传染性疾病标本采集方法.doc

. 传染性疾病标本采集方法 标本采集、 运送与报告操作规程 一、 血培养指征 患者出 现寒战， 体温超过 38或低体温， 怀疑血流感染时， 尤其存在以下情况时， 应抽血做细菌和真菌培养： 医院内肺炎； 留置中心静脉导管超过 72 h； 感染性心内膜炎； 骨髓炎； 有严重基础疾病、 免疫缺陷伴全身感染症状； 临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。 二、 采血时机 一旦怀疑有血流感染可能， 应立即采血做血培养， 最好在抗菌治疗前或停用抗菌药物 24 h 后， 以寒战、 发热时采集为宜。 三、 采血流程 （ 一） 消毒 1 培养瓶消毒程序： 用消毒液消毒培养瓶橡皮塞， 待干燥后使用。 2 皮肤消毒程序： 用消毒液从穿刺点向外画圈消毒， 至消毒区域直径达 5 cm 以上， 待消毒液挥发干燥后（ 常需 30 s 以上） 穿刺采血。 （ 二） 静脉穿刺和培养瓶接种 成人用 注射器无菌穿刺取血后， 排尽针头内空气， 直接注入血培养瓶， 勿换针头（ 如果行第二次穿刺或用头皮针取血时， 应换针头）， 先注于厌氧培养瓶， 避免注入空气， 然后注入需氧培养瓶， 轻轻混匀以防血液凝固。 近年来， 临床普遍采用负压血培养瓶， 将血从患者静脉直接吸入血培养瓶， 减少污染环节。 （ 三） 注意事项 1 检验单需注明抗菌药物使用情况、 血液采集时间和部位、 临床诊 断等患者信息。 2 采血部位通常为肘静脉， 疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜， 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。 除非怀疑有导管相关的血流感染， 否则不应从留置静脉或动脉导管取血， 因为导管易被皮肤正常菌群污染。 3 采血次数： 对于成年患者， 应该同时分别在两个部位采集血标本，在两个不同部位分离到同样菌种才能确定是病原菌。 4 细菌性心内膜炎： 在 24 h 内取血 3 次， 每次间隔不少于 30 min;必要时次日 再做血培养 2 次。 5 采血量： 以培养基与血液之比 10： 1 为宜， 以稀释血液中的抗菌药物、 抗体等杀菌物质。 采血量过少会明显降低阳性率。 成人每次每培养瓶采血 8 10 ml， 婴幼儿每次每培养瓶采血 2 ml。 四、 运送要求 1 所有标本采集后都应立即送往实验室， 最好在 2h 内。 如果不能及时送检， 宜置于室温环境。 血培养瓶送到检验科放入培养箱前， 不应暂存于冰箱内。 2 送检标本应正确粘贴条形码， 注明采样时间和送检时间。 3 安全防护： 放标本的容器必须防漏， 禁止将渗漏的标本送往实验室。 五、 报告要求 （ 一） 紧急口 头（ 电话） 报告 血培养出现阳性报警时， 立即进行革兰氏染色、 镜检， 并在最短时间内将结果向临床主管医生进行紧急口 头（ 电话） 报告。 口 头报告包含以下内容， 并记录在案。 (1) 报告者全名 （ 或工号）； (2) 报告的时间； XXXX 年 XX 月 XX 日 XX 时 XX 分（ 24 小时制） (3) 所联系医生的全名 （ 或工号）； (4) 报告镜检结果并强调其紧急价值； (5) 确认临床医生收到报告并复述结果。 （ 二） 最终结果（ 书面） 报告 (1) 无菌生长（ 培养 5 天无需氧菌和厌氧菌生长）； (2) 阳性培养结果（ 最终鉴定结果、 最终药敏结果）。 （ 三） 其他报告和记录 1 标本被拒收时， 需即刻通知临床立即重新采血， 并记录在案。 2 最终结果与紧急口 头报告结果不符， 需要变更时， 需立即通知临床， 同时必须在书面报告上提供正确的结果， 注明变更的内容。 3 其他需临床注意的事项的记录， 如： 采血量不足、 标本转运时间过长、 标本采集份数不够等信息。 痰标本采集与 运送标准操作规程 一、 采集目 的 一般可用于普通细菌、 分枝杆菌、 真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引 物可用 于厌氧菌的检测。 二、 一般原则 1 采集标本的最佳时机应在使用 抗菌药物之前。 2 宜采集清晨第二口 痰液。 3 对于普通细菌性肺炎， 痰标本送检每天 1 次， 连续 2 3 天。 不建议 24 h 内多次采样送检， 除非痰液外观性状出 现改变。 4 怀疑分枝杆菌感染者， 应连续收集 3 天清晨痰液送检。 三、 采集方法 （ 一） 自 然咳痰法与雾化导痰法 1 用 物准备： 无菌容器（ 盒）、 生理盐水(250 ml 或 500 ml) 、 化验单。 2 核对患者床号、 姓名 等。 3 无痰或痰量极少者可用 3% 5%氯化钠溶液 5 ml 雾化吸入约 5 min后留取痰液。 4 如有可能， 应在医护人员 直视下留取清晨第二口 痰。 嘱咐患者留取前摘去牙托， 清洁口 腔， 如刷牙后反复用生理盐水漱口 ； 深吸气后用力自 气管深部咳出痰液， 置无菌容器内。 应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品， 不应用 纸巾 包裹痰液。 （ 二） 支气管镜法 鼻或口 腔插入支气管镜。 常用采集方法有经支气管镜吸引 、 支气管肺泡灌洗、 防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。 （ 三） 经人工气道吸引 法 1 用 物准备： 负 压吸引 器、 生理盐水、 一次性吸痰管、 无菌手套，无菌容器（ 试管）、 化验单。 2 核对患者床号、 姓名 等。 3 将患者头部转向操作者一侧。 4 进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开， 连接吸引 器， 调节吸引器至适宜负 压(成人： 40. 0 53. 3 kPa; 小儿： 40. 0 kPa) 。 5 将一次性吸痰管外包装去除， 戴手套持吸痰管试吸生理盐水， 检查管道是否通畅。 6 折叠一次性吸痰管末端， 插入口 腔或鼻腔或人工气道至适宜深度， 放开吸痰管末端， 轻柔、 灵活、 迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。 见吸痰管内有痰液吸出， 即折叠一次性吸痰管退出 ， 将一次性吸痰管与 吸引器分离(使用人工呼吸机者， 一次吸痰时间不超过 15 s， 吸痰前后需吸入高浓度氧气 1 2 min) 。 7 将痰液注入无菌容器（ 试管） 内， 如痰液黏稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水， 将痰液冲人无菌容器（ 试管） 内。 四、 运送和保存 应在 2h 之内送至实验室， 否则 应 4冷藏， 但放置时间不可超过 24 h。 尿液标本采集和运送标准操作规程 一、 采集时机 宜为抗菌药物使用之前的清晨第一次尿液。 二、 采集方法 （ 一） 清洁中段尿 1 女性： 采样前用 肥皂水或 0. 1%的高锰酸钾溶液等冲洗外阴， 用手指分开阴唇， 弃其前段尿， 不终止排尿， 留取中段尿 10 20 ml 于无菌容器内。 2 男 性： 采样前用肥皂水或 0. 05% 0. 1%的聚维酮碘（ 碘伏） 溶液等消毒液清洗尿道口 ， 擦干后上翻包皮， 弃其前段尿， 不终止排尿， 留取中段尿 10 20 ml 于无菌容器内。 （ 二） 耻骨上膀胱穿刺 主要用 于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿、 脊柱损伤患者的尿液采集。 先用 0. 25%的聚维酮碘溶液等消毒液消毒穿刺部位皮肤， 然后使 用无菌注射器直接从耻骨联合与 脐连线上高于耻骨联合2 cm处刺入膀胱吸取尿液 10-20 ml 于无菌容器内。 （ 三） 导尿管尿 1 直接导尿法： 使用 0. 05% 0. 1%的聚维酮碘溶液等消毒剂消毒会阴局部， 用 导尿管直接经尿道插入膀胱， 先弃其前段尿液约 15 ml， 再留取中段尿液 10 20 ml 于无菌容器内。 2 留置导尿管法： 医院内尿路感染中， 临床最常用 此法。 采集前先夹住导尿管， 采集时则 松管弃其前段尿液， 使用 0. 25% 0. 5%的聚维酮碘溶液等消毒剂消毒导尿管的采样部位， 使用 无菌注射器斜刺入导尿管（ 从采样口 或靠近尿道的导尿管管壁） 抽取 10 20 ml 尿液于无菌容器内。 3 回肠造口 导尿管法： 摘除导管， 弃去里面的尿液， 先用 0. 05%0. 1%的聚维酮碘溶液等消毒剂消毒吻合口 ， 再将导尿管插入到清洁的吻合口 ， 直至筋膜的深部采集 1020 ml 尿液于无菌容器内。 （ 四） 小儿收集包 对于无自 控能力的小儿可应用收集包采集尿液， 这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性， 所以只 有在检验结果为阴性时才有意义。 如果检验结果为阳性， 应结合临床进行分析， 必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。 三、 标本运送 标本采集后应及时送检并接种， 室温下保存时间不应超过 2 h（ 夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存）。 如果不能及时运送或接种， 应 4冷藏， 但保存时间也不应超过 8h。 四、 注意事项 1 不应从集尿袋中采集尿液。 2 尿液中不应加防腐剂或消毒剂。 3 若尿液培养前患者曾使用 抗菌药物， 应反复多次送检。 4 多次采集或 24 h 尿不应用于尿液培养。 5-除非进行流行病学调查， 不应对长期留置导尿管患者常规进行尿液培养。 6 培养结果应结合临床表现、 菌落计数以及微生物种类等， 进行综合判断。 粪便标本采集法 【目 的】 1、 常规粪标本 检查粪便的颜色、 形状及有无脓血。 2、 隐血粪标本 检查粪便内肉眼不能看见的微量血液。 3、 寄生虫及虫卵粪标本 检查寄生虫成虫、 幼虫及虫卵并计数， 进行浓缩集卵、 日 本血吸虫毛蚴孵化等。 4、 培养粪标本 检查粪便中的致病菌。 【操作前准备】 1、 患者评估 （ 1） 了 解患者的临床诊断及合作能力。 （ 2） 了 解需做的检查项目 ， 以明确收集粪便标本的种类及注意事项。 2、 患者准备 使患者了 解留取粪标本的目 的、 意义和方法， 能够配合， 3、 用物准备 干净便盆， 常规检查应备集便盒（ 内附棉签 2 支 ） ， 粪便培养应备培养皿， 寄生虫检查应备寄生虫检便盆。 【操作步骤】 1、 核对医嘱， 贴检验单副联于集便盒上。 2、 核对患者姓名 ， 做好解释。 3、 告知患者正确的留取方法。 （ 1） 常规粪标本采集： 用 棉签取较中 央的粪便或脓血黏液部分少许于集便盒内。 （ 2） 培养粪标本采集： 解大便之前用 消毒液冲洗肛门， 用无菌棉签取粪便中央处置于培养皿中， 盖好盖子。 如患者无便意时可用 无菌棉签蘸取等渗盐水， 由肛门插入 6-7cm， 轻轻转动棉签取出粪便少许，插入培养试管中送检。 （ 3） 寄生虫及虫卵标本采集： 如查阿米巴原虫， 便盆需要先加温， 因阿米巴原虫在低温下失去活力难以找到， 便后连同便盆立即送检；查绦虫有时需多次收集粪便， 查找绦虫头； 查虫卵则 需取大便的黏液脓血部分； 查蛲虫虫卵， 需在患者清晨起床前用特制的肛门拭子轻擦肛周皱褶处， 放入置有温盐水的试管中立即送检。 4、 标本及时送检， 做好记录， 追踪记录检验结果。 【注意事项】 1、 采集培养标本应取未接触便盆的大便， 注意无菌操作， 以免因污染而影响培养效果。 2、 若留取的标本时做隐血试验， 则 嘱患者在检查前三天禁食肉、 肝、肉类食物、 含大量叶绿素的食物和含铁剂的药物。 3、 如留取寄生虫或虫卵粪标本时， 当 服用 驱虫剂 或做血吸虫孵化检查， 需留取全部粪便送检。 急性迟缓性麻痹粪便标本： 在麻痹出现后 14 天内采集两份粪便标本（ 临床高度疑似脊灰病例、高危病例和 0 剂次 AFP 病例采集 3 份） 至少间隔 24 小时， 每份标本重量 5 克（ 约为标本盒的 1/2） 置专用 粪便盒内， -2