姜黄素不同提取方法比较研究

1 / 6姜黄素不同提取方法比较研究作者：陈雁虹,秦波,张媛媛,程伟,吕圭源,叶祖光【摘要】 目的 对 5 种提取姜黄素的不同方法进行比较。方法 以各法提取所得的姜黄素含量与得膏率作为评价指标,优选姜黄素的提取工艺。结果 80 乙醇温浸提取姜黄素所得的含量最高,为姜黄素的优选提取工艺。结论 该法提取姜黄素含量高,操作简单,稳定可行。 【关键词】 姜黄；姜黄素；提取方法姜黄(Curcuma longa L.)来源于姜科植物姜黄的干燥根茎,主要产于我国四川、云南、广西、广东、福建、台湾等地。姜黄性温,味辛、苦,具有破血行气、通经止痛的作用,常用于胸胁刺痛、闭经、癥瘕、风湿肩臂疼痛、跌扑肿痛等1。 姜黄的化学成分包括姜黄素类化合物(curcumins)、萜类化合物(Terpenoids)、甾醇类化合物(sterols)、糖类化合物(Carbohydrates)及微量元素等。其中姜黄素类化合物主要包括姜黄素(curcumin)、去甲氧基姜黄素(demethoxy-curcumin)和双去甲氧基姜黄素(bisdemethoxycur-cumin)2。姜黄素(C21H20O6)为醇溶性二苯基庚烃类化合物,不溶于冷水,微溶于乙醚和苯,加热时溶于乙醇、乙二醇,易溶于冰醋酸和碱溶液。姜黄素在高温、强酸、强碱或强光环境中稳定性较2 / 6差3,因此提取温度不宜过高。目前,其主要提取方法有甲醇、乙醇有机溶剂提取法、碱水热提法、酶解提取法、外场辅助提取法等,本实验选用碱水热提、酶解提取、乙醇回流提取、乙醇温浸提取、乙醇渗漉提取 5 种方法,对各法提取所得的姜黄素含量与得膏率进行了考察比较,为姜黄素的研究提供参考和依据。1 仪器与试药FZ102 微型植物试样粉碎机(北京市永光明医疗仪器厂)；DZKW-S-4 电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器厂)；DZF-6050 真空干燥箱(上海一恒科技有限公司)；AB135-S电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；Agilent 1100 高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)。姜黄(购于北京人卫中药饮片厂,四川产)；姜黄素对照品(中国药品生物制品检定所,批号 110823-XX03)；半纤维素酶(hemicellulase,Sigma)；其他所用试剂均为分析纯,HPLC 分析所用试剂为色谱纯。2 方法与结果提取方法姜黄碱水回流提取2姜黄粉碎过 40 目筛,取 50 g,加水,用 1%氢氧化钠溶3 / 6液调 pH 值至,于沸水中提取 3 次,加水量分别为原药材重量的 10、8、6 倍。提取时间分别为 60、54、30 min。姜黄酶解后碱水回流提取4姜黄粉碎过 40 目筛,取 50 g,加 6 倍量水在 90 水浴中保温 1 h,降温,加入半纤维素酶 mg,并加水至 10 倍量,用 1%盐酸溶液调 pH 值至,于 50 水浴中酶解 2 h,酶的浓度为 mg/mL,酶解后用 1%氢氧化钠溶液调 pH 值至,按“”项下方法用碱水提取。姜黄乙醇回流提取姜黄粉碎过 40 目筛,取 50 g,于 80%乙醇中加热回流提取 3 次,3 次的乙醇用量均为原药材重量的 6 倍。提取时间每次 2 h。姜黄乙醇温浸提取 姜黄粉碎过 40 目筛,取 50 g,于 80%乙醇中加热至 80 ,保温温浸提取 3 次,乙醇用量均为原药材重量的 6 倍。提取时间每次 2 h。姜黄乙醇渗漉提取5姜黄粉碎过 40 目筛,取 100 g,以 80%乙醇为溶剂避光浸渍 6 h 后渗漉提取,乙醇用量为原药材重量的 4 倍,漉速为 9 mL/(minkg),收集倍药材重的漉液。4 / 6浸膏得率的测定按各法提取后,合并提取液、滤过,滤液 60 减压回收溶剂后水浴浓缩至一定浓度。真空干燥至恒重,得浸膏,精密称量,计算浸膏得率浸膏得率(%)浸膏净重(g)/药材量(g)100%,结果见表 1。 姜黄素含量的测定色谱条件色谱柱：Kromasil C18(250 mm mm, 5 m)；预柱：Kromasil C18( mm mm,5 m) ；检测波长 430 nm；流动相：乙腈-4%冰醋酸(4852)；柱温 30 ；流速 mL/min。标准曲线的制备精密称取姜黄素对照品适量,加甲醇溶解并定容,配制成 g/mL 的对照品溶液。分别以3、5、10、12、15、18 L 进样,按上述色谱条件测定峰面积。以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线形回归,得回归方程：Y4 ,R2 5,r 7,结果表明,姜黄素在 52 12 g 之间峰面积与进样量呈良好的线性关系。样品的含量测定将对照品制备成 g/mL 的甲醇溶液。各样品浸膏干粉称取适量,置 50 mL 容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,再精密5 / 6移取 2 mL 置 10 mL 容量瓶中,加甲醇定容至刻度,混匀,微孔滤膜过滤( m),取续滤液作为样品溶液。在上述色谱条件下,对照品溶液和样品溶液分别进样 10 L,测定姜黄素峰面积,按峰面积计算姜黄素的含量。结果见表 2。W每 1 g 浸膏含有的姜黄素(mg)(样品峰面积/对照品面积)(g/mL)样品浓度(mg/mL)姜黄素含量(mg)W浸膏净重(g)姜黄素含量(g/100 g 药材)姜黄素含量(mg)10-3/药材量(g)100%结果分析(见表 1、表 2)表 1 不同方法提取姜黄的浸膏得率表2 不同提取物中姜黄素的含量注：浸膏得率评分=(30/最大浸膏得率)浸膏得率；姜黄素评分=(70/最大姜黄素含量)姜黄素含量；综合评分=浸膏得率评分姜黄素评分从上述结果可得,采用乙醇温浸提取法提取得到的姜黄素含量最高,同时该法操作简单,稳定可行。6 / 63 讨论现代药理研究表明,姜黄素具有抗炎、抗病毒、抗真菌微生物、抗肿瘤、抗氧化、清除自由基、抗衰老、降血脂、保护心肌、抑制血管重构和抗动脉粥样硬化、抗胆结石、保护肝肾、保护皮肤及抗抑郁等药理作用。同时,姜黄素还是经联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)认可的安全性很高的天