常用培养基配制.docx

常用培养基LB培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨10g1.0% (w/v)酵母抽提物5g0.5% (w/v)NaCl10g1.0% (w/v)H2O至1升调节pH值至7.0低盐LB培养基/升终1 X浓度 胰蛋白胨10g1.0% (w/v)酵母抽提物5g0.5% (w/v)NaCl10g0.5% (w/v)H2O至1升调节pH值至7.0Terrific Broth 培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨12g1.2% (w/v)酵母抽提物24g2.4% (w/v)甘油4g0.4% (w/v)加H2O至900 ml灭菌，冷却至60C后加入100 ml过滤灭菌的10X TB磷酸盐 (0.17 M KH2PO4, 0.72 M K2HPO4)SOB 培养基/升终1 X浓度胰蛋白胨20g2.0% (w/v)酵母抽提物5g0.5% (w/v)NaCl0.5g0.05% (w/v)250mMKCl10ml2.5mMH2O至900 ml调节pH值至7.0，加H2O至990 ml灭菌、冷却至室温。使用前加入10 ml灭菌的1 M MgCl2 溶液10mMSOC 培养基SOB 培养基(1升)加入20 ml 过滤灭菌的1 M葡萄糖M9 基本培养基/升终1 X浓度5X M9 salts200ml灭菌H2O至1升1MMgSO41ml1mM20% 葡萄糖10ml0.2 (w/v)1M CaCl20.1ml0.1mM5X M9 Salts/升终1 X浓度Na2HPO4x7H2O64g47.8mMKH2PO415g22mMNaCl2.5g8.6mMNH45g18.7mM添加剂/升终1 X浓度抗生素(如果需要)氨苄青霉素50g/ml氯霉素20g/ml卡那霉素30g/ml四环素12g/ml半乳糖苷(如果需要)X-Gal20g/mlIPTG0.1mM培养基含有琼脂或琼脂糖 琼脂(平板)15g1.5%(w/v)琼脂(软性琼脂)7g0.7%(w/v)琼脂糖(平板)15g1.5%(w/v)琼脂糖(软性琼脂糖)7g0.7%(w/v)参考文献 1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997. 2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001. 常用储存液10 M 醋酸铵醋酸铵385.4gH2O至500ml1 M CaCl2CaCl2x6H2O219.1gH2O至1升100X Denhardt 溶液终浓度Ficoll 40010g0.02%(w/v)聚乙烯吡咯烷酮10g0.02%(w/v)牛血清白蛋白10g0.02%(w/v)H2O至500 ml过滤灭菌后分装(25 ml)，-20C 保存0.5 M EDTA (乙二胺四乙酸) (pH 8.0)Na2EDTAx2H2O186.1 gH2O至700 ml10 M NaOH (50 ml)调节pH值至8.0H2O至1升10mg/ml 溴化乙锭溴化乙锭0.2gH2O至 20 ml充分混匀后4C黑暗保存警告: 溴化乙锭是一种突变剂。使用溴化乙锭溶液时需带手套；称量其粉末时需带面具。1 M KClKCl74.6gH2O至1升1 M MgCl2MgCl2x6H2O20.3gH2O至100 ml1 M MgSO4MgSO4x7H2O24.6gH2O至100 ml5 M NaClNaCl292.2gH2O至1升10 M NaOHNaOH400.0gH2O至1升1 M Tris-HCl 三羟甲基氨基甲烷盐酸盐Tri base121.1gH2O至800 ml用于浓缩的HCl调节至所需的pH值混合后加H2O至1升3 M 醋酸钠 (pH 5.2 或 7.0) (2)醋酸钠 x 3H2O401.1gH2O至800 ml用醋酸调节pH值至7.0或用冰醋酸调节pH值5.2H2O至1升参考文献 1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997. 2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001. 常用缓冲液10X 磷酸盐缓冲液(储存液) (PBS)/升终1 X浓度NaCl80.0g137mMKCl2.0g2.7mMNa2HPO414.4g100mMKH2PO42.7g2mMH2O至800 mlHCl至pH 7.4H2O至1升20X SSC/升终1 X浓度NaCl175.3g150mMNa3citrate x H2O88.2g15mMH2O至800 ml1M HCl调节pH值至7.0H2O至1升20X SSPE/升终1 X浓度NaCl175.3g150mMNaH2PO4xH2O27.6g10mMNa2EDTA7.4g10mMH2O至800 ml10 M NaOH调节pH值至7.4H2O至1升5X Tris-甘氨酸, Native电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱15.1g25mM甘氨酸72.0g192mMH2O至1升稀释溶液的pH至8.35X Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱15.1g25mM甘氨酸72.0g192mMSDS5.0g0.1%(w/v)H2O至1升稀释溶液的pH至8.35X Tris-三(羟甲基)甲基甘氨酸-SDS电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱121.1g0.1MTricine179.2g0.1MSDS10.0g0.1%(w/v)H2O至1升稀释溶液的pH至8.350X TAE (Tris-醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱242.0g40mM冰醋酸57.1ml20mM0.5M EDTA (pH 8.0)100ml2%mMH2O至1升稀释溶液的pH大约为8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0g90mM硼酸55.0 g90mM0.5M EDTA (pH 8.0)40ml2%mMH2O至1升10X TPE (Tris-磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0g90mM磷酸(85%)15.5ml23mM0.5M EDTA (pH 8.0)40ml2%mMH2O至1升TE (Tris-EDTA) 缓冲液pH 7.4, 7.6或8.0/升终1 X浓度1 M Tri, pH 7.4, 7.6, 8.010.0ml10mM0.5 M EDTA (pH 8.0)2.0ml1mMH2O至1升参考文献 1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997. 2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001. 常用缩写A腺嘌呤或腺苷；丙氨酸单字母代码A260260 nm吸光值ACESN-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙磺酸Ad-2腺病毒-2ADAN-(2-乙酰氨基)-2-亚氨基二乙酸ADP腺苷5-二磷酸AMP腺苷单磷酸AMV 禽成髓细胞瘤病毒AP碱性磷酸酶APS 过硫酸铵aRNA 反义RNAATP腺苷5-三磷酸BCIP5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸BESN,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸BGG 牛血清球蛋白BICINEN,N-双(2-羟乙基)甘氨酸Bio-dNTP生物素-脱氧核苷三磷酸BMEbeta-巯基乙醇；2-巯基乙醇bp碱基对Bq贝可BSA牛血清白蛋白B/W蓝/白克隆C胞嘧啶或胞苷；半胱氨酸单字母代码CA酪蛋白氨基酸CAPS N-环已胺-3-丙磺酸cDNA互补脱氧核糖核酸CEU 粘性末端连接单位Ci居里CIAP小牛肠碱性磷酸酶CMP c胞苷单磷酸cpm次/分钟CTP胞苷5-三磷酸Da道尔顿dAMP脱氧腺苷单磷酸dATP脱氧腺苷三磷酸dCTP脱氧胞苷三磷酸ddATP双脱氧腺苷三磷酸ddCTP双脱氧胞苷三磷酸ddGTP双脱氧鸟苷三磷酸ddNTP双脱氧核苷三磷酸ddTTP 双脱氧胸苷三磷酸DE-81Whatman二乙基胺基乙基纤维素纸DEPC焦碳酸二乙酯DIG地高辛dITP 脱氧肌苷三磷酸dGTP脱氧鸟苷三磷酸DMSO二甲亚砜DNA脱氧核糖核酸DNase脱氧核糖核酸酶dNMP 脱氧核糖核苷单磷酸dNTP脱氧核糖核苷三磷酸dpm分解量/分钟ds双链DTT二硫苏糖醇dTTP脱氧胸苷三磷酸dUTP脱氧尿苷三磷酸EDTA乙二胺四乙酸EGTA 乙二醇-双-(2-氨基乙基)四乙酸ELISA酶联免疫吸附实验EMBL欧洲分子生物学实验室EMSA 凝胶电泳迁移分析 ENDO内切脱氧核糖核酸酶分析endo 内切核酸酶exo外切核酸酶EXO5和3- 外切脱氧核糖核酸酶分析FOA (5-FOA)5-氟乳清酸G鸟嘌呤或鸟苷；甘氨酸的单字母代码GalD-半乳糖GMP 鸟苷单磷酸GMPD 糖基酶介导的多态性检测GUSbeta-D-葡萄糖醛酸酶GTP 鸟苷5-三磷酸GQ遗传质量合格HC高浓度HEPESN-(2-羟乙基)哌嗪-N-2-乙磺酸HRP辣根过氧化物酶HPLC高效液相色谱IEF等电聚焦IPTG异丙基-beta-D-硫代半乳糖苷kb千碱基kDa千道尔顿LAMP 环介导恒温扩增LBLuria Bertani培养基LC低浓度LE 低电渗LM 低熔点LO标记的核苷酸MCS多克隆位点MES2-码啉乙磺酸MDA 多重置换扩增M-MuLV小鼠肉瘤病毒MOPS3-吗啉丙磺酸mRNA信使核糖核酸MW分子量NAD烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，还原型NADP烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸NADPH烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸，还原型NBT硝基蓝四氮唑NDP 核苷二磷酸NMP 核糖核苷单磷酸NR不推荐NP-40Nonidet P-40(去污剂)nt核苷酸NTC 无模板对照NTP核苷三磷酸oligo(A)寡聚腺苷酸oligo(dT)寡聚脱氧胸苷酸OMP乳清苷(一磷)酸Pi无机磷酸PAAG 聚丙烯酰胺凝胶PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳PBS磷酸盐缓冲液PCR聚合酶链式反应PEI聚乙烯亚胺PEG聚乙二醇PIPES哌嗪-1,4-二乙磺酸PNK多聚核苷激酶pNPP对硝基苯磷酸poly(A)多聚腺苷酸poly(A)+多聚腺苷酸(mRNA)poly(dA-dT)多聚(脱氧腺苷酸 脱氧胸苷酸)poly(dT)多聚脱氧胸苷酸PPi 无机焦磷酸盐PVDF 聚偏二氟乙烯QCA质量控制分析qPCR 定量聚合酶链式反应RACE 快速扩增cDNA末端RCA 滚环复制RDA 随机置换扩增RE限制酶RNA核糖核酸RNase核糖核酸酶R-M限制-修饰rRNA核糖体核糖核酸RT逆转录RT-PCR 逆转录聚合酶链式反应SAMS-腺苷蛋氨酸SAP 虾碱性磷酸酶SDA 链置换扩增 SDS十二烷基磺酸钠siRNA 小分子干扰核糖核酸SNP 单核苷酸多态性 ss单链SSC氯化钠/柠檬酸钠(缓冲液)SSCP 单链构象多态性SSPE氯化钠/磷酸钠/EDTA(缓冲液)STR 短串联重复T胸腺嘧啶或胸苷；苏氨酸单字母代码TAETris/醋酸/EDTA(缓冲液)TBETris/硼酸/EDTA(缓冲液)TdT末端脱氧核苷转移酶TETris/EDTA(缓冲液)TEMEDN,N,N,N-四甲基二乙