中图版选修一 DNA片段的扩增——PCR技术 作业 (2).docx

dna片段的扩增pcr技术一、单选题1以下为形成cdna过程和pcr扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（ ）a. 催化过程的酶是rna聚合酶b. 过程发生的变化是引物与单链dna结合c. 催化过程的酶都是耐高温的dna聚合酶d. 过程需要高温和atp供能才能完成【答案】b【解析】是由rna形成单链dna的过程，为逆转录过程；是以单链dna合成双链dna的过程，是dna分子复制过程；是多聚酶链式反应扩增dna片段，是变性、是复性、是延伸阶段。a. 为逆转录过程，该过程需要逆转录酶催化，a错误；b. 为复性过程，发生的变化是引物与单链dna链结合形成局部双链，b正确；c. 催化过程（dna复制）的酶是dna聚合酶，催化过程（dna单链延伸）的酶是耐高温dna聚合酶（taq酶），过程进行的温度是70，因此催化过程的dna聚合酶耐高温，而催化过程的dna聚合酶不耐高温，c错误；d. 过程为dna双链打开的过程，在体外是在高温下进行的，不需要atp供能，d错误。考点：pcr技术的基本操作和应用2下列关于pcr技术的叙述，正确的是()a. pcr技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上b. 该技术需要解旋酶和热稳定的dna聚合酶c. 该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的d. 该技术应用体内dna双链复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件【答案】d【解析】pcr技术建立在对扩增的目的基因序列已知的基础上，但不需要完全已知，只要知道部分核苷酸序列即可合成引物，a错误；pcr技术不需要解旋酶，通过高温使氢键断裂，b错误；该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列不能互补配对，否则引物之间就会相互结合，c错误；该技术应用体内dna双链复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件，d正确。3以下为形成cdna过程和pcr扩增过程示意图据图分析，下列说法正确的是a. 催化过程的酶都是dna聚合酶，都能耐高温b. 催化过程的酶是rna聚合酶c. 过程发生的变化是引物与单链dna结合d. 如果rna单链中a与u之和占该链碱基含量的40%，则一个双链dna中，a与u之和也占该dna碱基含量的40%【答案】c【解析】图中过程为dna复制，这两个过程都需要dna聚合酶的催化，其中过程进行的温度是7075，因此催化该过程的dna聚合酶能酶耐高温，但催化过程的酶不耐高温，a错误；为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化，b错误；为复性过程，发生的变化是引物与互补dna链结合，c正确；根据碱基互补原则a-t，u-a，如果rna单链中a与u之和占该链碱基含量的40%，则一个双链dna中，a与t之和也占该dna碱基含量的40%，而dna分子中不含碱基u，d错误。【点睛】本题结合图解，考查基因工程、中心法则及其发展、dna分子结构的主要特点、dna分子复制等知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节；识记dna分子复制的条件和dna分子结构的主要特点，掌握碱基互补配对原则的应用，能正确分析题图，再结合图中信息准确答题。4下列有关生物工程与技术的叙述不正确的是apcr技术可用于目的基因的获取b选择单核居中期向单核靠边期过渡的花粉进行离体培养成功率高c在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落一定是尿素分解菌d“三北防护林”建设中，应遵循协调与平衡原理和物种多样性原理【答案】c【解析】试题分析：pcr可以用于外源目的基因的大量扩增，故a正确。在花粉选择进行离体培养时应选择单核靠边期的成功率高，故b正确。在以尿素为唯一碳源的培养基上长出的菌落有可能是尿素分解菌也有可能是以氮气为主的细菌，还要加入酚红指示剂进行鉴别，故c错误。“三北防护林”建设中，应遵循协调与平衡和物种多样性原理，故d正确。考点：本题考查现代生物技术相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。5下列有关pcr过程的叙述中不正确的是a变性过程中破坏的是dna分子内碱基对之间的氢键b复性过程中引物与dna模板链的结合是依靠碱基互补配对完成的cpcr与细胞内dna复制相比所需要酶的最适温度较高d延伸过程中需要dna聚合酶、atp、四种核糖核苷酸【答案】d【解析】延伸过程中需要耐高温的dna聚合酶、atp、四种脱氧核苷酸。故选d 【考点定位】pcr过程6dna粗提取实验中，应尽可能避免dna断裂和降解。相关操作正确的是（ ）a. 以菜花为材料进行研磨时，可以适当加热以促进dna溶解b. 向dna溶液中迅速加入蒸馏水，使dna快速析出c. 将丝状物溶解到2 moll-1nacl溶液中后，加水析出d. 向dna溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌【答案】d【解析】以菜花为材料进行研磨时，可以加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液，a项错误；为避免dna断裂，加入蒸馏水要缓慢，b项错误；将丝状物溶解到2 moll-1nacl溶液中后，加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为95%的酒精溶液，静置23min，以析出含杂质较少的dna，c项错误；为避免dna断裂和降解，要向dna溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌，d项正确。【考点定位】dna的粗提取与鉴定【名师点睛】dna的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”加蒸馏水2次加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到含dna的2 mol/l的nacl溶液中，使nacl溶液的物质的量浓度下降到0.14 mol/l，使dna析出用纱布过滤3次过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液；滤取0.14 mol/l的nacl溶液中析出的dna(黏稠物)；过滤溶有dna的2 mol/l的nacl溶液用nacl溶液4次加2 mol/l的nacl溶液，溶解提取的细胞核物质；用0.14 mol/l的nacl溶液使dna析出；用2 mol/l的nacl溶液，溶解滤取的dna黏稠物；用2 mol/l的nacl溶液，溶解丝状物用于鉴定dna7下列实验材料、试剂等，不必放入冰箱的是a. 层析光合色素后的滤纸 b. 长期保存得到的菌种c. 用于粗提取dna的酒精 d. 保存pcr所需的taq酶【答案】a【解析】a. 层析光合色素后的滤纸不必放入冰箱，a符合题意；b. 长期保存得到的菌种需要放在低温条件下保持，b不符合题意；c. 用于粗提取dna的酒精是冷却的，c不符合题意；d. 保存pcr所需的taq酶，酶的保存需要低温条件，d不符合题意。故选a。8下列关于生物学实验研究方法和原理等叙述中错误的是a提取组织dna是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异b配制以尿素为唯一氮源的培养基为选择性培养基，可筛选出尿素分解细菌 c叶绿体中色素提取的原理是：各种色素在层析液中溶解度不同dpcr呈指数扩增dna片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应模板【答案】c【解析】试题分析：dna提取的原理之一是：利用dna在nacl溶液浓度0.14 mol/l时溶解度最小，2 mol/l nacl溶液中溶解度最大，a错误；配制以尿素为唯一氮源的培养基为选择性培养基，可筛选出尿素分解细菌，b正确；叶绿体中色素分离的原理是：各种色素在层析液中溶解度不同，c错误；pcr扩增dna片段过程中，上一轮反应产物可作为下一轮反应模板，d正确。考点：本题考查生物学实验研究方法和原理的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。9下列关于dna分子复制的叙述中，正确的是（ ）a. dna分子在解旋酶的作用下水解成脱氧核苷酸b. 在复制过程中，解旋和复制是同时进行的c. 解旋后以一条母链为模板合成两条新的子链d. 两条新的子链通过氢键形成一个新的dna分子【答案】b【解析】试题分析：a解旋酶的作用是使dna分子解旋，打开双链，a错误；bdna分子复制是边解旋边复制的，b正确；c解旋后以一条母链为模板按照碱基互补配对原则合成一条子链，c错误；ddna分子复制后，每个dna分子都各含有一条母链和一条子链，d正确。考点：dna分子的复制10下列属于pcr技术的条件的是（ ） 单链的脱氧核苷酸序列引物 目的基因所在的dna片段 脱氧核苷酸 核糖核苷酸 dna连接酶 dna聚合酶 限制酶a. b. c. d. 【答案】b【解析】试题分析：pcr需要一对引物，即一对单链的脱氧核苷酸序列引物，正确；pcr需要模板，即目的基因所在的dna片段，正确；需要脱氧核苷酸作为原料，正确；核糖核苷酸是合成rna的原料，而pcr合成的是dna，错误；采用pcr合成dna时，不需要dna连接酶，错误；体外合成dna时，需要dna聚合酶，正确；体外合成dna时，不需要限制性内切酶，错误考点：基因工程的原理及技术1111pcr实验中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是( )。a. 反复洗涤 b. 用酒精擦洗c. 高压灭菌 d. 在20 储存【答案】c【解析】为了避免外源dna等因素的污染，pcr实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。pcr所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在20 储存。使用前，将所需的试剂从冰箱内拿出，放在冰块上缓慢融化。12对下列实验操作与实验目的的分析，错误的是a. 提取绿叶中的色素时加入碳酸钙以防止色素被破坏b. 观察细胞中dna和rna分布用盐酸形成酸性环境c. 凝胶色谱法分离蛋白质加入缓冲液以维持ph稳定d. 萃取胡萝卜素采用水浴加热的方式以防止温度过高【答案】b【解析】碳酸钙以防止色素被破坏，a正确。盐酸的作用是改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，b错误。缓冲液可维持ph稳定，c正确。水浴加热可防止温度过高，d正确。【考点定位】实验的操作及目的13引物的作用是（ ）a.打开d.na.双链b.催化合成d.na.子链c.提供模板d.使d.na.聚合酶能够从引物的3端开始复制【答案】d【解析】试题分析：pcr技术的原理是d.na.复制，而d.na.的复制需要引物，其主要原因是d.na.聚合酶只能从3端延伸d.na.链。因此，引物的作用是使d.na.聚合酶能够从引物的3端开始复制。考点：本题考查pcr技术相关知识，意在考查考生识记所列知识点的能力。14下列有关pcr反应的叙述正确的是( )。a. pcr反应所需要的引物只是rnab. pcr反应所需要的材料是核糖核苷酸c. pcr反应所需要的酶在60会变性d. pcr反应需要在一定的缓冲溶液中进行【答案】d【解析】pcr反应需要的引物是dna或rna，反应所需要的材料是脱氧核苷酸，pcr所需要的酶是耐高温的，在60 不会变性。15将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（ ）a.无色透明的甲苯层 b.脂溶性物质的沉淀层c.血红蛋白的水溶液 d.其他杂质的暗红色沉淀物【答案】c【解析】试题分析：第1层是无色透明的甲苯层，第2层是白色薄层固体，是脂溶性物质的沉淀层，第3层是红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物，故c正确。考点：本题考查血红蛋白的提取和分离相关知识，意在考察考生对知识点的识记掌握程度。16关于dna的粗提取与鉴定实验的表述哪项是错误的（ ）a离心沉淀的血细胞中加水是为了提取dnab氯化钠溶液的物质的量浓度为2mol/l时，dna溶解c向溶解dna的烧杯中加蒸馏水是漂洗dnad离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质【答案】c【解析】试题分析：dna在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠浓度的变化而变化的当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/l时dna的溶解度最低利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的dna析出dna不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的dnadna遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定dna的试剂解：a、离心沉淀的血细胞中加水是为了使血细胞破裂释放dna，从而提取dna，a正确；b、氯化钠溶液的物质的量浓度为2mol/l时，dna溶解，b正确；c、向溶解dna的烧杯中加蒸馏水是为了降低氯化钠溶液的浓度，从而是dna析出，c错误；d、离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质，d正确故选：c考点：dna的粗提取和鉴定17以下为形成cdna过程和pcr扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（ ）a. 催化过程的酶是dna聚合酶b. 过程发生的变化是引物与单链dna结合c. 催化过程的酶都必须能耐高温d. 过程需要解旋酶【答案】b【解析】分析题图：图示为形成cdna过程和pcr扩增过程示意图，其中是由rna形成单链dna的过程，为逆转录过程；是以单链dna合成双链dna的过程，是dna分子复制过程；催化过程的酶都必须能耐高温；是多聚酶链式反应扩增dna片段，其中是变性、是复性、是延伸阶段。加热使dna变性，不需要解旋酶。18甲、乙两图为“dna的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正确的（ ）a. 图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为nacl溶液，但两者浓度不同b. 图乙试管经少许加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝，另一支试管中的溶液不变蓝c. 图甲操作需用玻棒迅速搅拌以使dna成为絮状沉淀并缠绕在玻棒上d. 图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果【答案】d【解析】试题分析：a、图甲的烧杯中所用的溶液是体积分数为95%的冷却酒精，a错误；b、图乙试管经沸水浴后即可观察到一支试管中的溶液（含有dna）明显变蓝，另一支试管中的溶液（不含dna）不变蓝，b错误；c、图甲操作需用玻棒沿一个方向缓慢搅拌以使卷起丝状dna，c错误；d、图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果，d正确。考点：本题主要考查dna的粗提取和鉴定相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。19聚合酶链式反应（pcr）是一种体外迅速扩增dna片段的技术。下列有关pcr过程的叙述中不正确的是a. 变性过程中破坏的是dna分子内碱基对之间的氢键b. pcr与细胞内dna复制相比所需酶的最适温度较高c. 延伸过程中需要dna聚合酶、atp、四种核糖核苷酸d. 复性过程中引物与dna模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成【答案】c【解析】变性过程中dna分子内碱基对之间的氢键打开，a项正确；pcr需要taq酶（热稳定dna聚合酶）的参与，b项正确；延伸过程中需要热稳定dna聚合酶、datp等四种原料，c项错误；复性过程中引物与dna模板链依靠碱基互补配对原则结合，d项正确。20利用pcr技术扩增目的基因，其原理与细胞内dna复制类似（如下图所示）。图中引物为单链dna片段，它是子链合成延伸的基础。以下叙述错误的是a. 由原来的母链为模板合成的两个新dna分子中，只含有引物a或引物bb. 推测第四轮循环产物中含有引物a的dna片段所占的比例为1/8c. 变性过程中被切断的是dna分子内碱基对之间的氢键d. pcr与细胞内dna复制相比所需酶的最适温度较高【答案】b【解析】两种引物分别和两条单链结合，由原来的母链为模板合成的两个新dna分子中，只含有引物a或引物b，a项正确；第四轮循环产物共有16个dna分子，32条单链，其中2条是原模板dna的2条链，不含引物，剩余30条单链一半含引物a，一半含引物b，所以含a的单链=302=15个，其中含有引物a的dna片段所占的比例为15/16，b项错误；变性过程中被切断的是dna分子内碱基对之间的氢键，c项正确；pcr在细胞外进行，通过高温使dna解旋，需要耐高温的dna聚合酶，d项正确。21下列有关pcr技术的叙述正确的是（ ）a作为模板的dna序列必须不断的加进每一次的扩增当中b作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中c反应需要的dna聚合酶必须不断的加进反应当中d反应需要的dna连接酶必须不断的加进反应当中【答案】b【解析】试题分析：模板dna只需加入一次，a项错误；引物在合成中不断被利用，需不断加入，b项正确；dna聚合酶可反复使用，c项错误；dna连接酶也可反复使用，d项错误。考点：本题考查多聚酶链式反应扩增dna片段的相关知识，意在考查学生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。22下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是（ ）a. taq酶是用pcr仪对dna分子扩增过程中常用的一种耐高温的dna聚合酶b. 限制性核酸内切酶将一个dna分子片段切成两个片段需消耗一个水分子c. t4dna连接酶只能连接dna片段的黏性末端d. 纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，便于植物杂交育种【答案】a【解析】taq酶是用pcr仪对dna分子扩增过程中常用的一种耐高温的dna聚合酶，a正确；限制性核酸内切酶将一个dna分子片段切成两个片段，即断裂两个磷酸二酯键，因此需消耗两个水分子，b错误；t4dna连接酶可以连接有平末端的dna片段，也能连接黏性末端的dna片段，c错误；细胞壁的成分是纤维素和果胶，因此植物体细胞杂交过程中利用纤维素酶或果胶酶水解细胞壁获得原生质体，但植物杂交育种时不需要纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，d错误。【点睛】解答c选项，要注意ecoli dna连接酶与t4dna连接酶的区别，ecoli dna连接酶只能连接黏性末端的dna片段，t4dna连接酶可以连接有平末端和黏性末端的dna片段。23pcr技术中下列说法错误的有几项（ ）复性的目的是使原来分开的dna的两条单链重新连接成双链pcr技术是扩增完整的dna分子dna聚合酶不能从头开始合成dna，只能从5端延伸dna链dna引物在细胞外可在dna聚合酶的作用下合成a有一项 b有二项 c有三项 d有四项【答案】d【解析】试题分析：pcr 全称为聚合酶链式反应，pcr 技术是一项在生物体外复制特定dna的核酸合成技术，原理是dna复制，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，条件还包括模板dna、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定dna聚合酶（taq酶），具体过程有高温变性：dna解旋过程；低温复性：引物结合到互补链dna上；中温延伸：合成子链pcr扩增中双链dna解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。考点：本题主要考查pcr的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。24可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有制备较纯净的细胞膜运用差速离心法分离各种细胞器dna的粗提取分离并纯化血红蛋白制成细胞悬浮液进行细胞培养a bc d【答案】c【解析】试题分析：哺乳动物成熟的红细胞无细胞核、细胞器等结构，可用于制备较纯净的细胞膜，分离并纯化血红蛋白，c正确。考点：本题考查实验的相关操作。25将粗提取的dna丝状物分别加入0.14mol/lnacl溶液、2mol/lnacl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液p、q、r以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含dna少可以丢弃的是（）a. p、q、r b. p、q、r c. p、q、r d. p、q、r【答案】d【解析】将粗提取的dna丝状物加入0.14mol/l的nacl溶液中，此时dna的溶解度最低，过滤后dna主要存在于纱布上的粘稠物p中，滤液p含有dna极少，可以丢弃；将粗提取的dna丝状物加入2mol/lnacl溶液中，此时dna溶解度较大，过滤后,dna主要存在于滤液q中，纱布上的粘稠物q中dna含量较少，可以丢弃；将粗提取的dna丝状物加入体积分数为95%的酒精溶液中，dna在酒精中的溶解度很低，过滤后dna主要存在于纱布上的粘稠物q中，滤液r中dna含量很少，可以丢弃；所以d选项正确。【点睛】dna粗提取的原理：(1)dna在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/l时，dna的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的dna析出。(2)dna不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液，利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的dna。26如图为“dna粗提取和鉴定实验的相关操作，这些操作目的正确的是a. 是洗涤红细胞，去除血细胞表面的杂质b. 是溶解dna，去除不溶于酒精的杂质c. 溶解dna，去除不溶于2mol/lnacl溶液的杂质d. 稀释nacl溶液，去除不溶于低浓度nacl溶液的杂质【答案】c【解析】试题分析：操作是向鸡血细胞液中加入蒸馏水，使血细胞吸水涨破，同时用玻璃棒搅拌加速细胞的破裂，a项错误；由于dna不能溶于酒精，而蛋白质等其它杂质能溶于酒精，因此操作去除溶于酒精的杂质，提纯dna，b项错误；由于dna在2mol/l nacl溶液中溶解度最大，所以能除去在高浓度盐溶液中不能溶解的杂质，c项正确；稀释nacl溶液，由于在低浓度的盐溶液中dna的溶解度较低，因此利用低浓度的盐溶液使dna析出，去除溶于低浓度nacl溶液的杂质，d项错误。考点：dna的粗提取与鉴定实验【名师点睛】dna的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”加蒸馏水2次加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到含dna的2 mol/l的nacl溶液中，使nacl溶液的物质的量浓度下降到014 mol/l，使dna析出用纱布过滤3次过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液；滤取014 mol/l的nacl溶液中析出的dna（黏稠物）；过滤溶有dna的2 mol/l的nacl溶液用nacl溶液4次加2 mol/l的nacl溶液，溶解提取的细胞核物质；用014 mol/l的nacl溶液使dna析出；用2 mol/l的nacl溶液，溶解滤取的dna黏稠物；用2 mol/l的nacl溶液，溶解丝状物用于鉴定dna27在进行基因工程时，已经得到一个目的基因，要人工复制，使数量增多，需要的复制条件是( )。ctagggc或gatcccg模板链 含a、u、c、g碱基的核苷酸 含a、t、c、g碱基的核苷酸 核糖 脱氧核糖 酶 atp 磷酸 蛋白质a bc d【答案】d【解析】dna复制需要模板、原料、能量和酶等基本条件。28在dna的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是( )a. 稀释血液、冲洗样品 b. 使血细胞破裂、降低nacl浓度使dna析出c. 使血细胞破裂、增大dna溶解量 d. 使血细胞破裂、提取含杂质较少的dna【答案】b【解析】试题分析：在dna粗提取的实验中，先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是使血细胞吸水涨破，释放dna；降低nacl浓度，使dna析出，故选：b。考点：本题主要考查dna的粗提取实验相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。29图1、2 分别为“dna 的粗提取与鉴定实验中部分操作步骤示意图,下列叙述不正确的是（ ）a.图2 中加入蒸馏水的目的是增大dna的溶解度b.图1 中完成过滤之后保留滤液c.图2 中完成过滤之后弃去滤液d.在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质【答案】a【解析】试题分析：dna在0.14mol/l的nacl溶液中溶解度最小，图2 中加入蒸馏水的目的是降低dna的溶解度，a错误；图1中完成过滤之后保留滤液，因为滤液中含有要提取的dna，b正确；图2中完成过滤之后弃去滤液，因为粗dna附着在玻璃棒上，c正确；在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质，因为嫩肉粉中含蛋白酶能分解蛋白质，d正确。考点：本题考查“dna的粗提取和鉴定”实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。30在混合物中提取dna分子的基本思路是a根据各种大分子的理化性质的差异b根据各种大分子的理化性质的共性c根据各种大分子在细胞内的功能d根据各种大分子的结构和在细胞内的位置【答案】a【解析】在混合物中提取dna分子的基本思路是根据各种大分子的理化性质的差异，a正确。【考点定位】dna的粗提取二、非选择题31i农作物秸秆在生产实践中具有多种用途。在特定微生物产生的纤维素酶的催化下，秸秆中的纤维素可被分解为葡萄糖，经发酵后形成乙醇，再加工即可制成燃料乙醇，减少了人类生活对石油资源的依赖。请分析回答：（1）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用_法或_法进行接种，所用培养基以纤维素为唯一碳源。目的是只允许能产生_的微生物生长，而其它微生物均不能生长。在培养基中加入适量的刚果红染料，若观察到_即可初步筛选到目的菌。（2）利用_试剂检测产物中的葡萄糖。 “夫树橘柚者，食之则甘，嗅之则香”，每年10月，正是柑橘大量上市的季节。橘子全身都是宝：不仅果肉的营养价值高，而且药用价值也较高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”。请回答下列相关问题：（1）江西某橘子盛产地想建立一个大型的果酒、果醋加工厂，发酵阶段，两者控制条件的区别是_。需要发酵的菌种是_。（2）橘皮精油是食品和化妆品配料的优质原料，提取橘皮精油常用_法，为了使橘皮油易于与水分离，还要加入_和_，并调节ph到78。【答案】 稀释涂布平板 平板划线 纤维素酶 菌落周围出现透明圈 斐林 前者无氧，后者有氧 酵母菌、醋酸杆菌 压榨法 nahco3 na2so4【解析】试题分析：稀释涂布平板法和平板划线法接种都能够分离出所需要的微生物；以纤维素为唯一碳源的培养基能筛选出能分泌纤维素酶来分解纤维素的微生物，并用刚果红染料鉴定纤维素是否被降解。婓林试剂可以检测葡萄糖。酵母菌用于生产果酒，醋酸杆菌用于制果醋，生产果酒时需要无氧条件，制备果醋时需要有氧条件。提取橘皮精油常用压榨法，为了使橘皮油易于与水分离，还要加入nahco3和na2so4，并调节ph到78。考点：本题考查微生物培养、传统的发酵技术和从生物材料中提取某些特定的成分，意在考查考生能理解所学知识的要点。32科学家通过利用pcr定点突变技术改造rubisco酶基因，提高了光合作用过程中rubiaco酶对c02的亲和力,从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：（1）pcr过程所依据的原理是_，利用pcr技术扩增目的基因的前提是要有段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序对合成_；扩增过程需要加入_酶。（2）启动子是一段有特殊结构的dna片段，其作用是_。目的基因能在不同生物体内正常表达原来的蛋白质质,说明整个生物界_。pcr定点突变技术属于_的范畴。（3）可利用定点突变的dna构建基因表达载体，常用_将基因表达载体导入植物细胞,还需用到植物细胞工程中的_技术,才能最终获得转基因植物。【答案】dna双链复制引物耐高温的dna聚合酶（或taq酶）rna聚合酶识别和结合部位，驱动转录出mrna共用一套密码子蛋白质工程农杆菌转化法植物组织培养【解析】（1）pcr的原理是dna双链复制；利用pcr技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物；扩增过程是在较高温度下进行的，因此需要加入耐高温的dna聚合酶（或taq酶）；（2）启动子是rna聚合酶识别和结合部位，驱动转录出mrna目的基因能在不同生物体内正常表达原来的蛋白质，说明整个生物界共用一套密码子pcr定点突变技术属于蛋白质工程的范畴；（3）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；将转基因植物细胞培育成转基因植株还需要采用植物组织培养技术。【点睛】pcr技术：（1）概念：pcr全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定dna的核酸合成技术；（2）原理：dna复制；（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；（4）条件：模板dna、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定dna聚合酶（taq酶）（5）过程：高温变性：dna解旋过程（pcr扩增中双链dna解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链dna上；中温延伸：合成子链。33生物组织中存在多种有机物，不同的有机物其提取与鉴定方法不尽相同。根据所学知识，请回答下列问题。（1）玫瑰精油素有“软黄金”之称，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是水蒸气蒸馏法，将鲜玫瑰花瓣和清水进行水蒸气蒸馏后收集到的产物是_，需加入一定量的氯化钠使其分层，玫瑰精油将分布于液体的_层，用分液漏斗分离的油层中还需要加入_以除去水分。玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用 技术实现玫瑰的快速繁殖。（2）去年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，使橘农遭受到了很大的损失，有人提出了提取橘皮精油获取利润的建议。橘皮精油是食品、化妆品和香水配料的优质原料，具有很高的经济价值，一般提取橘皮精油的方法是_法，之所以不采取水蒸气蒸馏法的原因是_。（3）用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率主要取决于 ，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对新鲜胡萝卜进行干燥时，要注意控制 ，否则会引起胡萝卜素的分解；提取的胡萝卜素粗品可通过 法进行鉴定，提取萃取过程采用水浴加热，不用明火加热的原因是 。（4）下图是血红蛋白提取过程所需的一个_装置，装置中，b是血红蛋白溶液，则a是_，该装置的目的是去除样品中_ _ _的杂质。【答案】（1）油水混合物；上；无水硫酸钠；植物组织培养（2）压榨 水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解的问题（3）萃取剂的性质和使用量 温度和时间 纸层析 有机溶剂易燃（4）透析 磷酸缓冲液 分子量较小【解析】试题分析：（1）玫瑰精油提取过程中，将鲜玫瑰花瓣和清水进行水蒸气蒸馏后收集到的产物是油水混合物；需加入一定量的氯化钠使其分层，玫瑰精油将分布于液体的上层；用分液漏斗分离的油层中还需要加入无水硫酸钠以除去水分；玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用植物组织培养技术实现玫瑰的快速繁殖。（2）柑橘的果皮中，芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，所以通常采用压榨法提取橘皮精油；由于水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题，所以提取橘皮精油不采取水蒸气蒸馏法。（3）用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对新鲜胡萝卜进行干燥时，要注意控制温度和时间，否则会引起胡萝卜素的分解；提取的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行鉴定，提取萃取过程采用水浴加热，不用明火加热的原因是有机溶剂易燃。（4）题图是血红蛋白提取过程所需的一个透析装置，装置中的b是血红蛋白溶液，则a是磷酸缓冲液，该装置的目的是去除样品中分子量较小的杂质。考点：本题考查生物组织中有机物的提取和分离的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。34【生物选修1：生物技术实践】关于dna粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：（1）鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中 细胞数目较多，可以提供丰富的 。（2）实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是 。（3）生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是 ，这是因为这些动物和人一样，成熟红细胞中 ，但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行，这是因为 。【答案】(1)含细胞核红dna(2)鸡血细胞中dna相对含量高(3)很难提取到dna成熟红细胞中无细胞核肝细胞有细胞核(4)研磨【解析】(1)鸡红细胞中含有成形的完整的细胞核，而且红细胞数量比较多，因而dna量也较丰富。(2)鸡的全血包括血浆和血细胞，血浆中无dna，全血中除去血浆后即是浓缩的血细胞液，dna的相对含量提高了。(3)哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数dna，在实验中很难提取到，但肝细胞含有细胞核，并且肝组织易破坏，有利于dna的提取。(4)若使肝脏组织易分离，将肝脏组织剪碎、研磨是一种简便易行的方法。【考点定位】本题考查dna的粗提取相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。【名师点睛】易错警示 (1)dna粗提取与鉴定实验的易错点本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破放出dna，第二次的目的是稀释nacl溶液，使dna从溶液中析出。35请分析回答下列问题：（1）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染常用的灭菌方法有 灭菌、干热灭菌和 灭菌稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是 土壤取样称取log土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液吸取0.1ml溶液进行平板涂布依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度a bc d（2）利用物理或化学方法将酶固定在一定的空间内，这项技术称为 （3）利用凝胶色谱法， 蛋白质先洗脱出来（4）通过电泳法分离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的 、分子大小和分子形状（5）通过分析发现、dna的复制方向总是从子链的 端向 端延伸【答案】（1）高压蒸汽 灼烧 c（2）固定化酶（3）分子量大的（4）带电性质及带电量（5）5端 3端【解析】试题分析：微生物培养的关键是无菌操作，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和干热灭菌等从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布和筛选菌株蛋白质的分离常用凝胶色谱法解：（1）实验室常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和干热灭菌等稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是土壤取样，称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液，进行梯度稀释，即依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度，涂布和筛选菌株故选：c（2）固定化酶是指利用物理或化学方法将酶固定在一定的空间内的技术（3）利用凝胶色谱法，分子量大的蛋白质经过的路程较短，移动速度较快，会先洗脱出来（4）通过电泳法分离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质及带电量，分子大小和分子形状（5）dna的复制方向总是从子链的5端向3端延伸故答案为：（1）高压蒸汽 灼烧 c（2）固定化酶（3）分子量大的（4）带电性质及带电量（5）5端 3端考点：微生物的分离和培养；蛋白质的提取和分离36【生物选修3：现代生物科技专题】 神经营养因子（ntf）能促进神经元的存活和再生。已知ntf基因能得到克隆。回答下列问题：（1）在体外，可通过pcr技术扩增ntf基因，该技术依据的原理是_。为何保证pcr反应的进行，反应体系需要加入_酶、模板dna、dctp、datp、dgtp、dttp、_等。在打开dna双链时需要_。（2）将外源ntf基因导入受体细胞常用的方法是_，检测其是否已表达，可采用_方法。（3）与转基因工程菌相比，利用真核细胞作为受体得到的ntf才有生物活性，其原因可能是_。【答案】 dna双链复制 taq（热稳定dna聚合） 引物 提高温度（高温9095等合理答案） 显微注射法 抗原抗体杂交法 ntf合成后需要经过内质网、高尔基体的加工才具备生物活性【解析】试题分析：目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的dna是否插入目的基因-dna分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mrna-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。（1）pcr技术依据的原理是dna双链复制为了保证pcr反应的进行，反应体系需要加入耐高温taq（dna聚合）酶、模板dna、dctp、datp、dgtp、dttp、引物等，pcr技术不要加解旋酶，提高温度时，dna双链就能打开。（2）将外源ntf基因导入受体细胞常用的方法是显微注射法，检测目的基因是否翻译成蛋白质即是否表达，可以利用抗原-抗体杂交技术来检测。（3）原核细胞只有核糖体，没有其它细胞器，因此与转基因工程菌（大肠杆菌）相比，利用真核细胞作为受体得到的ntf才有生物活性，原因是ntf合成后需要经过内质网、高尔基体的加工才具备生物活性。37近十年来，pcr技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用dna半保留复制，在试管中进行dna的人工复制(如图)，在很短的时间内，将dna扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)加热使dna双链打开，这一步是打开_键，称为_。(2)当温度降低时，引物与模板_端结合，在dna聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，此过程中原料是_，遵循的原则是_。(3)pcr技术的必要条件，除了模板、原料、atp、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的_和_，前者由pcr仪自动调控，后者则靠_来维持。【答案】(1)氢 高温变性 (2)3 四种脱氧核苷酸 碱基互补配对原则 (3)温度 酸碱度 缓冲液【解析】本题考查体内dna复制与pcr技术的原理以及基本条件。打开dna双链需破坏碱基对间的氢键；引物的游离端为3，即53，它需与模板的3端