《监测细菌耐药》PPT课件.ppt

监测细菌耐药 架起检验科与临床交流的桥梁 北京协和医院检验科细菌室 徐英春 1 做好每株菌的鉴定 熟练掌握各种鉴定方法： 形态学 手工法 数码鉴定： 乳胶快速： 血清学：QC伤寒，肠炎 药敏表型分析法 2 阴沟肠杆菌！ cip fep fox amc caz imp 3 大肠杆菌？ imp CTX amp caz tim amc 4 奇异变形杆菌？ imp iCTX amp tim amc imp amc croatm caz tim ctx kz 5 鲍曼不动杆菌？ imp iCTX amp caz tim amc tmp smz cip gn caz imp 6 做好每株菌的药敏报告 熟练掌握 NCCLS： 评论，角注 不同菌属的抗生素选择 质控 保存菌种 7 某公司耐药监测计划书 肠球菌属： 青霉素 万古霉素 阿米卡星 利奈唑烷 头孢噻肟 氨苄西啉舒巴坦 阿莫西啉克拉维酸 头孢他啶 头孢呋辛 头孢曲松 8 药敏报告原始资料齐全 病例号 化验号 专科 病房代号 标本 酶 ESBL 菌名 9 Name 姓名 Accession 化验号 Special 科室 Ward 病房 Collection Date 年月日 Source 标本 Organism 菌名 B-lactamaseESBL 抗生素 Breakpoint 结果 Penicillin 青霉素 2829 Oxacillin 苯唑西林 1013 凝固酶阴性葡萄1718 抗生素 Breakpoint 结果 cefuroxime 头孢呋 辛 1418 Ceftazidime 头孢他啶 1418 北京协和医院 检验科微生物室药敏报告单 病案号 10 协和医院药敏质控记录 ATCC25922大肠杆菌 抗生素允许范围12/819/8 氨苄西啉16-221718 氨苄西啉舒巴坦19-242222 头孢呋辛20-262524 头孢他啶25-323029 头孢曲松29-353030 阿米卡星19-262526 11 掌握统计分析软件 WHONET-3,4,5 自动化仪自身的分析软件 如BD的Epicenter 参加举办的各种 WORKSHOP 用WHONET5分析实例 12 统计分析药敏数据举例 用WHONET5分析实例 一 分析96年MRSA爆发流行情况 Resistance profiles Gram positive sau 13 ICU中一次MRSA的爆发流行的脉冲电泳分析 patient MRSADatesourceward PFGE type 1699796/08/31sputumICUK1 2694496/09/06sputum ICUK1 2741396/09/26sputum RTK1 3720896/09/16sputum ICUK1 3770396/10/04sputum CCU K1 u 7399 96/09/23sputum ICU K1 u B240796/09/30bloodICU K1 6770596/10/06 sput. ICUK1 7779196/10/08 sput. ICUK1 u 7833 96/10/11 sput. ICU K1 u 7640 96/09/30sputum ICU K1 u Doctor196/11/1 noseICUK1 u Doctor296/11/1 nose ICUK1 14 统计分析药敏数据举例 用WHONET5分析实例 二 分析94-97MRSA对万古霉素的敏感性 RIS表 Isolate listing 15 统计分析药敏数据举例 科研立项： 纸片扩散法万古霉素不敏感的菌株耐药机制? 文献检索：VISA！VRSA！ MIC定量：结果均为万古敏感株 16 The zone-changes of vancomycin to MRSA & MSSA in 1994-1997 MSSA MRSA 17 CDC报告：美国发现了第一例VRSA感染者！ 2001年4月： 40岁 糖尿病，肾衰，足溃疡：万古等治疗 2002年4月：坏疽脚趾切除术，透析仪污染引起MRSA 菌血症： 万古，利福平 2002年6月：插管穿刺点和管尖培养MRSA： 苯唑西林MIC 16 g/mL，万古霉素128ug/ml mecAvanAVRSA！除插管 慢性足部溃疡：VRSA，VRE，KOX 敏感的抗生素：氯霉素，利奈唑烷,米诺环素，链阳霉素， 四环素，TMP/SMZ 18 统计分析药敏数据举例 用WHONET5分析实例三： 分析99年ESBL（） 的肺炎克雷伯菌和大肠杆菌耐药情况 RIS表 Histograms scatterplot 19 统计分析药敏数据举例 科研立项： 为什么ESBL（） 的肺炎克雷伯菌和大肠杆 菌对头孢噻肟和头孢曲松耐药？而头孢他啶 和头孢吡肟体外敏感？ 文献检索 20 ESBL基因型已经发现了150多种 TEM 65 SHV 38 OXA 15 CTX-M 23 其他型10 21 22 23 抗生素MIC（g/ml）敏感性 MIC90平均MICR%I%S% 头孢他啶2564.914086 头孢噻肟12834.8393625 头孢曲松25662.268725 头孢吡肟41.10793 头孢哌酮/舒巴坦327.87786 哌拉西林/他唑巴坦42.20496 琼脂稀释法： 28株ESBL（）肺炎克雷伯菌的敏感性 24 28株ESBL阳性Kpn中两种抗生素的MIC比较 256 128 64 32 16 8 4 2 1 0.5 0.3 1 114 22 333 21 1 2 1 1 .3 .5124816 32 64128 256 头 孢 噻 肟 g/ml 头孢他啶 g/ml 25 头孢他啶 头孢噻肟等电点pI值棒酸抑制 结合子CK64648.8+ 结合子CK72645.4、7.6、8.8+ 结合子CK81168.8+ 结合子CK101327.6、8.8+ 结合子CK122647.8、8.8+ 结合子CK152327.6、8.8+ 结合子CK160.5167.6、8.8+ 结合子CK181647.8、8.8+ 结合子CK212645.4、7.6、8.8+ 结合子CK232645.4、7.6、8.8+ 接合子的MIC值和等电点的结果(1) 26 氨 基 酸 的 位 点 3980117122143278289 CTX-M-1EVDLSDN CTX-M-3EANLADD CTX-M-11GAN PAHND* 缩写：A=丙氨酸、D=天冬氨酸、E=谷氨酸、G=甘氨酸、 H=组氨酸、L=亮氨酸、 N=天冬酰胺、P=脯氨酸、S=丝氨酸 V=缬氨酸 CTX-M-11 朱戌冬，徐英春，陈民钧等，中华检验医学杂志，2001,24:207-210 徐英春，朱戌冬，陈民钧。超广谱酶检测及临床意义的调查。 获协和医院2000年科研成果二等奖。27 北京：CTX-M-3，11，SHV2 上海：CTX-M-3 广州：CTX-M-3，11 浙江：CTX-M-3， 9，13，14，15，22 中国ESBL的主要基因型 28 ESBL阳性菌株的治疗建议 Whonet分析ESBL(+)的kpneco寻找体外敏感的抗生素： 与欧美相同之处 碳青霉烯类 酶抑制剂复合制剂 头霉素类 氟喹诺酮类 联合阿米卡星 头孢吡肟敏感 与欧美不同之处 头孢他啶敏感 29 全国32家医院ICU分离的9890株阴性杆菌 排序 菌名9495 9698 990001合计 绿脓杆菌142 258 329 305282 3623632041 大肠杆菌101 158 300 319260 3563021796 克雷伯菌属81203177 291257 3122581579 不动杆菌属92147164 204205 2242681304 肠杆菌属60136119 234236 2061941185 嗜麦芽窄食单151 9750 3395106397 30 统计分析药敏数据举例 用WHONET5分析实例四 分析98-2001年的绿脓杆菌的耐药变迁 只分析第1次分离的菌株 RIS表：他啶，培南 Caz+amk Imp+amk 31 绿脓杆菌 药物渗透屏障耐药 天然对抗生素的通透性降低，比大肠杆菌的抑菌浓 度高数十或数百倍： 大肠杆菌绿脓杆菌 庆大替卡西林) 氨曲南S 4. L2酶：有头孢菌素酶活性 氨曲南R， 加酶抑制剂类S 37 嗜麦芽窄食单胞菌 的治疗对策 特美汀 舒普深磺胺类 头孢他啶 环丙沙星 徐英春, 陈民钧, 周贵民等。396株嗜麦芽窄食单胞菌的耐药特征， 中华微生物和免疫学杂志，1999，19：184187。 获