LDL┐C自动分析测定法与间接计算结果的比较.doc

LDLC自动分析测定法与间接计算结果的比较作者：周铁成于文彬程晓东秦庆肖鹏涛【关键词】低密度脂蛋白胆固醇关键词:低密度脂蛋白胆固醇；冠心病；Friedewald公式中图号:R446.112文献标识码:B0引言流行病学研究已确定了与冠心病（CHD）有关的几个脂蛋白危险因素，血清总胆固醇（TC）升高伴随有低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）升高，显著增加CHD的危险性.LDL-C浓度降低，CHD症状改善，能引起损伤的好转1.目前临床上LDL-C测定多采用聚乙烯硫酸沉淀法2，Friedewald公式间接计算法3.前者麻烦，费时，后者受许多因素的影响.我们采用均相分析的LDL-C试剂盒，无需沉淀分离，自动分析测定LDL-C，方法先进、简便、快速、准确、适宜自动化分析.1反应原理试剂1中的活性剂1能特异性水解高密度脂蛋白（HDL），极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微（CM），被包裹在上述脂质中的胆固醇即被释放并立即与酶试剂反应转变成一种无色产物.此时加入试剂2，低密度脂蛋白（LDL）即被活性剂2水解，并在偶联剂作用下产生一种有色化合物.该化合物在546/660波长下有特异性吸光系数.2材料和方法2.1仪器日立7170型自动生化分析仪.2.2LDL-C测定试剂盒日本第一化学药品株式会社生产.标准品:LDL-C校正物，含胆固醇3.7mmol・；L-1，冻干品加1mL蒸馏水溶解后即可使用.甘油三酯（TG）和总胆固醇测定，用上海长征公司生产的试剂盒.HDL-C用自动分析测定法，日本第一化学药品株式会社生产的试剂盒.2.3方法2.3.1LDL-C自动分析测定法参数两点终点法，温度37，主波长546nm，副波长660nm，样品用量2.4L，R1试剂240L，反应5min，加R2试剂80L，反应5min，监测1634点吸光度.2.3.2对照法用Friedewald公式LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2，间接计算LDL-C.其中TG和TC测定用酶法，LDL-C用自动分析测定法.3结果3.1精密度批内CV:取低、中、高浓度LDL-C样品各一份，LDL-C浓度分别为1.45，2.86和3.94mmol・；L-1.用本法同时测定10次CV分别1.32%，0.72%和0.48%.批间CV:取低、中、高浓度LDL-C混合血清各一份，LDL-C浓度分别为1.41，2.98和3.89mmol・；L-1，置4冰箱保存，每天测定一次，连续10d，批间CV分别3.61%，2.45%和3.41%.3.2回收率取一LDL-C浓度为3.82mmol・；L-1的血清样本，加入校正物1.85mmol・；L-1，作回收实验，共测3次，回收率在99.2%103.2%之间.3.3线性关系用一混合血清溶解LDL-C校正物，经反复测定4次浓度为6.70mmol・；L-1.将此血清用生理盐水作梯度稀释，使含血清1/5，2/5，3/5，4/5及原血清，用自动分析法测定，结果显示在6.70mmol・；L-1范围内线性关系良好，回归方程（X为浓度，Y为吸光度）为Y=0.0013+0.0934X（r=0.9997，P<；0.01）.3.4与Friedewald计算结果的偏离随机取临床送检样本150份，用自动分析法测LDL-C（D），同时测定TG，TC和HDL-C，用F公式计算LDL-C（F），按TG高低分组进行统计分析（Tab1）.表1LDL-C自动分析法测定与间接计算的比较（略）4讨论一般认为当TG<；4.52mmol・；L-1，及排除高脂血症的条件，上述计算公式是可行的.我们的研究结果也表明当TG<；4.52mmol・；L-1时，LDL-C计算结果与自动分析测定结果相比无显著性差别，且高度相关（r>；0.95），计算偏差<；5%.但TG>；4.52mmol・；L-1时，LDL-C计算结果与自动分析测定结果相比有显著性差别（P<；0.05，r<；0.80），计算偏差>；15%.可见LDL-C自动分析测定法在高TG浓度条件下有一定的临床应用价值，与文献报道一致4.但在型脂蛋白血症，乳糜微粒血清等条件下的应用价值有待进一步探讨.参考文献:1RifaiN，WarnickP.McnamaraJRetal.Measurementoflow-density-lipoproteincholesterolinserum:AstatusreportJ.ClinChem，1992；38（2）:150-152.2中华人民共和国卫生部医行政司编.全国临床检验操作规程M.第2版.南京:东南大学出版社，1997:281-282.3FridedewaldWT，LevyRI，FredricksonDS.Estimationofcon-centrationoflow-density-lipoproteincholesterolinplasma，withoutuseoftheprecipitativeultracentrifugeJ.ClinChem，1972；18（5）:499-501.4HarrisN，NeufeldEJ，NewburgerJWetal.Analyticalperfor-mance