安捷伦1260 6120液质联用仪操作规程

Agilent 1260/6120液质联用-单四级杆质谱操作规程文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 1 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期一、 目的建立Agilent LCMS的标准操作规程，使分析人员的操作具有规范性和确保检测数据的准确可靠性。二、 应用范围所有参与Agilent LCMS操作的分析人员和操作人员。三、 使用标准 Agilent LCMS 化学工作站标准操作培训 中文版四、 责任人分析部负责制作规程； 分析部主管审核； 研发部总监批准；研发部分析人员和操作人员负责执行五、 概述：A、 工作原理LCMS的工作原理是用高压输液泵，将具有不同特性的单一溶液或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，用泵压入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱内，在色谱柱内各成分被分离后，依次进入检测器，进入离子源后，试样被离子化，然后聚焦于质谱的质量分析器中，根据质荷比不同而被分离检测，获得各种色谱和质谱数据。色谱信号由色谱工作站进行记录处理。B、 仪器的主要组成部分Agilent 1260 6120液质联用色谱仪主要由G1311B四元泵、G1329B自动控温自动进样器、G1316A柱温箱、G4212B二极管阵列检测器、6120单四极杆质谱检测器和Open LAB色谱工作站等部件组成。文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 2 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期六、 操作规程：6.1. 开机6.1.1 打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力为0.56-0.69Mpa。6.1.2 准备LC流动相，泵柱塞冲洗溶剂，检查管线连接状态，确认粗真空泵和喷雾室的废气排到实验室外部。6.1.3 打开计算机，并依次打开LC各模块电源及质谱电源，等待各模块自检完成(各模块右上角指示灯为黄色或者无色，质谱有“嘟”一声声音) 。6.1.4双击桌面图标，进入化学工作站 。颜色说明：颜色位置无色黄色绿色红色蓝色灰色模块右上角状态灯未开电源或者模块准备就绪模块未准备就绪正在进样分析模块出错；所有模块红色，仪器有漏液工作站图形颜色模块未准备就绪模块准备就绪出错或者不能联机正在进样分析此模块没启用文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 3 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.2. 调谐开始抽真空之后至少要等4个小时或更长时间才能进行调谐或操作LC/MSD。建议每周进行一次检验调谐，当检验调谐失败时，应该进行一次自动调谐。调谐应该不需要超过每月一次或最多每星期一次。一般情况下调谐一次可以稳定三个月。6.2.1 单击MSD调谐,进入仪器调谐。6.2.2 选择调谐文件，一般选择ATUNES.TUN文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 4 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.2.3 自动调谐双极性调谐会先做正模式调谐，再做负模式调谐，第一次调谐必须是双极性调谐。自动调谐一般在检验调谐失败后做，也可以每个月或在做完仪器维护后执行。6.2.4 检验调谐检验调谐可以每天进行（不关机情况下，每周1次就可以），检查峰宽，质量轴和调谐离子丰度是否达标。如果失败工作站会提示对失败的项目重新校正。如果校正仍然失败则需要做自动调谐。文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 5 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.2.5 保存调谐文件，指定文件名和路径，将调谐文件保存到atunes.tun中。6.2.6 最后点击方法和运行控制，返回到仪器控制界面。6.3. 样品测定6.3.1 方法建立从编辑整个方法开始，如图所示。文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 6 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期从方法菜单中选择“编辑完整方法”项，选择要编辑的项目，点击“确定”。编辑关于该方法的注释，然后点击“确定”。文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 7 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期系统默认选择自动进样。6.3.2 编辑LC采集参数文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 8 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.3.3 编辑MSD采集参数其中Fragmentor的值是碰撞解离诱导的电压值。对于大分子需要更大的fragmentor值才能使离子进入skimmer。这个参数对于检测到的离子丰度影响很大，需要优化。选择scan模式需要设定扫描的分子量范围，选择sim摸式则需要设定被检测的离子的质核比（小数点后一位的分子量）。6.3.4 报告的设定简短报告包含了信号详细信息对话框中设置的所有积分信号的定量文本结果。 LCMS定性报告中，显示各个积分的色谱峰的质谱图，可以自动扣背景，并对色谱峰中主要离子自动提取EIC。文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 9 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.3.5 方法的保存文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 10 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.4. 数据分析6.4.1. 点击图标，打开分析软件，使用导航栏可以查看数据所在的位置。6.4.2. 使用下拉菜单可以选择想查看的通道。文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 11 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.4.3. 光谱工具栏介绍6.4.4.显示质谱图打开色谱图，选择光谱工具，从光谱工具栏里先提取离子色谱，然后平均一组选定的光谱，就可以看到质谱图。文件名称Agilent液质联用标准操作规程文件编码 SOP-R&D-14A-012-01共 12 页 ，第 12 页起 草 人：审 核 人：批 准 人：生效日期起草日期：审核日期：批准日期：起草部门分发部门修 订 号 批准日期 执行日期6.5. 关机6.5.1 进入