【分子生物学】 考博真题

浙江大学 2010 博 分子生物学试题 名解， 基因组 问答 1、什么是转化医学 2、如果某信号对某蛋白有作用，设计一个试验来确定 这条信号通路 3、表观遗传学及其意义 4、如何解释细胞基因组相同但是蛋白质组不相同的现 象 简答 1、细胞死亡的几种方式 2、转录，翻译，蛋白表达的概念 名词解释：基因和基因组； ncRNA； 问答题：1.转化医学：2、研究信号通路，信号从 细胞外传至细胞内，往往是形成一个复合物，从而 引起效应，请你设计一个方法，了解整个信号通路 的传递过程。3.表观遗传学。 浙江大学 2009 博 分子生物学试题 名词解释 1、 种系分析法 2、 癌基因和抑癌基因 3、 顺式作用元件和反式作用因子 4、 表观遗传学 5、 简答 1、 什么是基因、基因组，蛋白质和蛋白质组 2、 蛋白质之间相互作用的方法有哪些 3、 什么是基因表达及其调控机制？ 4、 设计一个实验以证明 DNA 是遗传物质。 5、 基因操作中的常用工具有哪些？ 6、 举例说明蛋白质结构与功能的关系。 论述 1、 有一个蛋白 X，发现其在血管内皮细胞中与信号 转导通路 A 有密切联系，如何证明在此细胞中 与蛋白 X 相互作用的蛋白。 2、 HGP 已完成，谈谈你对其后续计划的认识。 浙江大学 2008 博 分子生物学试题 名词解释 1、 蛋白质的超二级结构 2、 核酸分子杂交 3、 基因组 4、 操纵子 5、 反式作用原件 6、 小卫星 DNA 7、 基因表达 8、 逆转录 9、 管家基因 10、信号肽 11、基因打靶 12、基因治疗 论述题 1、 DNA 的复制过程的基本特点和要点。 2、 G-蛋白信号介导的信号转导途径。 3、 DNA 损伤可以分为哪几类？其相应分类分别是？ 4、 蛋白质组的概念及其研究意义。 2009 年中国海洋大学分子生物学考博试题 第一题，5 翻译题，每题 8 分，共 40 分。包括 siRNA，Sanger(1953 年，其确定了牛胰岛素的一级 结构)等 第二题 问答题 1、某学生在大肠杆菌的培养基中 1）加葡萄糖 2） 加乳糖 3）加葡萄糖和乳糖，详述操纵子调控。 2、请说明分子标记的方法 3、 一个功能基因，如果已经知道其序列，如何知 道它的功能？ 4、一个蛋白酶，要选择什么样的载体，才能高量 表达和易纯化？ 山东大学 2009博 分生 一、名词解释： 1、顺式作用元件 2、模序与结构域 3、岗崎片段 4、Southern Blotting 5、遗传密码的简并性和摇摆性 二、简答： 1、基因治疗中常用病毒载体类型及特点？ 2、IP3-PKB 介导的受体信号转导途径？ 3、蛋白质（酶）活性的快速调节方法有哪些？举 三例说明磷酸/脱磷酸化是酶活性快速调节的重要方 式。 4、细胞死亡受体蛋白的分类，组成成员的作用？ 5、细胞周期 Cdk 的调控作用。 6、原核生物 DNA 复制后随链合成中参与的酶和蛋 白质及作用？ 7、举出 5 种类型 RNA 并简述其作用。 三、论述： 1、原核生物和真核生物表达调控的层次有哪些调 控机制。 2、原核生物和真核生物 DNA 复制的起始、延长和 终止有哪些不同点？复制过程参与的因子及功能？ 华中同济 2009 博 分生 一名词解释 1. genome 2. gene mapping 3 .house keeping gene 4. Restriction endoclease 5 .multiple cloning site 6 .Cis-acting element 7 .PCR 8 .gene therapy 9. operon 10. 原位杂交 二问答题 1、简述反式作用因子的结构特点。 2、何谓基因克隆？阐述一下基因克隆的基本过程。 3、 PCR 的原理及引物设计的原则。 4、简述逆转录病毒的结构特点。 5、人类基因定位的常用方法及其原理 浙大 2006 博 分生题及答案 一、名词解释：(25%) 1、RFLP:限制性片段长度多态性，是由 DNA 变异 (产生新的酶切位点或消除原有的酶切位点) 导致在 限制性核酸内切酶酶切时产生不同的长度片段。可 借助 Southern Blotting 或 PCR 的方法进行检测。 2、SSR：简章序列重复多态性，引物是根据微卫星 DNA 重复序列两翼的特定短序列设计，用来扩增重 复序列本身。由于重复的长度变化极大，所以是检 测多态性的一种有效方法。其特点包括：一般检测 到的是一个单一的多等位基因位点，共显性遗传， 故可鉴别杂合子与纯合子；得到的结果重复性很高。 3、EST：表达序列标签，是指从不同的组织构建的 cDNA 文库中，随机挑选不同的克隆，进行克隆的 部分测序所产生的 cDNA 序列。随着高通量测序技 术的进步，使人们越来越相信，大规模地产生 EST，结合生物信息学的手段，将为人们提供一种 快速有效的发现新基因的方法。 4、STS：序列标签位点，是由特定引物序列所界定 的一类标记的统称，短的在基因组上是可以被唯一 操作的序列，因而可以确定在物理图谱上的特定位 置。 5、CAP : CAP 即分解代谢物基因活化蛋白是一种激 活蛋白，因为细菌的许多启动子为弱启动子，本身 与 RNA 聚合酶的作用较弱，在有 CAP 蛋白这类活 蛋白存在下，可使 RNA 聚合酶与启动子的亲和力 增强，CAP 蛋白的活性强烈依赖 cAMP。 6、AFLP：扩增片段长度多态性，其特点是把 RFLP 和 PCR 结合了起来。其基本步骤是：把 DNA 进行限制性内切酶酶切，然后选择特定的片段进行 PCR 扩增( 在所有的限制性片段两端加上带有特定序 列的“接头”，用与接头互补的但 3?端有几个随机选 择的核苷酸的引物进行特异 PCR 扩增，只有那些与 3?端严格配对的片段才能得到扩增)，再在有高分辨 力的测序胶上分开这些扩增产物，用放射性法、荧 光法或银染染色法均可检测之。 7、SNP：单核苷酸多态性，是一种较为新型的分子 标记，其依据的是一位点的不同等位基因之间常常 只有一个或几个核苷酸的差异，因此在分子水平上 对单个核苷酸的差异进行检测是很有意义的。 8、FISH：荧光原位杂交技术，是一种利用非放射 性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它 将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观 性和原位杂交的高准确性结合起来，通过荧光标记 的 DNA 探针与待测样本的 DNA 进行原位杂交，在 荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对 染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊 断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供 准确的依据。 9、Genome：基因组，有机体或细胞中的所有 DNA，包括核中的染色体和线粒体中的 DNA。 10、RNA in situ hybridization：RNA 原位杂交，是 利用 cDNA 为探针来检测与其互补的 mRNA 链在 细菌或其他真核细胞中的位置，是检测基因组织特 性表达的常用方法。 11、单克隆抗体：每个 B 淋巴细胞有合成一种抗体 的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的 B 淋巴细 胞系，含遗传基因不同的 B 淋巴细胞合成不同的抗 体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定 簇分别激活各个具有不同基因的 B 细胞。被激活的 B 细胞分裂增殖形成该细胞的子孙，即克隆由许多 个被激活 B 细胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多 种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞 进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细 胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的 抗体，称为单克隆抗体。 12、基因芯片：所谓基因芯片，是指将大量探针分 子固定于支持物，上，然后与标记的样品进行杂交， 通过检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的 数量。由于用该技术可以将极其大量的探针同时固 定于支持物上，所以一次可以对大量的 DNA 分子 或 RNA 分子进行检测分析，从而解决了传统核酸 印迹杂交，技术复杂、自动化程度低、检测目的分 子数量少、效率低，等不足，而且，通过设计不同 的探针阵列，用一定的分析方法，还可以用于序 列分析，称作杂交测序。 二、描述 cDNA 文库构建原理与方法 （25%）：（1）cDNA 获得方法，（2）克 隆方法，（3）文库质量定义。 答： cDNA：以 mRNA 为模板，利用反转录酶合 成与 mRNA 互补的 DNA(complementary DNA，cDNA)，再复制成双链 cDNA 片段，与适当 载体连接后转入受菌体，扩增为 cDNA 文库(cDNA library)，然后再采用适当方法从 cDNA 文库种筛选 出目的 cDNA。与基因组 DNA 文库类似，由总 mRNA 制作的 cDNA 文库包括了细胞全部 mRNA 信息，自然也含有我们感兴趣的编码 cDNA。当前 发现的大多数蛋白质的编码基因几乎都是这样分离 的。 （1） cDNA 获得方法：Total RNA 的提取； mRNA 的分离；cDNA 双链合成：Superscipt IIRT 合成第一链，cDNA 第二链的合成，双链 cDNA 末端补平，EcoR I adaptor 加接，双链 cDNA 末端的磷酸化及 Xho I 酶切，胶回收 cDNA。 （2）克隆方法：载体制备：pBlueScriptII 的提取， pBlueScriptII 的双酶切消化，载体去磷酸化，载体 效率检测；cDNA 双链和载体的连接：连接，检 测（PCR 方法）；电转化：电转化感受态细胞的 制备，连接产物纯化，电转化；快速鉴定、菌落 PCRpBlueScript cDNA 文库扩增。 （3）文库质量定义：评价一个文库是否有实用价 值主要在于文库的含量和插入片段的大小两个方面。 所构建的文库中必须有足够多的克隆数, 这样才能 确保基因组 cDNA 中的每一个序列至少有一个拷贝 存在于重组文库中, 为达到这一要求, 文库的容量 应不小于 1.7105 , 同时为保证 cDNA 片段的完整 性, 插入片段的平均大小应不小于 1kb。 三、阐述基因突变的概念及引起突变的可能 途径(25%)：（ 1）化学诱变，（2）物理诱变， （3）T-DNA 插入，（4）缺失、插入， （5）无意突变概念，（6）碱基修复概念 1l9|+T 答：基因突变属分子水平上的变异,是指染色体上个 别基因所发生的分子结构的变化，基因突变在自然 界普遍存在。 基因突变的方式很多，主要有： （1）化学诱变，基因突变可以由某些化学物质所 引起，这些化学物质称为化学诱变剂。现已知很多 的化学诱变剂，它们诱变的机制是不同的。在 DNA 复制过程由于碱基类似物的取代，碱基的化学修饰 以及碱基的插入和缺失都会引起突变。（2）物理 诱变，利用物理因素引起基因突变的称物理诱变， 如 X 射线、紫外线、电离辐射等物理因素可造成 （3）T-DNA 插入，改变读码或变成假基因。（4） 移码突变：基因中插入或者缺失一个或几个碱基对， 会使 DNA 的阅读框架（读码框）发生改变，导致 插入或缺失部位之后的所有密码子都跟着发生变化， 结果产生一种异常的多肽链。移码突变诱发的原因 是一些像吖啶类染料分子能插入 DNA 分子，使 DNA 复制时发生差错，导致移码突变。（5）无意 突变，由于一对或几对碱基对的改变而使决定某一 氨基酸的密码子变成一个终止密码子的基因突变。 （6）碱基修复：DNA 损伤的修复系统主要有以下 几个： 损伤碱基的直接修复； 切除修复，包括 碱基切除修复、核苷酸切除修复和 DNA 交链的切 除修复； 错配修复； 重组修复，又称复制后修 复； 跨损伤 DNA 合成，这是一种利用损伤核苷 酸为模板，通过 DNA 聚合酶 I 使碱基掺入到复制 终止处进行 DNA 合成，从而延长 DNA 链的修复。 基因突变的特点为： 第一，基因突变在生物界中是普遍存在的。 第二，基因突变是随机发生的。 第三，在自然状态下，对一种生物来说，基因突变 的频率是很低的。 第四，大多数基因突变对生物体是有害的，由于任 何一种生物都是长期进化过程的产物，它们与环境 条件已经取得了高度的协调。 第五，基因突变是不定向的。 四、阐述一条反向遗传克隆功能基因的途径 (25%) 答：反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。经典 遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生 命的发生与发展规律。反向遗传学则是在获得生物 体基因组全部序列的基础上，通过对靶基因进行必 要的加工和修饰，如定点突变、基因插入缺失、基 因置换等，再按组成顺序构建含生物体必需元件的 修饰基因组，让其装配出具有生命活性的个体，研 究生物体基因组的结构与功能，以及这些修饰可能 对生物体的表型、性状有何种影响等方面的内容。 比较典型的反向遗传克隆功能基因的途径如 RNAi。 RNAi 的机制可能是细胞内双链 RNA 在 Dicer 酶的 作用下，可形成-22 bp 大小的小干扰 RNA(small interfering RNAs，siRNAs) ， siRNAs 可进一步掺入 多组分核酸酶并使其激活，从而精确降解与 siRNAs 序列相同的 mRNA，完全抑制了该基因在细胞内的 翻译和表达(下略) 南开大学 2005 年分子生物学考博试题 一、选择题 1、型核酸内切酶的产物是？5 粘末端3粘 末端 平末端 以上都有 2、基因工程诞生的时间？ 3、限制性内切酶产生 5PO4 ,3OH 4、cDNA 合成需要反转录酶 5、 T4-DNA 连接酶连接的最适温度是？ 6、 将 TcR 基因用 p BR322 运载，受体细胞将产生 的基因型？ 7、 Cosmid 怎么产生？ 8、 将 phage DNA 转入宿主的方法 9、 DNA 探针标记的方法 10、用杂交来筛选重组子的优点 11、蛋白质分泌的介导序列 12、Mini-Cell 中含有：DNA、RNA 、蛋白质中的哪 几种 13、酵母的 4 种载体 14、 phage 基因表达的重要特征 15、纯化或抽提 DNA 时，DNA 存在于哪一相中 16、DNA 在琼脂糖凝胶电泳中用什么染色 17、从乙醇中得到 DNA，最重要的条件是什么 18、用 pUC19 将克隆插入 lacZ,选择克隆子时，要 求宿主的基因型是什么 19、琼脂糖凝胶电泳中 DNA 被降解的特征 20、 phage 的 Cos site 能被下列哪个基因的产物切 割：gene A,E,J,W 21、EMBL4 载体是插入型还是取代型 22、酵母的哪个载体在非选择培养基上最稳定： YIp, YEp, YCp, YRp 23、E.coli 有哪三个天然质粒载体 24、哺乳动物基因组转移的方法 25、基于 conjugative transfer,质粒分为哪两类 26、植物原生质体转化的方法 27、plasmid 中含有复制起始位点的是 plasmid 还是 phage 28、质粒转化 B.subtilis 的要求 二、 问答题（共 70 分） 1、 Tat 蛋白激活 HIV 表达的全过程 2、 从分子水平上解释多抗、单抗的产生？怎样理 解产生抗体的多样性 3、 （互补实验）根据两个图说明 E.coli 操纵子的 二倍体表型，并解释原因 4、 利用 phage A、B 两个点突变株，证明 E.coli 中甲基介导的错配修复系统有存在 5、 用实验证明原核生物和真核生物基因结构的差 别 6、 病毒感染引发的宿主细胞应答的有关基因或蛋 白 7、 基因 A 序列已知（其上游序列亦已知） ，在它 上游（-370bp）存在-GGTCAT-的调控元件，证明 该调控元件中每个碱基在调控中贡献可能不同 中科院 医药与健康所 2008 博 分生 1、表观遗传，及调控方式，还有蛋白质通过哪些 共价修饰调控其功能？ 2、蛋白质与 DNA 结合的方法和比较，EMSA 和 DNase1 足迹法？ 3、密码子改造研究新蛋白药物，原理，关键和方 法 4、设计研究未知基因（预测两个跨膜区域）功能 的实验方案（不低于 4 个） 5、质粒改造原则 6、诱导全能干细胞的方法，实验方案等 中科院 2005 博 生化和分生 三、简答题： 1、简诉 SH2 与 SH3 结构域的功能。 2、某一酶催化单一底物反应。S1,S2 都是该酶的底 物，已知他们的 Kcat(或 Vmax)和 Km 值,在 S1,S2 同时存在并且浓度相同的情况下，请给出该酶催化 S1 和 S2 反应速度之间的表达式。 3、依次写出三羧酸循环中的酶。 4、解释下列非编码 RNA(non-coding RNA)名词： (1)核仁小 RNA(small nucleolarRNA,snoRNA); (2)干扰小 RNA(small interferingRNA,siRNA); (3)微 RNA(microRNA,miRNA)。 5、生物体存在大量的 mRNA 前体的选择性剪切 (alternative splicing)过程。什么是选择性剪接，有几 种方式？ 四、问答题： 1、阐诉磷脂酶 A2 催化的反应与信号转导的关系。 2、在纯化某一蛋白质的过程中，有一个分子量比 目标蛋白质小的蛋白质与目标蛋白一同被纯化，请 举例两种办法来证明或排除这个分子量小的蛋白质 是目标蛋白质的部分降解产物。 3、试诉非离子型去垢剂增容膜蛋白的机制。 4、阐诉逆转录转座子与逆转录病毒的异同点。 5、阐诉酵母转录激活因子 GAL4 的调控方式及其 在酵母双杂合系统(yeast two hybrid system)中的应用 湘雅 2006 博 分生 一、问答题 1、简述逆转录病毒的生活周期及其在基因治疗中 的应用 2、什么是 DNA 指纹图谱，阐述 DNA 指纹图谱的 产生机制及其在医学生物学中的应用 3、什么是质粒？简述质粒的结构特点及其用途 4 、什么是 RNAi？简述 RNAi 技术的原理及其在 恶性肿瘤治疗中的应用前景 5、什么是基因定位诱变技术？举例说明基因定位 诱变技术的应用 6、简述真核生物基因表达的调控机制 二、名词解释 1、无义突变 2、基因家族 3、顺式作用元件 4、人类基因组计划 5、多顺反子 6、蛋白质工程 7、Klenow 片断 8、转座子 9、proteomics 10、反义 RNA 11、real-time PCR 12、同工异源酶 13、基因表达酶 14、split gene 15、功能基因组学 16、锌指结构 17、基因打靶 18、DNA 聚合酶 19、EST 20 启动子 中国疾控中心 2005 博 分生 一、名词解释 1.EST 2.YAC 3.Sense DNA 4.RNAi 5.Race 二、问答题 1、乳酸操纵子的结构。IGPT 如何诱导结构基因表 达 2、正向突变、抑制突变及回复突变的定义及与突 变的关系 3、PUC18 克隆载体的结构特征 4、在做 PCR 过程中，常遇到的问题及解决方法 5、已知蛋白 A、B 之间相互作用，C、D 分别与 A、B 相似，如何签定 C、D 之间的相互作用，用 两种方法说明之 6、试用分子生物学相关知识建立动物模型的方法， 如何建立病原生物学的动物模型。 2008 协和 博 分子生物学 第一部分：填空 疯牛病的致病原因 什么是原病毒 SD 序列 信号肽识别序列的组成-部分和-部分 乳糖操纵子的调控序列 第二部分：大题，2 道 1. 给了一段序列要求涉及合适的引物，扩增出改序 列， （考点为引物设计原则） 2. 给了一个质粒序列，和一段待插入的基因组 DNA 片段，然后酶切后电泳，酶切后电泳，三个泳 道有三种不同的条带，分析其产生情况（考点为克 隆部分） 第三部分： 1. 紫外线过度照射后容易引发皮肤癌，正常机体通 过何种机制修复 2. 介绍酵母双杂交的原理和应用 3. 举例说明小 RNA 在发育中的作用和意义 3. 什么是转录后加工？目前认为这一提法欠妥，为 什么？ 4. 人类基因组当中存在许多非编码序列，如转座子 和内含子， （1）请问这些非编码序列是没有价值的 垃圾吗？为什么？（2） 近年来，小分子 RNA 的 研究与表观遗传学进展迅速，是否表明中心法则已 经过时，已经被新的理论取代？ 协和 2005 博 分生 一、名词 1. Kozak sequence 2. SD sequence 3. attenuator 4. 亲和层析 二、问答 1、是关于 Z-DNA 和回文序列的结构特点和功能的； 2、转录过程中进行起始定位的因子是什么？该因 子在转录全过程是否都存在？为什 么？现已经体外科隆并 纯化该蛋白，它能否单独与 DNA 结合？为什么？ 4、什么是“epigenetic mutation”？如何导致的？ 三、试验设计题： 1、已知某基因与某蛋白能够相互作用，设计实验 证明并找出作用位点。 2、已知某蛋白存在翻译后磷酸化修饰，设计实验 证明并找出磷酸化位点。 华中科大 2008 分生试题 1. 蛋白质的结构原则 2. 进化中为什么选择蛋白和 RNA 作为酶 3. 关于盐浓度对蛋白与 DNA 结合能力的影响 4.基 因功能的研究方法，简述 3 类及原理 5. 真核与原核细胞的启动子的结构和功能及翻译起 始的差异与共同点 6. 关于基因 CDNA 克隆和蛋白表达的方法的实验 设计题！有一植物中共有的基因与某重要功能有关。 请设计试验并叙述相关试验技术和方法， 在烟叶 中克隆该基因的 CDNA 全长，并获得用于获取抗体 的蛋白 7. 基因靶向技术的原理和意义协和 2003 博 生物化学与分子生物学 试题 一、名词解释（每题 2 分，共 10 分） 1、糖原脱支酶 2、酮体 3、氧化磷酸化 4、RNA INTERFERENCE 5、ATTENATOR 二、说明下列酶的作用特点与性质（每题 2.5 分， 共 10 分） 1、DNA 连接酶 2、DNA 内切酶 3、光复合酶 4、大肠杆菌 DNA 聚合酶 三、简答题（每题 10 分，共 50 分） 1、PH=8.0 时,核酸与蛋白质电泳泳动有何不同特点？ 2、1953 年 4 月 25，发生了什么让生物学界震动的 事情？请说明其意义？ 3、下面两句话对么？请分别说明理由： 1）Trp 操纵子只有衰减作用一种负调节方式。 2）Cro 蛋白与 阻遏蛋白结合与不同位点调节溶菌 性循环与溶源循环。 4、2002 年 SCIENCE 评出年度十大，说 icroRNA 是重要发现，说明icroRNA 的意义。 5、为什么 DNA 合成必须有引物而 RNA 合成不需 引物可以直接将两个核苷酸连接？ 四、问答题（每题 15 分，共 30 分） 1、近年来人们对真核基因调控理论有了深入的认 识，现在大家普遍接受“unified theory”的理论，请 你谈谈你对该理论的理解及你的观点。 2、用微球菌核酸酶酶解染色质，然后进行电泳， 发现 200bp、400bp、600bp、800bp的条带，试问 从该现象可以得出什么结论？图 1 所示的条带不是 非常狭窄，试解释其原因？协和 2004 博 生化与分生 一、名词解释（每题 2 分，共 30 分） 1、复合脂质 2、糖原脱支酶 3、酮体 4、氧化磷酸化 5、结构域 6、同工酶 7、染色体核骨架 8、染色质重塑 9、核基质 10、转导 11、密码子的偏嗜性 12、基因簇 13、逆转座子 14、表观遗传学改变(Epigenitic change) 15、双向电泳 二、填空题（每题 1 分，共 5 分） 1、协和生化的老主任是 。2、谁用什么实验证明 了核酸是遗传物质。 3、可以磷酸化的氨基酸是 、 、 。 4、带苯环的氨基酸是 、 、 。 5、DNA 在 nm 有最大的光吸收，原因是： ? 三、简答题（每题 8 分，共 40 分） 1、为什么核酸和蛋白都是有方向的? 2、信号转导的 cAMP 通路？ 3、什么是内切酶的星号活性？ 4、简述第二信使学说。 5、简述胆汁酸的生理功能。 四、设计题（共 25 分） 1、已知一种 cDNA 的中间一段序列，请设计一种 方法找到其全长。 （10 分） 3、 已知蛋白 X 是一种胞质信号转导中起作用的蛋 白请设计几种策略找与其相互作用的蛋白。 （15 分） 4、 协和 2005 博 生物化学与分子生物学 一、名词解释（每题 2 分，共 10 分） 1、必需脂肪酸 2、磷氧比 3、糖异生 4、酮体 5、hnRNA 二、判断（请判断对错并改错。每题 1 分，共 8 分） 1、有氧条件改为无氧条件，葡萄糖的利用速度增 加。 2、氰化物阻止了氧化磷酸化。 3、非糖饮食，偶数脂肪酸比奇数脂肪酸好。 4、胆固醇增高症患者，服用谷固醇，会增高血脂 之类的。 5、DNA 复制必须有引物，这一特点和复制的忠实 性（或准确性）有关。 6、体内 DNA 复制所需要的能量来自焦磷酸水解释 放的自由能。 7、剪接（小）体的大小为 40-60s。 8、真核 mRMA 前体剪接加工的机制是转酯反应， 这一过程不需要消耗 ATP。 三、填空（每题 1 分，共 15 分） 1、血液中的氨的来源 。 2、氨基丁酸的前体 。 3、体内合成 1 摩尿素要消耗 个 ATP,可以过膜运输 的中间物是 和 ， 水解后生成尿素。 4、连接尿素和 TCA 循环的两中间物为： 和 。 5、糖原合成的关键酶是 ，糖原分解的限素酶是 。 6、乙酰辅酶 A 的来源 ， ， ， ，去向 ， ， ， 。 7、蛋白在 280nm 处吸收强的原因是有 ， ， 。 8、 氨基酸参与嘧啶合成。 9、蛋白质组学是 的学科。 10、非蛋白 N 是 。 11、脑的氨的转运形式是 。 12、CPS 是 和 的中间产物。 13、 脱羧成为使血管扩张的物质。 14、胆固醇的代谢终产物是 。 15、脂肪酸进入线粒体的载体是 。 四、简答题（8 分） 胆汁酸循环的生化原理和意义。 五、论述题（每题 15 分，共 45 分） 1、根据图说明 DNA 链的方向，标出核糖 C 的序号， 并画出另一条相应的 DNA 链。 (图的内容是给了一个链没有标出方向) 2、已知 ddCTP 和 dCTP 的结构示意图（ddCTP 和 dCTP 的结构式是一个少 4 位的 OH，一个少 5 位的 P） ，问在 DNA 复制反应中， （1）如ddCTPdCTP，会出现什么现象？为什 么？ （2）ddCTP=10%dCTP，会出现什么现象？为什 么？ （3）dCMP 的浓度远大于 dCTP 或只有 10又会怎 样？为什么？ 3、图示说明大肠杆菌的乳糖操纵子模型的调控方 式。 六、简述题（每题 7 分，共 14 分） 1、有一个四肽，被胰蛋白酶水解后形成两个二肽， 其中一个在 280nm 处有强光吸收，并且有呱基反应， 另一个可被 HBr 水解后释放一个与茚三酮反应后呈 黄色的氨基酸。请写出四肽序列。 2、某组织中含有某种蛋白，但含量低也无法纯化， 已知蛋白分子量，并有抗体，如何用一种办法证明 该组织确有此蛋白。 协和 2006 博 生化与分生 一、填空 （24 空 24 分） 1.-年，由-和-（英文姓）首次提出了 dna 的双螺旋模型，其结果发表在-杂志，他们提 出的实验依据是-和-。 2.蛋白质浓度测定在-nm, 原因是-但有时 候也在 220nm 处测量，原因是 - 3.表皮生长因子受体具有-酶的活性， 4.嗅觉、视觉、味觉和细胞膜上的-蛋白结合， 这种受体具有-的结构特点，产生的第二信使是 - 二、名词解释 （4 题 16 分） 1. CpG island 2.CTD of RNA Pol II 3. SiRNA 三、问答题 （4 题 40 分） 1. 基因组 DNA 有时会产生 G:T 错配，DNA 复制时 有时会发生 A:C 错配，他们产生的原因是什么，各 怎么修复？（12 分） 2. 大肠杆菌的启动子（或操纵子）活性有无强弱之 分，如果有，决定其强弱的因素什么？（10 分） 3. 什么是基因印记（imprinting ）,它是怎么遗传的？ 举例说明。 （10 分） 4. 为什么说ribosome is a ribozyme”? （8 分） 四，名词解释 4 题 8 分 1. 酵母双杂交 2.细菌人工染色体 五，简述题 2 题 12 分 1. 给定一个组织，简述如何构建 cDNA 文库。 2. 简述基因敲除小鼠模型的策略2006 年协和分子生物学与生化考博试 题 大题： 1、基因印记的定义，及其遗传机制？ 2、cDNA 文库建立的策略及因注意的事项？ 3、基因剔除小鼠建立的策略？ 4、在 DNA 复制中容易出现 G-T 错配，转录时出现 好像是 C-U 错配，出现的机 制是什么？ 名词解释： siRNA 填空： 创立 DNA 双螺旋模型 姓 名，年，理论依据。 在眼 视神经细胞，鼻嗅细胞膜表面有（G ）蛋白， 其结构特点（ ） ，细胞内的第二信使（ ） 。 维持蛋白高级结构的因素（） （ )( )( ). 青岛大学 2004 博 分子生物学 一、 名词解释 1增强子 2cDNA 文库 3JAK 家族？ 4Pribnow 盒 5基因打靶 6oncogene 7锌指结构 8转座子 9载体 10反式作用因子 二、 简答题 1核酸电泳常用的染色剂及作用机理。 2以乳酸操纵子为例说明基因表达与阻遏。 3基因工程基本过程，结合专业举一个实例并说 明意义。 4工作中选择杂交方法的原则。 5有哪些第二信使，其来源以及在转录种的作用。 6DNA 片段可能含编码多肽链的前几个密码子： 5CGGAGGATCAGTCGATGTCCTGTGTG3 3GCCTCCTAGTCAGCTACAGGACACAC5 1) 哪一条链可能为模板链？ 2) mRNA 的顺序？ 3) 编码的 mRNA 能形成二级结构么？ 4) 翻译从哪里开始，哪个方向进行？ 5) 这条 DNA 片段最可能从原核还是真核细胞中分 离出来的？ 华中科大 2002 博 分子生物学 一. 名词解释并写出对应的英文名词（共 10 小题， 每小题 5 分，共 50 分） 1. 克隆载体 2. 表达载体 3. 假基因 4. 微卫星序列 5. 回文结构 6. 启动子 7. 癌基因 8. 多克隆位点 9. 增强子 10. 开放阅读框架 二. 问答题（共 3 小题，每小题 10 分，共 30 分） 1. 若要获得 IL-2 的基因工程产品，你应该怎么做？ 2. 真核细胞中基因表达的特异性转录调控因子是指 什么？根据它们的结构特征可以分为哪些类型？它 们和 DNA 相互识别的原理是什么？ 3. 简述细胞内癌基因激活的方式？ 三. 选答题（任选 2 小题，每小题 10 分，共 20 分） 1. 简述基因治疗中转移外源基因至体内的非病毒和 病毒途径的主要原理 2. 请你评价一下人类基因组计划（HGMP）完成的 意义（科学、经济和社会的） 3. 分子生物学实验中所涉及的引物有哪几种，各有 什么用途和特点？ 4. 简述 34 种 PCR 衍生技术及其应用 华中科大 2002 博 分生 一. 名词解释并写出对应的英文名词（共 10 小题， 每小题 5 分，共 50 分） 1. 克隆载体 2. 表达载体 3. 断裂基因 4. 双脱氧核苷酸（简单） 5. 多克隆位点 6. 启动子 7. 癌基因 8. 核糖体结合位点（简单） 9. 增强子 10. 开放阅读框架 二. 问答题（共 3 小题，每小题 10 分，共 30 分） 1. 什么是分子克隆技术？它的主要步骤是什么？ 2. 真核细胞和原核细胞基因表达在转录水平上调控 的特点。 3. 简述细胞内癌基因激活的方式？ 三. 选答题（任选 2 小题，每小题 10 分，共 20 分） 1. 简述基因治疗中转移外源基因至体内的非病毒和 病毒途径的主要原理 2. 请你评价一下人类基因组计划（HGMP）完成的 意义（科学、经济和社会的） 3. 就你所知 RNA 研究领域中，理论和技术方面的 进展有哪些。 4. 简述 PCR 技术中引物设计的要点。 华中科大 2003 博 分生 一. 将下列名词译成英文并解释（20 分） 1. 基因组 2. 操纵子 3. 反式作用因子 4. 癌基因 5. 锌指结构 6. 聚合酶链反应 7. 限制酶 8. 多克隆位点 9. 基因治疗 10. 质粒 二. 试述真核基因组结构的基本特点。 （20 分） 三. 试述重组 DNA 的基本过程。 （20 分） 四. 真核生物基因表达在转录水平上是如何调控的？ （20 分） 五. 试述基因治疗研究的主要内容或策略。 （20 分） 协和 2004 博 分生 一 名词解释 1、 同工酶 2、 染色体 3、 染色质 4、 核基质 5、 转化 6、 密码子的偏嗜性 7、 基因簇 二 简答体 为什么核酸和蛋白质都是有方向的 信号转导的 cAMP 通路 什么是内切酶的信号活性 三 论述题 给定一个 cDNA 序列，如何表达，纯化到蛋白质。 五、填空题 1、协和生化的老主任是谁 2、哪位学者用什么实验 证明了核酸是遗传物质。3、可以磷酸化的氨基酸 有哪三个。4、带苯环的氨基酸有哪三个。5、DNA 在多少 nm 有最大光吸收。 协和 2003 博 分生 1、近年来人们对真核基因调控理论有了深入的认 识，现在大家普遍接受“unified theory”的理论，请 你谈一谈对该理论的理解及其你的观点。 2、用微球菌核酸酶酶解染色质，然后进行电泳， 发现 200bp、400bp、600bp、800bp。 。 。的条带，试 问从该现象可以得出什么结论？图 1 所示的条带不 是非常狭窄，试解释其原因 协和 2003 博 分生 1、 质粒的不相容性和相容的分子机制 2、 HIV 的生活史 3、 肿瘤病毒致病的机制，试举例说明 4、 目前，在真核生物基因表达调控方面有 “unified theory”，这一理论是调控研究的一 大进展，谈谈你的认识 5、 计算 DNA 碱基组成 6、 RNA interference 7、 Attenator 浙江大学 2005 年秋季入学博士试题 分子生物学 （甲） 回答问题（100） 1、PCR 技术及其原理 2、激素的作用机制及其调控 3、基因芯片的原理和应用 4、cDNA 文库的构建 5、试述一条反向遗传克隆功能基因的途径 浙江大学 2005 春 博士 分子生物学（甲） 一、名词解释（20%） RFLP SSR EST STS CAP FISH AFLP SNP genome mRNA in situ hybrization 二 问答题 1、阐述 PCR 的原理和方法（ 15） 2、阐述 cDNA 文库原理和构建方法（20） 3、阐述一种细胞信号转导的途径（从接受信号到 调控基因表达） （25） 4、什么是基因突变？并说明产生基因突变有哪些 途径（20） 武汉大学 2004 博 分生 一：名词解释（6 选 5） 1.Poly A 和 Poly A signal 2.终止密码子和终止子 3.Operon 和 Operater 4.cis 调控和 trans 调控 5.琥珀突变和琥珀校正 6.ftRNAmet 和 tRNAmet 二：判断改错（1X20） 三：选择填空（2X10） 四：简答题（第 1 题 12，2 7 题选 4 题，4X7 ） 1.克隆了一个新基因，设计实验证明该基因内含 4 个 intron 2.列出真核基因 5-上游激活基因转录的元件并详细 介绍 3.比较原核和真核热休克基因转录起始机制 4.SD 序列和 Kozak 序列分别予以介绍 5.翻译延伸中有两个反式因子 EF.TU 和 EF.TS 参与， 需 ATP 水解提供能量，简述 GTP?GDP 循环机制 6.试述核型 intron 拼接中 spliceosome 的形成及拼接 简单机制 7.简述转录因子 Leucine Zipper Protein 的结构和功 能 上海第二医科大学 1999 年分子生物学考博试题 一、名词解释： 亮氨酸拉链 物理图谱? Z-DNA 穿梭载体? G 蛋白? 端粒? 松弛型复制子? a-螺旋双亲性 ? 抑癌基因? 核酶 二.问答： 1. 试图用两种简易的方法鉴别同工酶； 2. 什么是复性，杂交，有何区别？如何判断核酸 是否复 性？影响核酸复性的因素； 3. 试述 DNA 、RNA 聚合酶，逆转录酶的催化活 性？ 4. 试述 RNA 的基础结构，举出 6 种不同的 RNA， 并叙述其 功能； 5. 试述两项近期重大的分子生物学进展，并阐述 其对生 命科学的重大影响。 上海第二医科大学 2000 年分子生物学考博试题 ribozyme PTP PTK PSPK Kcat/km 酶活性调节 1何谓 DNA 克隆？为何基因工程又称重组 DNA 技术 2PE 分类，功能，特性 2 质粒及特征 4载体种类及特点 5重组 DNA 中哪几种联接方式 6转化，转染，感染的区别 7DNA 克隆的筛选方法及原理 8测蛋白及核酸的方法 9磺胺和氨甲喋呤抗菌，抗肿瘤机理 10.原、真核 mRNA 转录的比较 半保留复制具高度 真实性？血红素合成，限速，调节 中国科学院发育生物学所分子生物学 2000 年博士 研究生入学试题 一、 请解释下列名词，并写出它们的英文术词： 1 基因家族 2 持家基因 3 同形异位盒 4 基因沉默 5 功能基因组学 6 信号肽 7 信号传递 8 细胞编程性死亡 二、 限制性内切酶是如何发现的？限制性内切酶 可分成几类？如何使用限制内切酶进行分子生物学 的研究？ 三、 请分别列出用于蛋白质和核酸的电泳分析和 分离的技术，并说明这些技术与蛋白质和核酸的性 质的关系。 四、 请比较植物和动物基因工程的异同，并在你 所熟悉的生物（植物或动物）的范围内探讨基因工 程的前沿和瓶颈问题。 五、 获得一个功能未知的基因克隆后，怎样才能 阐明该基因的功能？请你根据自己熟悉的某种真核 生物提出具体的研究方案。 六、 在真核生物基因的 DNA 序列中，哪些部分的 核苷酸序列的变异会影响其编码的蛋白质的结构和 功能？为什么？ 1994 年博士研究生入学考试试题 一、名词解释 1、内含子（intron） 2、核小体（nucleosome） 3、操纵子（operon） 4、引发体（promosome） 5、增变基因（mutator gene ） 6、异源双链体（heteroduplex） 7、转座子（transposon） 8、卫星 DNA（satellite DNA） 9、Z 型 DNA（Z DNA） 10、无效突变（null mutation） 11、RNA 编辑（RNAediting） 12、溶源现象（lysogenesis） 13、密码兼并（code degeneracy） 14、拟基因（pseudogene） 15、光复合修复（photoreaction repair） 16、断裂基因（split gene） 17、Chi 序列（ Chi sequence） 18、复制子（replicon） 19、同裂酶（isoschizomer） 20、核酶（ribozyme） 二、请简要回答下列问题（每题 6 分，共 60 分） 1、同源重组与位点专一性重组有何异同？ 2、错配校正酶（mismatch correction enzyme）在校 正错配碱基时，往往能切除新合成链上的碱基，其 原理是什么？ 3、启动子（promoter）的作用是什么？原核生物启 动子有哪些结构特征？ 4、病毒与细菌的最主要区别是什么？ 5、基因簇（gene cluster）与基因家族（ gene family）有何区别？ 6、在真核生物中有哪几种 RNA 聚合酶，它们分别 转录哪种 RNA 分子 7、真核生物中 tRNA、rRNA、mRNA 的剪接各有 何特点？ 8、普通 PCR 与随机引物 PCR（RAPD）有何区别？ 9、在 DNA 复制过程中会形成一种复制体 （replisome）的结构，它是由哪几部分组成的？ 10、双脱氧法测序的基本原理是什么？ 分子生物学 一、填空 1 核糖与磷酸为（）键，碱基与核糖为（）键，核 苷酸间为（）键。 2 Alu 为（） ，卫星 DNA 为（） 。 3 写出基因、基因组和染色体的英文。 4 DNA 结构的稳定靠（） （） （） 。 5 真核 rRNA 的顺序为（） （） （） 。 6 真核 RNA 聚合酶（）被 鹅膏蕈碱强烈抑制。 7 蛋白质合成中 GTP 为（） 。 8 （） （）只有一组密码子。 9 密码子具有（） （） （） （） （） （）的性质。 10 珠蛋白 TATA 位于（） ，GAAT 位于（） ，GC 框位于（） 。 11 割裂基因中（）长度无显著变化， （）长度变化 大。 12 光裂酶是（）修复。 二、是非题 1 增强子为一类启动子，它比一般启动子具更强的 启动作用。 2 原核生物 DNA 的转录和翻译几乎同时进行。 3 转座子可在不同染色体间移动。 4 TBP 结合于小沟。 5 真核所有蛋白质的基因都不连续。 6 据额外环长短不同将 tRNA 分为二类。 7 蛋白质合成时 tRNA 都先入 A 位。 8 真核 RNA 聚合酶可独立起始转录，转录因子是 增强转录效率。 9 真核组成型基因在所有组织中表达水平都相同。 10 加入色氨酸时，原核细胞色氨酸操纵子的结构 基因表达，色氨酸得以利用。 三、简答题 1 核小体的结构 2 16s rRNA 在蛋 白质合成中的作用 3 PCR 的原理和过程 4 真核与原核 mRNA 的异同 四、问答 1 X174的复制过程。 2 乳糖操纵子的调控机理。 3 核 RNA 的剪接。 4 比较 EFTu，EFTs 和 EFG 的功能。 军事医学科学院 1995 年攻读博士学位研究生入学 考试 分子生物学试题 请任选以下 5 题进行讨论（每题 20 分） 1 Apoptosis 的生物学意义及其调控基因。 2 基因转移的概念及基因转移载体应具备的条件。 3 原癌基因的功能及其转化为癌基因的机理。 4 人主要组织相容性抗原在细胞识别中的作用及原 理。 5 染色体重排对生物体的影响及其主要类型。 6 噬菌体显示技术原理及其在生物学研究中的意义。 军事医学科学院 1996 年攻读博士学位研究生入学 考试 分子生物学试题 1 什么是原癌基因？（4 分）它们怎样被反转录病 毒激活？（16 分） 2 什么是 tumor supperssor gene？（4 分）举例说明 它的调控功能。 （16 分） 3 细胞染色体的异常如何导致癌基因的激活？（20 分） 4 解释以下名词： (1) gene knock-out (5 分) (2) molecular hybridization (5 分) (3) restriction fragment length polymorphis