STAT3对Cps感染细胞凋亡相关蛋白表达的影响-检验专业毕业论.ppt

STAT3对Cps感染细胞凋亡相关蛋白表达的影响,本科毕业论文开题报告,目录,2,2,4,5,5,4,5,可行性和创新性分析,选题背景及研究意义,一、研究背景,1.衣原体（Chlamydiae）为革兰氏阴性病原体，是一类能通过细菌滤器、在细胞内寄生、具有独特发育周期的原核细胞型微生物； 2.衣原体的持续性感染是引起宿主慢性炎症反应和组织纤维化重要原因； 3. 衣原体持续性感染的重要机制之一是抑制宿主细胞凋亡。,选题背景及研究意义,衣原体抗细胞凋亡与细胞内信号通路关系的研究,1.肺炎嗜衣原体（Cpn）持续性感染的上皮细胞中凋亡抑制 蛋白（IAP）通过细胞核因子NF-KB途径发挥抗凋亡作用； 2.沙眼衣原体（Ct）可通过激活STAT1 信号通路诱导STAT信号通路及其负调控因子细胞因子信号转导抑制子（SOCS1） 蛋白表达并抑制宿主细胞产生NO，抑制细胞凋亡，造成持续性感染。,选题背景及研究意义,二、研究意义,本研究基于衣原体感染能引起宿主持续性感染，而抗宿主细胞凋亡是持续性感染的重要机制之一，但衣原体具有多种抗凋亡机制，研究STAT3对鹦鹉热嗜衣原体（Cps）感染细胞的相关凋亡机制研究，为进一步揭示衣原体的致病机制奠定基础。,研究内容及技术路线,一、研究内容,1.建立Cps感染细胞模型； 2.流式细胞术和Hoechst33258荧光染色检测各组细胞 3.Western blot法检测相关蛋白表达情况。,凋亡情况；,研究内容及技术路线,STAT3信号通路,研究内容及技术路线,活化的STAT3,Bax/Bcl-2家族,Cleaved-caspase3,Cleaved-caspase9,STAT3磷酸化,细胞受到刺激,Caspase9,Caspase3,Caspase7,Cleaved-caspase7,抑制PARP活化,某些化学片段C表达改变,抑制细胞凋亡,选题背景及研究意义,二、方案路线,Hela229细胞铺板,CpsHela229细胞感染模型建立,加入AG490阻断、ST进行诱导,Hela,ST,AG490,Cps,Cps+AG490,Cps+ST,Cps+ST+AG490,流式细胞术检测 细胞凋亡情况,WB法检测相关凋亡蛋白,实验结果分析,Hoechst33258荧光染 色法检测细胞核形态,课题研究的重点和难点,一、研究重点,Western blot法检测Cps感染细胞凋亡相关蛋白的表达水平变化。,二、研究难点,1.Western blot检测条件的优化； 2.Cps细胞感染模型的构建； 3.Hoechst33258荧光染色测凋亡中，染色时间及工作 溶液浓度的控制。,研究进度安排,进度安排,1.已知有多条信号途径参与衣原体抑制宿主细胞凋亡，并且已经证实STAT3信号通路可抑制某些肿瘤细胞凋亡，但STAT3信号通路与衣原体的抗凋亡作用关系未见报道。本实验在综合分析文献资料的基础上提出这一假设，具有较强的创新性，为衣原体致病机制研究提供新的思路。 2.已有文献证实衣原体感染会引起JAK信号通路的活化，STAT3作为具有重要信号转录调节功能JAK-STAT信号通路的一员，在信号传导及抗凋亡过程中发挥