用？实验3 天麻对小白鼠的镇静作用(活动计数法)（2学时）【目的】通过天麻注射液对小鼠自发活动的影响，了解其镇静作用。【原理】天麻可使小鼠自发活动明显减少，从而认为平肝息风药功效的发挥似与它们的镇静作用有关。【器材】注射器、天平。【药品】天麻注射液0.12g/ml、生理盐水、苦味酸溶液。【动物】小白鼠。【方法】取活动度近似的小鼠，按体重随机分为2组，用苦味酸标记。分别腹腔注射天麻注射液0.2ml/10g及等容量生理盐水。给药30min后将各组小鼠分别放人自主活动箱中，连续观察到20min比较给药组与对照组小鼠活动数，用公式计算各给药组小鼠20min累计自发活动抑制率： 对照组小鼠自发活动数给药组小鼠自发活动数自发活动抑制率 100 对照组小鼠自发活动数【结果】实验结果按表记录。 天麻对小白鼠的镇静作用（活动计数法）组别 给药途径 剂量 给药后20min活动数 自发活动抑制率 （g/kg） （）生理盐水组 天麻注射液组 【注意事项】（1）在测小鼠自发活动时注意保持实验环境的安静及实验条件的一致，否则对实验结果的影响很大。（2）第一只小鼠测完自发活动后，把自发活动箱檫拭干净、尽量去除气味后再放入第二只小鼠，以减少小鼠之间的相互干扰。实验4 人参、灵芝对小白鼠游泳时间的影响（4学时）目的 观察人参、灵芝对小鼠游泳时间的影响，掌握抗疲劳作用药物的常用筛选方法。原理 人参、灵芝能促进人体对糖原和三磷酸腺苷等能量物质的合理利用，并使剧烈运动时产生的乳酸转化为丙酮酸进入三羧酸循环，为机体提供更多的能量，减轻体力运动时的疲劳。本实验以小鼠游泳时间为指标观察人参、灵芝的抗疲劳作用。器材 天平、50cm30cm25cm的玻璃缸（或塑料盆）、负重物、温度计、小鼠灌胃器、秒表。药品 人参、灵芝水煎液2.5g/ml、生理盐水、苦味酸液。动物 小鼠，体重1822g。方法 玻璃缸内加水，水深20cm，水温保持在200.5。取4只小鼠，雌雄不限，称重，用苦味酸标记，随机分为两组。给药组每只灌胃人参、灵芝水煎液0.25ml/10g，对照组每只灌胃等容量的生理盐水，给药后30min在尾部束一2g的重物（可不用），并分别放入玻璃缸内游泳，立即计时并注意观察，当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面者即为体力耗竭，停止计时，记录小鼠游泳时间。与对照组比较并进行统计学处理。综合全实验室的结果，分别算出两组的平均游泳时间结果 按表记录 人参、灵芝对小鼠游泳时间的影响组别