实验16 扑热息痛的血药浓度测定.doc

广东药学院 药剂学教研室 张纪兴实验十六 扑热息痛的血药浓度测定一 实验目的通过本实验，初步掌握扑热息痛的血药浓度测定方法及有关参数的计算。二 实验原理扑热息痛与亚硝酸发生亲电取代反应，生成2-亚硝基-4-乙酰氨基苯酚，用氨基磺酸铵除去过量的亚硝酸，在碱性条件下，2-亚硝基-4-乙酰基苯酚于430nm波长处有最大吸收。三 实验内容1 标准曲线精密称取扑热息痛100mg，以95%乙醇3ml溶解后加适量水，转移于100ml容量瓶中，加水至刻度，充分摇匀，得扑热息痛贮备液（1mg/ml），精密吸取该贮备液2.5ml准确稀释至10ml，得250g/ml的标准液。分别精密吸取250g/ml的标准液0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8ml于离心管中，分别加水使成2ml，各加家兔血浆1.5ml，混匀，再加入2ml 10%三氯醋酸，充分混合再离心20分钟（3000rpm）。吸取上清液4ml于25ml带塞刻度试管中，加入1ml 6N盐酸，1ml 20% NaNO2溶液，摇匀，放置5分钟，使反应完全。慢慢加入2ml 15%氨基磺酸，振摇至无气泡产生，流水冷却，加入2.5ml 20%NaOH摇匀，用2cm比色杯于430nm波长处测定吸收度。用蒸馏水2ml代替标准液按同法处理，作空白对照。求出回归方程。标准液(ml)0.30.60.91.21.51.8浓度（g/ml）50100150200250300A(3次)标准曲线（回归方程）：2 样品测定取家兔5只（雌兔不得怀孕），每只体重2.53kg，给药前先从耳静脉取血3ml留作对照。然后按200mg/kg（体重）的剂量，肌注给药（给药前禁食12小时）。给药后按第3、5、10、15、25、30、40、60、100、140、180分钟，定时从兔耳静脉取血3ml，用预干燥并带有适量肝素钠的离心管集血，轻轻摇匀，离心10分钟（3000rpm），吸取血浆于干燥试管中，置冰箱中保存备用。取出无药血浆与各时刻的含药血浆，室温解冻后进行测定：吸取1.5ml血浆，置刻度离心管中，加水2ml，混匀，以下操作同标准曲线项下“加入2ml 10% 三氯醋酸，充分混合”起，依法测定吸收度，代入标准曲线，计算出该时刻的血药浓度，以无药血浆按同法处理作对照。3 结果记录兔子体重： 给药剂量：测定记录：编号1234567891011t(min)35101525304060100140180AC（g/ml）lgC t(min)C(g/ml)尾段直线相外推线浓度的对数（lgC外推）外推线浓度（C外推）残数浓度（g/ml）C残 =C外推-C残数浓度的对数lgC残尾段直线相斜率= K=残数斜率= ka=四 数据处理1 以血药浓度（g/ml）为纵坐标，时间为横坐标，作吸收曲线图（血药浓度时间曲线）。2 以血药浓度（g/ml）的对数对时间作血药浓度时间的半对数图，从图中求出消除速度常数K，再用残数法求出吸收速度常数ka。3 提取参数（t1/2吸收、t1/2消除、tp、Cp）A 吸收半衰期： t1/2吸收=0.693/ kaB 消除半衰期： t1/2消除=0.693/KC 血药浓度时间曲线下的总面积（AUC0）D 达峰时（tp）根据ka及K求出达峰时tptp =（lnka - lnK）/（ka - K）=2.303（lgka - lgK）/（ka - K）抛物线拟合法用抛物线C=p+Qt+Rt2的峰段代替药时曲线的峰段，选取实验数据中最大浓度C (i)左右三点， ti-1，C（i-1）、 ti，Ci 、 ti+1，C(i+1)代入，则有：C（i-1）= P+Qti-1 + Rt2i-1Ci = P + Qti, + Rt2 iC(i+1) = P+ Qti+1+Rt2 i +1解上述方程组，求