血液分析仪临床应用ppt课件

血液分析仪临床应用,客户技术服务部 吴子权,第一部分 血液学基础,1.血液流经全身各脏器，是人体最大的循环系统； 2 .为全身提供氧气和营养成分； 3.带走二氧化碳和代谢产物 4.有动脉和静脉之分,血液成分,EDTA-K2抗凝血 血浆55% 水 90% 养分 蛋白质 激素 细胞45% 红细胞 白细胞 血小板,红细胞,1.红细胞为双凹圆盘状； 2.内含血红蛋白； 3.为机体组织携带氧气和养分； 4.正常男性为：4.0-5.51012/L 女性为：3.5-5.01012/L 细胞膜有脆性，易破碎，因而溶血剂（表面活性剂）可溶解红细胞,血红蛋白,1.血红蛋白为红细胞内部结构，具有携带氧气的位点； 2.其功能为携带氧气； 3. 当红细胞被溶解后，血红蛋白释放出； 4.正常人含量为： 110-170 g/L 血红蛋白有粘性，容易附着,血小板,血小板功能为参与止血 正常参考为： 100-300 109/L 血小板由于本身的功能特性，容易受到刺激后聚集，因而在临床检测中最容易受影响,血小板,白细胞,功能为抵抗机体免受感染 正常参考为：4-10109/L 可分为5个亚群，各自行使独立的功能 具有细胞核，,白细胞,白细胞亚群,1.中性粒细胞 2.淋巴细胞 3.单核细胞 4.嗜酸细胞 5.嗜碱细胞,1,2,3,4,5,库尔特原理,负压,血细胞 悬液,外电极,内电极,小孔,小孔管,小孔电流,样品杯,小孔近观,库尔特原理三要素：小孔、负压、电极 检测：细胞大小和数量,第二部分 血细胞直方图,在小孔计数时仪器获得细胞的数量和大小(体积)的信息,再进一步分类整理,得到在各种不同体积下相应的数量,反应在坐标上 坐标横轴表示细胞大小,以fl(飞升)为单位 坐标纵轴表示相应数量,三分类之白细胞直方图,红细胞直方图,典型的红细胞直方图上，可以看到两个细胞群体： 1细胞主群 从50 fL开始，两侧对称呈正态分布的曲线， 又称“主峰” 2大细胞群 在主群右侧，又称“足趾部”，是一些红细胞二聚体、三聚体、多聚体的混合物。,血小板直方图（拟合曲线）,在血小板的直方图上可见两条曲线： 一条是 2fl-20fl 的原始数据曲线; 另一条是 0fl-70fl 的拟合曲线.,拟合曲线,血小板计数的干扰主要来自: 2 fl以下：噪音、电磁波的干扰 20 fl以上：裂红细胞;小红细胞;白细胞的干扰,拟合曲线作用,仪器根据测量得到的220 fL范围内血小板分布情况，按照对数正态分布规律得到070 fL范围血小板分布情况（正常人血小板绝大多数分布在220 fL 范围内）。 如果拟合成功，血小板数量由拟合曲线下的面积换算得到，即070 fL范围的血小板数量； 如果拟合不成功，没有拟合曲线，血小板结果只报告220fL范围的血小板数量。通常情况下是低于实际数量的,血小板曲线不拟合的原因,1.血小板原始计数小于20 109/L； 2.血小板曲线不呈现对数正态分布； 3. 血小板曲线的波峰不在3fL-15fL之间； 4.血小板PDW大于20% 5.三次计数中任何一次没有符合上述4点拟合条件,第三部分 血细胞五分类,库尔特VCS五分类技术 V：体积分析 C：细胞核型分析 S：细胞内部颗粒分析,接近原态的白细胞分析,Scatter Pak双试剂系统的作用 E-lyse: 通过低渗作用溶解红细胞； S-lyse: 终止溶解作用，使白细胞恢复到接近原态,接近原态的WBC分析,接近原态的白细胞,进入流式通道,逐个、同时、直接的三维检测,NEDC Mean,细胞的三维定位,NEOP Mean,NE RLS Mean,细胞的三维定位,细胞的三维定位,三维空间的多侧面表示-DF1 -体积(V),激光散射(S),嗜酸细胞,中性粒细胞,淋巴细胞,单核细胞,DF2 -体积(V),传导性(C),单核细胞,淋巴细胞,中性粒细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞,网织红细胞的检测,网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的不成熟红细胞,通常较成熟红细胞稍大,其胞质中尚残存部分嗜碱性物质(RNA,核糖体),经碱性染料染色后可见深染的网状结构,故名。 右图中标记A、B、C的细胞分别代表不同成熟度的网织红细胞的。,新亚甲蓝-VCS检测法,以经典的超活染料新亚甲蓝（NMB）着色网织红细胞内残存的RNA 漂洗红细胞内血红蛋白(酸性试剂) 用VCS三维技术，检测网织红细胞,网织红细胞 VCS三维散点图分析,网织红细胞检测注意点,使用抗凝血，样本采集后8小时内完成检测 加入染液（A液）后室温下作用5-60分钟 取2ul，加入2ml漂洗液（B液）后勿混匀，等待30秒钟 30秒钟一到，立即进样检测 网织红细胞检测的重复性不太理想（半自动）,第四部分 血细胞参数介绍,WBC、NE%、NE#、LY%、LY#、MO%、MO#、EO%、EO#、BA%、BA#； RBC、Hgb、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDW PLT、MPV、PCT、PDW RET%、RET#、MRV、MI,白细胞系列参数,WBC：白细胞数量，正常人参考为4-10 109/L NE%：中性粒细胞百分比，正常参考为50%-75% NE#：中性粒细胞绝对值 LY%：淋巴细胞百分比，正常参考为20%-40% LY#： 淋巴细胞绝对值 MO%：单核细胞百分比，正常参考为3%-10% MO#：单核细胞绝对值 EO%：嗜酸细胞百分比，正常参考为0.5%-5% EO#：嗜酸细胞绝对值 BA%：嗜碱细胞百分比，正常参考为0-2% BA#：嗜碱细胞绝对值,红细胞系列参数,RBC：红细胞数量，正常参考男性为4.0-5.5 1012/L 正常参考女性为3.5-5.0 1012/L Hgb：外周血中血红蛋白浓度，正常参考为110-160 g/L Hct：血细胞压积，也可指红细胞压积，正常参考为0.35-0.50 MCV：平均红细胞体积，正常参考为80-100 fL MCH：平均红细胞血红蛋白含量，指平均每个红细胞含的血红蛋白量，正常参考为27-34 pg MCHC：平均红细胞血红蛋白浓度，指红细胞中血红蛋白浓度，正常参考为320-360 g/L RDW：红细胞分布宽度，正常参考为11.5% - 15%,血小板系列参数,PLT：血小板数量，正常参考为100-300 109/L MPV：平均血小板体积，正常参考为6.5-12.5fL Pct：血小板压积，正常参考为0.108%-0.271% PDW：血小板分布宽度，正常参考为11 .5%-18%,网织红细胞系列参数,RET%：网织红细胞百分比，正常参考为0.5%-2.5% RET#：网织红细胞绝对值 MRV：平均网织红细胞体积，正常参考为100-125fL MI：网织红细胞不成熟度，即不成熟网织红细胞占所有网织红细胞的比率，正常参考为0.2-0.4,第五部分 HMX常见的旗标和代码,旗标(数值后): R 结果需复核 *R 计数受干扰 H 结果高于参考范 围上限 L 结果低于参考 范围下限,代码(替代数值): - 三次计数比统一 不完全计算 + 结果超出操作范围 : 流式通道堵塞 ? 数据无效,白细胞计数值后出现 *R的临床意义,说明白细胞在35fl处的检测受到干扰. 在白细胞计数孔有35fl大小的颗粒通过并被当作白细胞计数,且超过一定数量,触发报警 在白细胞直方图上看,曲线在35fl处上抬,正常情况,异常情况,导致 *R出现的可能原因,小白细胞 有核红细胞、抗溶红细胞 红细胞聚集,大血小板,血小板聚集 溶血剂输送系统故障,RDW后出现 R 的临床意义,红细胞计数时仪器计数 24fl 360fl的颗粒,绘出直方图,正常红细胞直方图应为两端封闭、单峰、呈高斯分布的曲线.RDW反应红细胞大小分布的偏离情况,其意义相当于 CV%(变异系数).,导致的原因： 输血 红细胞凝集 红细胞碎片 大血小板 血小板凝集成块 处理方法： 涂片镜检红细胞是否大小不一,PLT结果后出现 R旗标的 临床意义,仪器进行血小板计数时,计数 2fl 20fl的血小板数量,再拟合出一条 0fl 70fl的曲线,目的是为了排除计数干扰.但条件不满足时仪器不能给出拟合曲线,这时候血小板数值后出现 R .,导致血小板后出现 R 的原因,小红细胞或红细胞碎片; 白细胞碎片; 大血小板,血小板凝集; 血小板大小不一(输血后); 电磁波或噪音干扰小孔计数,处理方法,1.手工涂片镜检,如发现小红细胞,细胞碎片等异常细胞,则手工计数血小板; 2.如果大血小板影响到白细胞或红细胞数值,重新复核; 3.如果出现卫星血小板,将标本以枸橼酸钠抗凝,检测血小板数值,但最终数值须乘以1.1(10%稀释比例).,+ 出现的临床意义,+ (代码) ：结果超出仪器的操作范围 对白细胞而言计数值大于 99.9109/L； 对红细胞而言计数值大于7.001012/L ； 对血小板而言计数值大于 999109/L. 处理方法： 用ISOTON III液稀释标本至线性范围内再测 注: 1.先做一空白循环以防止携带污染 2.不能报告白细胞分类结果 检查仪器稀释液和溶血剂输送系统有无故障,代码 - 出现的临床意义,- 出现代表三次计数不统一 可能导致的原因： 小孔堵塞或部分堵塞; 标本有凝块或丝状纤维蛋白; 白细胞聚集,红细胞凝集; 大血小板,血小板凝集; 标本稀释后未气泡混匀. 处理方法： 参照维修手册清洗小孔; 查看标本有无凝块,涂片镜检有无细胞聚集; 检测标本混匀系统.,代码 出现的临床意义, 出现表示数据不完整,不完全计数 通常当一个参数由于三次计数不统一或超过范围得不到确切数值时,其衍生参数后将出现 , 如WBC + ,则其衍生参数NE#、 LY #、 MO #、 EO #、 BA # 后将出现 , 也可表示吸样错误, 出现也可表示吸样错误,当发生吸样错误时,所有参数的结果后都会带有 导致的可能原因有： 样本有凝块,堵塞吸样针; 样本量不够; 样本的RBC和HGB浓度过低(严重贫血病人标本),血样探测器检测失败; 仪器吸样系统堵塞.,发生吸样错误的处理方法,1.查看样本有无凝块,如果有重取标本,没有则重新检测,再出现如上问题则涂片镜检有无凝块或细胞聚集; 2.检测标本量是否够; 3.对于严重贫血病人样本采用手动进样方式. 4.检测仪器吸样系统,如发生堵塞则清洗.,代码 : 出现的临床意义,在白细胞五项分类及网织红细胞计数中,当流式通道堵塞产生 : 代码. 在散点分布图上可有三种堵塞报警： - FC ,流式通道完全堵塞(无检测); - PC1 ,流式通道检测时间延长; - PC2 ,流式通道检测时间缩短.,导致 PC / : 的原因,- FC ：完全堵塞; - PC1 ：流式通道或标本通道部分堵塞导致分类时间延长; - PC2 ：红细胞未完全溶解导致分类时间缩短,或鞘液系统问题.临床上高胆固醇和高甘油三酯血症、血红蛋白病、药物治疗后、进行性肝病等都可导致 PC2.,出现PC / :的处理方法,1.手工涂片进行白细胞分类; 2.用乳胶和 5C质控清洗流式通道; 3.查看ScatterPak液有否过期,检查 ScatterPak 液输送系统有无故障.,血常规样本的制备 抗凝剂的使用问题 长期放置对分类的影响 样本本身的干扰问题 检测温度的影响,第六部分 临床应用问题探讨,血常规样本的制备,静脉采血、并立即和抗凝剂充分混匀 抗凝剂浓度必须适宜 试管必须洁净，最好为一次性真空采血管 通常样本采集后24小时内完成常规检测 做网织红细胞检测必须在8小时内完成 样本必须室温下放置,抗凝剂的使用问题,抗凝剂推荐使用EDTA-K2或Na2 抗凝剂浓度为15g/dL，取20ul可抗凝1.5-2.0ml静脉血 血细胞遇到抗凝剂会出现短时间的收缩，再逐渐平衡，恢复原来大小，通常这一时间为几分钟，极少数样本需要几十分钟 如果抗凝剂浓度过高，将使平衡时间延长，影响检测,样本长期静置对分类的影响,标本静立34小时以上 标本静立导致细胞分层，产生特殊微环境 重新混合后细胞需重建平衡，通常需要30分钟 纠正的方法：间隔性混匀30分钟后再测,样本本身的干扰问题（I）,一.细胞聚集 红细胞聚集：常见于温度低时患者血样发生自身冷凝集，通常将血样37摄氏度温育15分钟后再检测，可消除 血小板聚集：常见于采血不顺利、抗凝不充分、试管质量差 二.低能量白细胞