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文档简介

血液病的流式细胞术分析 华西医院临检血液室蒋能刚 1 流式细胞术在血液病中的应用 急性白血病免疫分型淋巴细胞增殖性疾病免疫分型骨髓增生异常综合征辅助诊断微小残留白血病ZAP70 P糖蛋白等预后指标检测PNH CD55 CD59 细胞周期分析CD34 细胞绝对计数 2 标本种类 外周血骨髓胸腹水脑脊液淋巴结细针穿刺液活检组织 3 标本要求 室温或2 4 72h内骨髓 急性白血病 MDS MM外周血 CD55 CD59 LGL 4 标本前处理 离心收集细胞 胸腹水 脑脊液 或制备细胞悬液 活检组织 了解标本中细胞组成 瑞氏染色 台盼蓝染色 5 6 细胞浓度调整 7 一般处理步骤胞膜抗原 标记 溶血 洗涤胞浆抗原 标记 溶血 固定 破膜 标记 洗涤免疫球蛋白 溶血 洗涤 标记 洗涤 8 设门方案SSC FSCCD45CD19 CD20CD3 CD5 9 10 光散射特征与细胞形态的关系 11 正常骨髓 淋巴 单核 粒细胞 CD45 SSC 原始 嗜碱 嗜酸 Blastwindows 12 抗体设置 髓系一般标志 CD13 CD33 CD117 MPO其他标记 CD14 CD64 CD4CD71 GlyACD61 CD41CD36其他非髓系标记 CD2 CD5 CD7 CD56 CD19 13 骨髓增生异常综合症 MDS 主要表现为粒系及单核系抗原表达异常正确的结果解释有赖于良好的质量控制和标本细胞活性 14 15 B淋巴细胞 确定克隆性阶段性B细胞标记物 CD5 CD10 CD20 CD22 CD23 FMC7其他标记物 CD11c CD25 CD103 CD38 16 17 T NK细胞 抗原表达缺失和强度变化T淋巴细胞 CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8NK细胞 CD16 CD56 18 benign Malignant 19 结果分析 分析的重点在于确定每一个细胞标记的存在与否以及表达的强弱 模式识别 每个抗体在阳性细胞上的表达百分率并不重要 以残存正常细胞 如正常成熟淋巴细胞 作为分析参照物 结合细胞形态可事半功倍 20 AML M1 AML M2 AML M3 AML M4 M5 21 AML M6 非造血细胞 非特异性染色 死亡细胞 ALL 22 血小板附着于原始粒细胞所致CD61阳性拖尾 巨核细胞白血病 23 24 25 26 27 28 微小残留白血病 灵敏度为1 1000 1 10000以初诊时免疫表型作为设置抗体组合的依据排除非
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