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文档简介
广东药学院 药剂学教研室 张纪兴实验十六 扑热息痛的血药浓度测定一 实验目的通过本实验,初步掌握扑热息痛的血药浓度测定方法及有关参数的计算。二 实验原理扑热息痛与亚硝酸发生亲电取代反应,生成2-亚硝基-4-乙酰氨基苯酚,用氨基磺酸铵除去过量的亚硝酸,在碱性条件下,2-亚硝基-4-乙酰基苯酚于430nm波长处有最大吸收。三 实验内容1 标准曲线精密称取扑热息痛100mg,以95%乙醇3ml溶解后加适量水,转移于100ml容量瓶中,加水至刻度,充分摇匀,得扑热息痛贮备液(1mg/ml),精密吸取该贮备液2.5ml准确稀释至10ml,得250g/ml的标准液。分别精密吸取250g/ml的标准液0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8ml于离心管中,分别加水使成2ml,各加家兔血浆1.5ml,混匀,再加入2ml 10%三氯醋酸,充分混合再离心20分钟(3000rpm)。吸取上清液4ml于25ml带塞刻度试管中,加入1ml 6N盐酸,1ml 20% NaNO2溶液,摇匀,放置5分钟,使反应完全。慢慢加入2ml 15%氨基磺酸,振摇至无气泡产生,流水冷却,加入2.5ml 20%NaOH摇匀,用2cm比色杯于430nm波长处测定吸收度。用蒸馏水2ml代替标准液按同法处理,作空白对照。求出回归方程。标准液(ml)0.30.60.91.21.51.8浓度(g/ml)50100150200250300A(3次)标准曲线(回归方程):2 样品测定取家兔5只(雌兔不得怀孕),每只体重2.53kg,给药前先从耳静脉取血3ml留作对照。然后按200mg/kg(体重)的剂量,肌注给药(给药前禁食12小时)。给药后按第3、5、10、15、25、30、40、60、100、140、180分钟,定时从兔耳静脉取血3ml,用预干燥并带有适量肝素钠的离心管集血,轻轻摇匀,离心10分钟(3000rpm),吸取血浆于干燥试管中,置冰箱中保存备用。取出无药血浆与各时刻的含药血浆,室温解冻后进行测定:吸取1.5ml血浆,置刻度离心管中,加水2ml,混匀,以下操作同标准曲线项下“加入2ml 10% 三氯醋酸,充分混合”起,依法测定吸收度,代入标准曲线,计算出该时刻的血药浓度,以无药血浆按同法处理作对照。3 结果记录兔子体重: 给药剂量:测定记录:编号1234567891011t(min)35101525304060100140180AC(g/ml)lgC t(min)C(g/ml)尾段直线相外推线浓度的对数(lgC外推)外推线浓度(C外推)残数浓度(g/ml)C残 =C外推-C残数浓度的对数lgC残尾段直线相斜率= K=残数斜率= ka=四 数据处理1 以血药浓度(g/ml)为纵坐标,时间为横坐标,作吸收曲线图(血药浓度时间曲线)。2 以血药浓度(g/ml)的对数对时间作血药浓度时间的半对数图,从图中求出消除速度常数K,再用残数法求出吸收速度常数ka。3 提取参数(t1/2吸收、t1/2消除、tp、Cp)A 吸收半衰期: t1/2吸收=0.693/ kaB 消除半衰期: t1/2消除=0.693/KC 血药浓度时间曲线下的总面积(AUC0)D 达峰时(tp)根据ka及K求出达峰时tptp =(lnka - lnK)/(ka - K)=2.303(lgka - lgK)/(ka - K)抛物线拟合法用抛物线C=p+Qt+Rt2的峰段代替药时曲线的峰段,选取实验数据中最大浓度C (i)左右三点, ti-1,C(i-1)、 ti,Ci 、 ti+1,C(i+1)代入,则有:C(i-1)= P+Qti-1 + Rt2i-1Ci = P + Qti, + Rt2 iC(i+1) = P+ Qti+1+Rt2 i +1解上述方程组,求
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