抗D说明书.doc

。生产厂家：英国Millipore (UK)Limited中国大陆地区总代理上海博力医学生物科贸有限公司产品简介：抗D（IgM+IgG）血型定型试剂直接凝集法可识别D，弱D和不完全D间接抗人球蛋白实验可识别DVI。效价达1：256，IgM克隆号Th-28，IgG克隆号MS-26，该产品已通过0.2微米的过滤膜过滤，并在胰蛋白酶大豆琼脂中培养3至6天和在沙氏葡萄糖琼脂中培养5至7天后通过一个生物负荷测试1个细菌群落每毫升（CFU/ml）HIV、HCV、HBsAg、EBV、MAP病毒检测阴性，有效期3年。注册证号：国食药监械（进）字2010第3403117号使用此产品的临床意义：抗D （IgM） 不与DVI细胞反应，不能检测DVI （弱D）；抗D （IgM+IgG） 中的 IgG能与DVI细胞反应，能检测DVI （弱D）。该产品应用于玻片法、室温盐水试管法、微孔板法和间接抗人球蛋白法检测人红细胞中的D抗原。产品的预期应用项目和使用量：Rh 血型定型试剂；检验方法：玻片法、室温盐水试管法、间接抗人球蛋白实验（用于弱D样本的检测）、微孔板法；使用量：根据实验室实验方法的不同而定。详细请看下面：抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）操作规程【产品名称】通用名称：抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）英文名称：Anti-D Blood Grouping Reagent (Monoclonal Human IgM/IgG Blend)【包装规格】10mL/瓶，10瓶/盒。【预期用途】该产品应用于玻片法、室温盐水试管法、微孔板法和间接抗人球蛋白法检测人红细胞中的D抗原。红细胞RhD亚型系统最早是由Levine和Stetson在1939年提出来的。RhD阴性的人在接受RhD阳性血液输血或者孕有RhD阳性的胎儿时，会产生抗-D抗体，从而导致严重的新生儿溶血症或输血性溶血反应。“弱D型”通常用来表述RhD抗原数目偏少的红细胞；“部分D型”通常用来表述缺乏部分RhD抗原表位的红细胞；“DVI”属于“部分D型”的范畴。按照国家相关要求，在献血和输血前必须对红细胞上的D抗原进行检测。该试剂中IgM抗D不与DVI细胞反应，不能检测出DVI，IgG抗D与DVI细胞反应，能检测出DVI。根据中国临床输血的相关规定，该产品用于供血样本的检测，如果结果阴性，需进一步做间接抗人球蛋白实验，以确定弱D的存在；该产品用于临床受血样本检测，如果结果阴性，则不需要进一步做间接抗人球蛋白实验。【检验原理】抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）含有细胞株TH-28（IgM性质）和MS-26（IgG性质）分泌的抗体。该试剂可与携带D抗原的红细胞发生凝集反应，与不携带D抗原的红细胞不发生凝集反应。【主要组成成份】抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）是由人源化单克隆IgM抗D(TH-28细胞系)和人源化单克隆IgG抗D(MS-26细胞系)混合，用含大分子化学增强剂的缓冲液中制备得来。该试剂包含0.1%（w/v）叠氮钠和牛血清白蛋白。【储存条件及有效期】28保存。有效期三年。若不能按照正确温度贮存该试剂，可能会加速试剂活性降低。【样本要求】血样采集之前，不需要对受血者或供血者进行特殊处理。血样采集应按照符合临床输血技术规范、中国输血技术操作规程的采血法采集。推荐使用EDTA、CPDA、或者ACD抗凝的血液样本。新鲜采集的血样应尽快检测。EDTA抗凝红细胞标本应该在14天内完成检测；CPDA或者ACD抗凝的红细胞样本必须在失效之前完成检测。如不能及时检测，红细胞样本必须贮存于28。出现溶血、污染的血样不能用于检测。【检验方法】1. 玻片法1.1 用自身血清、血浆或生理盐水制备35%50%的待测红细胞悬液。1.2 取标记清晰的洁净载玻片，向其表面添加一滴抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）。1.3 再向载玻片表面添加一滴35%50%的待测红细胞悬液。1.4 持续地、轻柔地上下倾斜载玻片，使待测红细胞悬液与该试剂在约2cm直径的范围内充分混匀2分钟。1.5 肉眼观察载玻片上是否出现红细胞凝集。注意避免将干涸红细胞误认为红细胞凝集。1.6 记录结果。1.7 没有出现红细胞凝集可判读为阴性。注意：对于玻片法检测结果为阴性的血液样本，需用室温盐水试管法复核。2. 室温盐水试管法2.1 用生理盐水配制3%5%的待测红细胞悬液。2.2 取标记清晰的洁净试管，加入两滴抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）。2.3 再向试管中加入一滴3%5%的待测红细胞悬液。2.4 充分混匀试管中的内容物。2.5 9001000g 离心15秒。2.6 轻摇试管，轻轻重悬红细胞，肉眼观察试管底部是否出现凝集。2.7 记录结果3. 间接抗人球蛋白实验（用于弱D样本的检测）3.1 用生理盐水配制3%5%的待测红细胞悬液。3.2 取标记清晰的洁净试管，加入两滴抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）。3.3 再向试管中加入一滴3%5%的待测红细胞溶液。3.4 充分混匀后，37孵育30分钟。3.5 生理盐水洗涤红细胞三次。3.6 末次洗涤后控干盐水。3.7 向试管中加入两滴抗人球蛋白试剂，并充分混匀。3.8 9001000g离心15秒钟。3.9 轻摇试管，轻轻重悬红细胞，肉眼观察试管底部是否出现凝集。3.10记录结果4. 微孔板法4.1 用生理盐水配制3%5%的待测红细胞悬液。4.2 取U型微孔板，向指定的微孔中加入一滴抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）。4.3 再向微孔中加入一滴3%5%待测红细胞溶液。4.4 使用微孔板振荡器或者手动以混匀微孔中的内容物。4.5 室温孵育15-20分钟。4.6 100g 离心40秒钟。4.7 使用微孔板振荡器（如步骤4.4）轻轻重悬红细胞。4.8 肉眼观察微孔底部是否出现凝集。如使用仪器判读结果，用户需首先对仪器进行认证。【检验结果的解释】实验方法临床受血样本供血样本阳性阴性阳性阴性玻片法红细胞发生凝集；表明红细胞表面含有相应D抗原。红细胞不发生凝集；建议室温盐水试管法复核红细胞发生凝集；表明红细胞表面含有相应D抗原。红细胞不发生凝集；建议室温盐水试管法复核室温盐水试管法红细胞发生凝集；表明红细胞表面含有相应D抗原。红细胞不发生凝集；不进行间接抗人球蛋白法检测红细胞发生凝集；表明红细胞表面含有相应D抗原。红细胞不发生凝集；进行间接抗人球蛋白法检测进一步确认是否存在弱D抗原。微孔板法红细胞发生凝集；表明红细胞表面含有相应D抗原。红细胞不发生凝集；红细胞发生凝集；表明红细胞表面含有相应D抗原。红细胞不发生凝集；间接抗人球蛋白法不适用红细胞发生凝集，表明红细胞表面存在D抗原。红细胞不发生凝集，表明红细胞表面不存在D抗原。【检验方法的局限性】1. 直接抗人球蛋白试验（DAT）阳性的红细胞样本可能产生假阳性结果。我们推荐使用Millipore公司生产的单克隆对照试剂（产品编号TT）来检测这些可能的假阳性结果。2. 硬质聚苯乙烯材料的微孔板比PVC材料的微孔板更适合检测用。用户按照自己的质量体系对每一批微孔板进行评价，合格后方可用于检测。3. 检测材料受到污染、未按照说明书的内容进行操作都可能引起假阳性或假阴性结果。【产品性能指标】抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体），产品编码BM，已经在献血者、临床以及新生儿的血液样本中进行了试管法、玻片法以及微孔板法的检测。这些血液样本EDAT、CPDA或ACD抗凝。血液样本总体包括所有主要的RhD显型。检测总数（n），敏感度和特异性结果如下表所示：方法抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）产品编码BMn灵敏度%n特异性%试管法226199.61016100微孔板法1765799.910228100玻片法474100154100检测灵敏度的定义：在检测目标存在时检测出现阳性结果的可能性。检测特异性的定义：在检测目标不存在时检测出现阴性结果的可能性。【注意事项】1. 所有血液产品均应视为潜在感染源。该试剂所用的献血者或细胞株下列检测都为阴性：HIV，HCV，HbsAg，EBV及MAP病毒。但是，目前尚无检测方法能够保证人血源产品没有任何感染源。因此建议用户在使用该产品时注意防护。2. 该试剂含有叠氮钠（0.1%，w/v）。叠氮钠吸入体内有毒。因此切勿摄入该试剂。叠氮钠能与含铅或铜的管道发生反应而生成易爆的金属叠氮化物。处理时用大量清水冲洗。3. 该试剂为澄清液体。出现浑浊表明本试剂可能受到细菌污染或者变质。若出现沉淀物、纤维素凝胶或颗粒，应禁止使用该试剂。4. 该试剂只可用于体外诊断。5. 该试剂所用的牛血清白蛋白来源于USDA批准的产地，没有传播性海绵状脑病（TSEs）。6. 处理该试剂时，可使用合适浓度的消毒剂浸泡过夜或高压灭菌。7. 每一批检测应同时进行阴性和阳性质控对照，如果对照品没有得到预期的结果，检测结果必须判为无效。8. 试剂质控并非每次实验都需要，只有在待检病人有已知自身抗体或蛋白异常时才推荐使用试剂质控。9. 该试剂已针对使用说明书中所推荐的方法的适用性进行了充分论证。在其他方法上的适用性必须要由使用者自行论证。10. 若该试剂分析性能发生改变或包装有破损，请与本公司质管部联系。11. 在